一种黄芪桂枝五物汤制剂的质量控制方法技术

本发明专利技术涉及一种黄芪桂枝五物汤制剂的质量控制方法，包括建立黄芪桂枝五物汤制剂的特征图谱和5种成分的含量同时测定的方法。黄芪桂枝五物汤制剂的特征图谱，从整体上评价黄芪桂枝五物汤制剂的化学物质种类及其含量。桂枝五物汤制剂的化学物质种类及其含量。桂枝五物汤制剂的化学物质种类及其含量。

【技术实现步骤摘要】
一种黄芪桂枝五物汤制剂的质量控制方法
[0001]本申请是2021年2月3日提交的申请号为202110149648.5，专利技术名称为“一种黄芪桂枝五物汤制剂的制备方法及其质量控制方法”的专利技术专利申请的分案申请。
一、

[0002]本专利技术涉及中药
，特别是涉及一种黄芪桂枝五物汤制剂的质量控制方法。
二、
技术介绍

[0003]黄芪桂枝五物汤源于张仲景《金匮要略
·
血痹虚劳病脉证并治》，为桂枝汤的化裁方，乃桂枝汤倍生姜、去甘草、加黄芪而成。原方主治血痹证，有益气温经，和经通痹之功。具有确切疗效，被收录在2018年4月份国家公布的《古代经典名方目录(第一批)》中，表明该方具有较高的开发应用价值。
[0004]黄芪桂枝五物汤的临床应用范围较广泛，同时，亦取得令人满意的疗效。在临床各科的应用不仅局限于内服，在外敷上也取得一定疗效，这在一定程度上体现出本方配伍精准。近15年来黄芪桂枝五物汤的临床应用范围进一步拓展，尤其是在治疗周围神经病变方面疗效显著。黄芪桂枝五物汤所治疗疾病的范围虽广，但总以气虚寒凝血瘀为基本病机，体现了中医学“异病同治”的原理。黄芪桂枝五物汤在临床广泛的应用，使传统方剂和现代医学有机地结合起来，更好地服务于临床，提高疾病的治愈率，减轻患者的痛苦，满足临床需要。
[0005]现代药理研究发现，黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷主要用于提高免疫功能，增强抗氧化、抗辐射和抗癌作用，保护心脑血管、肝脏、肾脏和肺脏作用，保护脑细胞、提高记忆力，舒张血管平滑肌，激素样作用，抗菌及抑制病毒作用，降血脂、降血糖、减少糖尿病并发症等；白芍中芍药苷，具有扩张血管、镇痛镇静、抗炎抗溃疡、解热解痉、利尿的作用；桂枝中有机酸类成分以肉桂酸为主，具有抗氧化、抗血栓等作用；6
‑
姜辣素抗氧化、抗细胞凋亡和抗炎作用；多糖具有抗氧化、增强免疫力、抗癌、保肝等作用。
三、
技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是提供一种黄芪桂枝五物汤制剂的制备方法及其质量控制方法，黄芪桂枝五物汤制剂的制备方法能提高黄芪桂枝五物汤制剂中芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、肉桂酸、6
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姜辣素的含量；黄芪桂枝五物汤制剂的质量控制方法能利用高效液相色谱法同时测定黄芪桂枝五物汤制剂中芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、肉桂酸、6
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姜辣素的含量；针对黄芪桂枝五物汤制剂建立了HPLC特征图谱。
[0007]为实现上述目的，本专利技术的具体技术方案如下：一种黄芪桂枝五物汤制剂的制备方法，所述黄芪桂枝五物汤由下述原料药按重量份制成：黄芪2
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4份、桂枝2
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4份、白芍2
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4份、生姜4
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8份、大枣3
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6份，原料药的优选重量比为：黄芪3份、桂枝3份、白芍3份、生姜6份、大枣4份。黄芪桂枝五物汤制剂由以下方法制备：(1)取黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣，加蒸馏
水用闪式提取器提取2次，每次提取的加水量分别为黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣总重量的12
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19倍量，提取时间为1.8
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5.6min，提取温度为50℃，过滤，合并滤液，得药渣I和滤液A，备用；将药渣I加入9.5倍重量的体积浓度为95％的乙醇浸泡4h，过滤，得滤液B备用；取滤液A蒸馏收集挥发油，55℃减压浓缩至比重为1.05
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1.21的浸膏，得挥发油C和浸膏D，备用；取挥发油C，加入7倍重量的β
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环糊精研磨包合，冷冻干燥，粉碎成过100目筛的细粉，得β
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环糊精包合物C，备用；取滤液B，50℃减压回收乙醇，减压浓缩成比重为1.02
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1.19的浸膏，得浸膏E，冷冻干燥，粉碎成过200目筛的提取物极细粉，得提取物极细粉A，备用；取浸膏D，以孔径为10000分子量的卷式膜过滤，滤液减压回收溶剂，减压浓缩至25℃时比重为1.13的浸膏，冷冻干燥，粉碎成过200目筛的提取物极细粉，得提取物极细粉B，备用；取提取物极细粉A、提取物极细粉B、β
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环糊精包合物C混合均匀，加辅料制备成中药制剂。
[0008]本专利技术制备的黄芪桂枝五物汤制剂中芍药苷的含量不低于175.72mg/g(HPLC法测定)、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量不低于3.78mg/g(HPLC法测定)、肉桂酸的含量不低于10.65mg/g(HPLC法测定)、6
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姜辣素的含量不低于8.2mg/g(HPLC法测定)、总挥发油含量不低于0.1％(ml/g)(按照2015版《中国药典》(四部)附录2204挥发油测定法乙法测定总挥发油含量)。
[0009]2015版《中国药典》(四部)附录2204挥发油测定法乙法：取水约300ml与玻璃珠数粒，置烧瓶中，连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶时止，再用移液管加人二甲苯1ml，然后连接流冷凝管。将烧瓶内容物加热至沸腾，并继续蒸馏，其速度以保持冷凝管的中部呈冷却状态为度。30分钟后，停止加热，放置15分钟以上，读取二甲苯的容积，取供试品适量(相于含挥发油0.5～1.0ml)，称定重量(准确至0.01g)，置烧瓶中，加水300～500ml(或适量)与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时止。置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸腾，并持微沸约5小时，至测定中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。放置1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平齐，读取挥发油量，自油层量中减去二甲苯量，即挥发油量，再计算供试品中挥发油的含量(％)。
[0010]本专利技术针对黄芪桂枝五物汤制剂建立了特征图谱及5种成分的含量测定方法，其中，芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、肉桂酸、6
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姜辣素可利用HPLC法同时测定，其特征在于，包括以下步骤：
[0011]步骤1，黄芪桂枝五物汤制剂供试品溶液的制备：取黄芪桂枝五物汤制剂样品适量，加70％甲醇适量使溶解，转移至10ml容量瓶中，超声(250w，40KHz)处理30min，放至室温，用70％甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0012]步骤2，混合对照品溶液的制备：精密称定芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷，肉桂酸和6
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姜辣素对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液。
[0013]步骤3，黄芪桂枝五物汤制剂中4种成分含量的同时测定及特征图谱测定：将步骤1制备的黄芪桂枝五物汤制剂供试品溶液注入HPLC进行分析，测定15批黄芪桂枝五物汤制剂样品中4种成分的含量及特征图谱。所述的黄芪桂枝五物汤制剂的特征图谱及4种成分同时测定的检测方法，其液相色谱条件为：乙腈(A)
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0.2％甲酸水溶液(B)，梯度洗脱；检测波长278nm本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定黄芪桂枝五物汤制剂的特征图谱的方法，其特征在于，所述黄芪桂枝五物汤制剂由下述原料药按重量份制成：黄芪2
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4份、桂枝2
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4份、白芍2
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4份、生姜4
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8份、大枣3
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6份，所述黄芪桂枝五物汤制剂由以下方法制备：(1)取黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣，加蒸馏水用闪式提取器提取2次，每次提取的加水量分别为黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣总重量的12
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19倍量，提取时间为1.8
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5.6min，提取温度为50℃，过滤，合并滤液，得药渣I和滤液A，备用；将药渣I加入9.5倍重量的体积浓度为95％的乙醇浸泡4h，过滤，得滤液B备用；取滤液A蒸馏收集挥发油，55℃减压浓缩至比重为1.05
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1.21的浸膏，得挥发油C和浸膏D，备用；取挥发油C，加入7倍重量的β
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环糊精研磨包合，冷冻干燥，粉碎成过100目筛的细粉，得β
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环糊精包合物C，备用；取滤液B，50℃减压回收乙醇，减压浓缩成比重为1.02
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1.19的浸膏，得浸膏E，冷冻干燥，粉碎成过200目筛的提取物极细粉，得提取物极细粉A，备用；取浸膏D，以孔径为10000分子量的卷式膜过滤，滤液减压回收溶剂，减压浓缩至25℃时比重为1.13的浸膏，冷冻干燥，粉碎成过200目筛的提取物极细粉，得提取物极细粉B，备用；取提取物极细粉A、提取物极细粉B、β
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环糊精包合物C混合均匀，加辅料制备成中药制剂；所述中药制剂中芍药苷的含量不低于175.72mg/g、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量不低于3.78mg/g、肉桂酸的含量不低于10.65mg/g、6
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姜辣素的含量不低于8.2mg/g、总挥发油含量不低于0.1％；所述测定黄芪桂枝五物汤制剂的特征图谱的方法包括以下步骤：步骤1，黄芪桂枝五物汤制剂供试品溶液的制备：取黄芪桂枝五物汤制剂样品适量，加70％甲醇适量使溶解，转移至10ml容量瓶中，250w，40KHz超声处理30min，放至室温，用70％甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；步骤2，混合对照品溶液的制备：精密称定芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷，肉桂酸和6
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姜辣素对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；步骤3，黄芪桂枝五物汤制剂特征图谱测定：将步骤1制备的黄芪桂枝五物汤制剂供试品溶液注入高效液相色谱仪进行分析，测定黄芪桂枝五物汤制剂样品特征图谱。2.一种同时测定黄芪桂枝五物汤制剂中的芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、肉桂酸、6
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姜辣素四种成分的含量的方法，其特征在于，所述黄芪桂枝五物汤制剂由下述原料药按重量份制成：黄芪2
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4份、桂枝2
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4份、白芍2
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4份、生姜4
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8份、大枣3
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6份，所述黄芪桂枝五物汤制剂由以下方法制备：(1)取黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣，加蒸馏水用闪式提取器提取2次，每次提取的加水量分别为黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣总重量的12
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19倍量，提取时间为1.8
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5.6min，提取温度为50℃，过滤，合并滤液，得药渣I和滤液A，备用；
将药渣I加入9.5倍重量的体积浓度为95％的乙醇浸泡4h，过滤，得滤液B备用；取滤液A蒸馏收集挥发油，55℃减压浓缩至比重为1.05
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1.21的浸膏，得挥发油C和浸膏D，备用；取挥发油C，加入7倍重量的β
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环糊精研磨包合，冷冻干燥，粉碎成过100目筛的细粉，得β
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环糊精包合物C，备用；取滤液B，50℃减压回收乙醇，减压浓缩成比重为1.02
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1.19的浸膏，得浸膏E，冷冻干燥，粉碎成过200目筛的提取物极细粉，得提取物极细粉A，备用；取浸膏D，以孔径为10000分子量的卷式膜过滤，滤液减压回收溶剂，减压浓缩至25℃时比重为1.13的浸膏，冷冻干燥，粉碎成过200目筛的提取物极细粉，得提取物极细粉B，备用；取提取物极细粉A、提取物极细粉B、β
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环糊精包合物C混合均匀，加辅料制备成中药制剂；所述中药制剂中芍药苷的含量不低于175.72mg/g、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量不低于3.78mg/g、肉桂酸的含量不低于10.65mg/g、6
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姜辣素的含量不低于8.2mg/g、总挥发油含量不低于0.1％；所述同时测定黄芪桂枝五物汤制剂中的芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、肉桂酸、6
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姜辣素四种成分的含量的方法包括以下步骤：步骤1，黄芪桂枝五物汤制剂供试品溶液的制备：取黄芪桂枝五物汤制剂样品适量，加70％甲醇适量使溶解，转移至10ml容量瓶中，250w，40KHz超声处理30min，放至室温，用70％甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；步骤2，混合对照品溶液的制备：精密称定芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷，肉桂酸和6
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姜辣素对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；步骤3，黄芪桂枝五物汤制剂中4种成分含量的同时测定：将步骤1制备的黄芪桂枝五物汤制剂供试品溶液注入高效液相色谱仪进行分析，测定黄芪桂枝五物汤制剂样品中4种成分的含量。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的黄芪桂枝五物汤制剂的中药组合物由下述原料药按重量份制成：黄芪2份、桂枝2份、白芍2份、生姜4份、大枣3份，或者所述的黄芪桂枝五物汤制剂的中药组合物由下述原料药按重量份制成：黄芪4份、桂枝24份、白芍4份、生姜8份、大枣6份，或者所述的黄芪桂枝五物汤制剂的中药组合物由下述原料药按重量份制成：黄芪3份、桂枝3份、白芍3份、生姜6份、大枣4份，或者所述的黄芪桂枝五物汤制剂的中药组合物由下述原料药按重量份制成：黄芪4份、桂枝2份、白芍3份、生姜6份、大枣3份。4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述黄芪桂枝五物汤制剂由以下方法之一制备：方法一：取黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣，加蒸馏水用闪式提取器提取2次，每次提取的加水量分
别为黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣总重量的12倍量，提取时间为1.8min，提取温度为50℃，过滤，合并滤液，得药渣I和滤液A，备用；将药渣I加入9.5倍重量的体积浓度为95％的乙醇浸泡4h，过滤，得滤液B备用；取滤液A蒸馏收集挥发油，55℃减压浓缩至比重为1.05的浸膏，得挥发油C和浸膏D，备用；取挥发油C，加入7倍重量的β
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环糊精研磨包合，冷冻干燥，粉碎成过100目筛的细粉，得β
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环糊精包合物C，备用；取滤液B，50℃减压回收乙醇，减压浓缩成比重为...

【专利技术属性】
技术研发人员：高松，郭水柱，王瑞娜，
申请(专利权)人：仲景宛西制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：