一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法，通过共聚焦拉曼光谱仪检测使用含0.1

【技术实现步骤摘要】
一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法


[0001]本专利技术涉及一种化妆品有效成分的透皮吸收检测方法，特别是一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法。

技术介绍

[0002]蓝铜胜肽(Copper Glycyl
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histidyl
‑
lysine
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tripeptide，GHK
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Cu)是由甘氨酰
‑
组氨酰
‑
赖氨酸三肽和二价铜离子结合而成的化合物，也被称为“蓝铜肽”。1973年，美国的罗伦
·
皮卡特博士率先在人体中发现了蓝铜胜肽，该成分在人体内天然存在，人体同源，对皮肤温和友好。图1为GHK
‑
Cu的结构示意图，蓝铜胜肽以GHK为载体，络合和运载Cu
2+
进入细胞从而发挥相应的作用。在化妆品领域，有多项研究表明，蓝铜胜肽具有保护细胞免受光损伤、修护、减少皱纹、增加皮肤弹性等功效。虽然，目前蓝铜胜肽的修护和抗衰能力已经被高度认可，但是由于该成分有“易失活、不稳定，在化妆品应用中的配方难度较高”等缺点。这些因素限制了该成分的流行，导致其长时间“好而不火”，成为“抗衰新三巨头(玻色因、视黄醇、蓝铜胜肽)”中走红最晚的一个。在皮肤中的渗透能力对于化妆品中活性成分的能否发挥其有益作用至关重要。
[0003][0004]Mazurowskaet等，通过Flynn扩散池证明了GHK
‑
Cu水溶液可以通过亲脂膜，还通过含脂质体膜的Franz扩散模型中研究了添加GHK
‑
Cu的乳液的体外渗透性能。目前，GHK
‑
Cu作为活性成分在化妆品中的应用越来越多，但GHK
‑
Cu在人体皮肤渗透性如何，目前还鲜有研究。
[0005]因此，亟需研发一款能够检测GHK
‑
Cu在人体皮肤渗透性的方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于，提供一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法。本专利技术能够有效的检测出GHK
‑
Cu在人体皮肤渗透性。
[0007]本专利技术的技术方案：一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法，通过共聚焦拉曼光谱仪检测使用含0.1
‑
5％GHK
‑
Cu的化妆品前后，皮肤下0
‑
27μm处不同深度的拉曼光谱信号；将使用含0.1
‑
5％GHK
‑
Cu的化妆品后皮肤的拉曼光谱信号与使用前皮肤拉曼信号进行对比，确定待测化妆品中GHK
‑
Cu的特征信号峰；并由待测化妆品中GHK
‑
Cu
的特征信号峰强度对比皮肤下0
‑
27μm的光谱强度，通过数据统计分析方法处理、分析原始数据，计算化妆品中CHK
‑
Cu在皮肤下0
‑
27μm不同深度的经皮吸收相对量，进而计算化妆品中CHK
‑
Cu的经皮吸收相对总量。
[0008]前述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法中，经皮吸收相对量是指某一皮肤深度下，相对于该测试深度皮肤中角蛋白含量计算得到的物质的相对量；具体计算方法为：将样品使用后测试区域的拉曼信号，与使用前皮肤拉曼谱图做比较，获得测试样品的经皮吸收相对量。
[0009]具体的比较方法为：对使用含GHK
‑
Cu的化妆品前后皮肤的拉曼光谱进行分析处理，利用数学模型半定量测试样品中GHK
‑
Cu的经皮吸收相对量。经皮吸收相对量>0时，表示GHK
‑
Cu在该皮肤深度有吸收，相对量值越大，GHK
‑
Cu的经皮吸收量越大。
[0010]前述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法中，经皮吸收相对总量是指相对于皮肤中角蛋白含量计算得到的物质在测试深度范围内的相对总量；
[0011]经皮吸收相对总量的具体计算过程为：将某时间点下物质在皮肤不同深度的经皮吸收相对量进行数学方程拟合，通过对拟合方程积分的方式计算相应深度范围内的经皮吸收相对总量。
[0012]数学方程拟合法是利用某种数学方程对原序列中的趋势进行拟合，揭示序列长期趋势的一种方法。
[0013]前述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法中，具体包括以下步骤：
[0014]1)GHK
‑
Cu水溶液的配制
[0015]室温环境下，将精准称量的GHK
‑
Cu粉末溶解于纯净水中，混合均匀成蓝色透明澄清的液体，得到5
‑
20％的GHK
‑
Cu的水溶液；
[0016]2)测试样品拉曼光谱检测
[0017]采用共聚焦拉曼光谱技术，共聚焦拉曼显微镜的激发光源波长为660nm，检测5
‑
20％的GHK
‑
Cu水溶液和测试样品(含0.1
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5％的GHK
‑
Cu的化妆品)的拉曼光谱；
[0018]3)GHK
‑
Cu的经皮吸收检测
[0019]在测试前，受试者用清水清洗双侧前臂，在恒温恒湿环境中暴露前臂并平衡30
‑
50min，平衡过程中，对受试者双侧前臂内侧分别标记2cm
×
2cm区域作为待测区域；
[0020]在使用测试样品前，使用共聚焦拉曼显微镜，选取激发激光源660nm检测受试者待测区域皮肤本底的光谱信号；
[0021]进行测试时，在受试者待测区域涂抹测试样品至吸收，在使用样品0.5
‑
4h后，选取激发激光源660nm检测受试者待测区域皮肤内0
‑
27μm处的GHK
‑
Cu的渗透深度和经皮吸收相对量；
[0022]4)数据处理
[0023]拉曼光谱原始数据用LabSpec软件进行处理，导出结果使用R、MATLAB、Origin和/或MicrosoftExcel的统计函数进行统计分析。
[0024]前述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法中，步骤2)中，波数范围：400
‑
2000cm
‑1；曝光时间：10s；每种样品扫描3
‑
6次。
[0025]前述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法中，受试者的选
择：根据入选和排除标准，选择3名以上年龄18
‑
60周岁，身体健康、无皮肤问题的受试者参加测试。
[0026]前述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法中，步骤3)中的恒温恒湿条件为：测试温度20.3
‑
22.0℃、相对湿度46％
‑
56％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法，其特征在于：通过共聚焦拉曼光谱仪检测使用含0.1
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5％GHK
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Cu的化妆品前后，皮肤下0
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27μm处不同深度的拉曼光谱信号；将使用含0.1
‑
5％GHK
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Cu的化妆品后皮肤的拉曼光谱信号与使用前皮肤拉曼信号进行对比，确定待测化妆品中GHK
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Cu的特征信号峰；并由待测化妆品中GHK
‑
Cu的特征信号峰强度对比皮肤下0
‑
27μm的光谱强度，通过数据统计分析方法处理、分析原始数据，计算化妆品中CHK
‑
Cu在皮肤下0
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27μm不同深度的经皮吸收相对量，进而计算化妆品中CHK
‑
Cu的经皮吸收相对总量。2.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法，其特征在于，经皮吸收相对量是指某一皮肤深度下，相对于该测试深度皮肤中角蛋白含量计算得到的物质的相对量；具体计算方法为：将样品使用后测试区域的拉曼信号，与使用前皮肤拉曼谱图做比较，获得测试样品的经皮吸收相对量。3.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法，其特征在于，经皮吸收相对总量是指相对于皮肤中角蛋白含量计算得到的物质在测试深度范围内的相对总量；经皮吸收相对总量的具体计算过程为：将某时间点下物质在皮肤不同深度的经皮吸收相对量进行数学方程拟合，通过对拟合方程积分的方式计算相应深度范围内的经皮吸收相对总量。4.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱在体检测化妆品中蓝铜胜肽含量的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1)GHK
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Cu水溶液的配制室温环境下，将精准称量的GHK
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Cu粉末溶解于纯净水中，混合均匀成蓝色透明澄清的液体，得到5
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20％的GHK
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Cu的水溶液；2)测试样品拉曼光谱检测采用共聚焦拉曼光谱技术，共聚焦拉曼显微镜的激发光源波长为660nm，检测5
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20％的GHK
‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：毕永贤，胡雪情，周浩淼，代晓艳，孔德承，唐萌，杜雨涵，王凤霞，
申请(专利权)人：杭州时光肌生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：