一种实验动物急性焦虑模型的构建方法以及应用技术

本申请涉及了一种实验动物急性焦虑模型的构建方法以及应用，通过向实验动物的体内注射外源性的甲状旁腺激素相关蛋白，使实验动物在短时间内产生焦虑症状，从而获得急性的具有焦虑症状的实验动物模型。本申请获得的实验动物急性焦虑模型具有见效快、造模时间较短、焦虑表型明显等优点，从而解决了传统动物急性焦虑模型在造模过程中存在的易产生额外伤害、实验动物通气不畅、存在束缚压力差异、实验动物额外晕眩等问题，为焦虑障碍的机制研究和药物研发提供了便利。研发提供了便利。研发提供了便利。

【技术实现步骤摘要】
一种实验动物急性焦虑模型的构建方法以及应用


[0001]本申请涉及动物模型领域，具体涉及一种实验动物急性焦虑模型的构建方法以及应用。

技术介绍

[0002]焦虑障碍包括广泛性焦虑障碍、社交焦虑障碍、恐慌症、恐惧症、创伤后应激障碍、与广场恐惧症。焦虑障碍是人群内最常见的一类精神障碍性疾病。在44个国家流行病学研究的系统回顾中，焦虑障碍的全球流行率约为7.3％，即全世界每14人中就有1人患有焦虑障碍。焦虑障碍对患者的生活质量具有显著的影响。首先，焦虑会促使交感神经过度激活并升高循环系统的儿茶酚胺水平，其次，焦虑也会影响人的各项行为反应，如增加进食、饮酒或吸烟等。并且，焦虑障碍将冠心病的发生风险提高至26％，心源性死亡的风险提高至48％，焦虑已成为冠心病和心源性死亡的独立危险因素。因此，研究焦虑障碍发生发展的机制、寻找焦虑障碍的有效干预手段、加速强效靶向药物的研究势在必行。
[0003]焦虑障碍的机制以及相关的药物研究需要使用实验动物焦虑模型，现有的焦虑模型主要分为慢性焦虑模型和急性焦虑模型。慢性焦虑模型的造模时间长，对相关研究造成了一定的阻碍。急性焦虑模型则常用急性束缚应激(acute restraint stress，ARS)，将小鼠束缚在狭小的塑料管中1
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2小时后完成焦虑模型的构造。本申请针对现有急性焦虑模型的缺点提出了一种优化的实验动物急性焦虑模型。
[0004]急性焦虑模型的操作步骤为，在50ml容量的塑料离心管壁上钻出通气孔，将实验小鼠放入离心管中，扭紧瓶盖，静止60
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120分钟随后观察或测量其焦虑表型。该造模方式存在以下缺点：
[0005](1)小鼠个体差异使造模结果产生差异：50ml塑料离心管容积固定，但是小鼠受个体差异影响，有可能出现实验小鼠无法放入管内或在管内过度挤压的情况；或者管内有多余空间，致使小鼠在离心管内可前后挪动，容易造成束缚不充分的情况；上述情况造成小鼠个体感受的束缚压力不同，导致产生的动物焦虑模型的造模效果具有差异；
[0006](2)实验动物透气不足：塑料离心管壁的透气孔是由实验人员主观钻孔的，可能会出现孔隙不足，从而导致小鼠透气不足，使实验小鼠产生过度憋气的情况；或者过度钻孔造成束缚不充分，影响后续的实验结果；
[0007](3)实验动物额外眩晕：塑料离心管较轻，实验小鼠在管内的活动容易使离心管左右滚动，会对实验小鼠造成额外的眩晕感进而影响实验小鼠的焦虑结果；
[0008](4)实验动物额外伤害：小鼠放入离心管时易挣扎，可能会磕碰到管口造成实验小鼠具有额外伤害；
[0009](5)耗时长：在构造多个实验动物模型时，急性束缚应激时间较长，单只动物束缚时间不少于60分钟，实验组间或实验组内动物数量过多时易影响测量效率，并且每日测量动物数量有限。
[0010]因此，现有技术中的实验动物焦虑模型的造模方式具有多种缺点，例如，造模结果
差异大、实验动物透气性不足、实验动物额外眩晕、实验动物额外反应、耗时长等。上述缺点增加了焦虑精神障碍的机制研究的工作量并对相关研究造成了许多困难。

技术实现思路

[0011]本申请首次证实了甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone
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related protein,PTHrp)对情绪的作用，并创造了外源性注射PTHrp引起实验动物焦虑表型的方法。本申请的目的在于克服现有技术的不足，提供一种更为简洁高效的实验动物急性焦虑模型造模方式，以解决现有的实验动物焦虑模型的造模方式中存在的问题，为焦虑症的机制研究和药物研发提供了便利。
[0012]为实现上述目的，本申请提供如下技术方案：
[0013]本申请的第一方面在于提供了一种实验动物急性焦虑模型的构建方法，包括以下步骤：
[0014]S1、稳定实验动物的情绪；
[0015]S2、向实验动物的体内注射甲状旁腺激素相关蛋白。
[0016]S3、等待实验动物产生焦虑情绪，从而获取实验动物急性焦虑模型。
[0017]优选地，在实验动物的尾静脉注射甲状旁腺激素相关蛋白。
[0018]优选地，当实验动物为小鼠时，甲状旁腺激素相关蛋白的注射剂量为1ng/只。
[0019]优选地，在步骤S1中稳定实验动物的情绪的方法为抚触适应，在特定的时间范围内，每天在固定时间段内对小鼠进行抚触。
[0020]进一步地，在步骤S3中甲状旁腺激素相关蛋白在实验动物中起作用之后检测实验动物的焦虑表型。
[0021]优选地，通过旷场实验检测实验动物的焦虑表型，若实验动物的焦虑表型达标，则构建完成。
[0022]优选地，在步骤S3中的等待时间为15分钟，小鼠产生焦虑情绪。
[0023]本申请的第二方面在于提供了一种实验动物急性焦虑模型，该实验动物急性焦虑模型由上述方法制得。
[0024]优选地，在步骤S1中的实验动物为大鼠、小鼠、兔中的任意一种。
[0025]本申请的第三方面在于提供了一种实验动物急性焦虑模型在研究焦虑障碍的机制中的应用，通过检测所述实验动物急性焦虑模型的焦虑表型，研究药物对情绪障碍的治疗效果。
[0026]与现有技术相比，本申请的有益效果包括：
[0027]本申请提供了一种实验动物急性焦虑模型的构建方法以及应用，创造性地通过向实验动物体内注射外源性的甲状旁腺激素相关蛋白获得了具有焦虑症状的实验动物模型。这一方法具有简洁高效等优点，并且获得的动物焦虑模型的焦虑表型明显。同时本申请也避免了传统焦虑动物模型造模过程中存在的出现额外伤害、影响自由通气、存在束缚压力差异、实验动物额外晕眩等问题。同时本申请见效快，造模时间较短，便于批量生产多个动物焦虑模型，注射药物后短期即可进行行为学功能的测定，极大地缩短了研究人员的造模时间成本。从而提供了一种更为简洁高效的实验动物急性焦虑模型的造模方式，有利于焦虑障碍的研究和情绪障碍治疗药物的研发。
附图说明
[0028]为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0029]图1为一种实验动物急性焦虑模型的构建方法流程图；
[0030]图2为旷场实验测定外源注射PTHrp小鼠焦虑水平的柱形图。
具体实施方式
[0031]下面将结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明，应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0032]甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone
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related protein,PTHrp)是由多种组织细胞分泌的一种活性分子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种实验动物急性焦虑模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、稳定实验动物的情绪；S2、向实验动物的体内注射甲状旁腺激素相关蛋白；S3、等待所述实验动物产生焦虑情绪，从而获取所述实验动物急性焦虑模型。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在所述步骤S2中所述注射的步骤为在所述实验动物的尾静脉注射所述甲状旁腺激素相关蛋白。3.根据权利要求1
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2中任一项所述的构建方法，其特征在于，所述实验动物为小鼠，所述甲状旁腺激素相关蛋白的注射剂量为1ng/只。4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述步骤S1中稳定所述实验动物的情绪的方法为抚触适应，在特定的时间范围内，每天在固定时间段内对小鼠进行抚触。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的构建方法，其特征在于，在所述步...

【专利技术属性】
技术研发人员：隽诗芮，屠洁，洪育川，周辛夷，肖倩，徐锡荣，宣守民，刘丹，张志刚，胡豪豪，
申请(专利权)人：中国科学院深圳理工大学筹，
类型：发明
国别省市：