草酸青霉菌株、生防剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种草酸青霉菌株、生防剂及应用。从土壤中分离筛选得到一株真菌，结合形态学特征及分子鉴定将该菌株鉴定为草酸青霉，并命名为草酸青霉(Penicillium oxalicum)PO14，保藏号为CGMCC No.22461。所述草酸青霉PO14对藤仓镰刀菌孢子萌发和菌丝生长均有较强的抑制作用，可用于水稻恶苗病的防治。草酸青霉PO14菌株可用于生防剂或生物农药的开发，在水稻恶苗病生物防冶上有较好的应用前景。在水稻恶苗病生物防冶上有较好的应用前景。在水稻恶苗病生物防冶上有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
草酸青霉菌株、生防剂及其应用


[0001]本专利技术涉及植物病害生物防治
，特别是涉及草酸青霉菌株、生防剂及其应用。

技术介绍

[0002]水稻是世界三大粮食作物之一，其种植面积广泛，产量丰富。据统计，全世界有一半的人口食用稻，主要在亚洲、欧洲南部和热带美洲及非洲部分地区。因此，保障水稻的产量和质量，对我国的粮食生产与国民经济都具有重大意义。
[0003]水稻在生产过程中受到许多真菌病害的危害，特别是水稻恶苗病，该病害自1898年在日本首次报道以来，几乎在世界所有水稻种植区均有发生，并造成严重的产量损失。此外，水稻恶苗病病原菌藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi)还会产生伏马菌素等水溶性代谢产物，该类毒素会污染粮食及其制品，并能引起人畜中毒，严重危害粮食安全以及人畜的生命健康。
[0004]由于藤仓镰刀菌能产生多种赤霉素，很难培育出高水平的抗病品种，因此，水稻恶苗病的防治仍以化学药剂种子处理为主。在中国，目前有152个药剂产品(包括单剂和复配剂)登记用于水稻恶苗病防治，常用药剂产品有效成分包括多菌灵，咪鲜胺，氰烯菌酯，戊唑醇等。但由于化学杀菌剂的长期使用，水稻恶苗病菌对多菌灵和咪鲜胺均已产生明显抗性，对氰烯菌酯的抗性也在迅速扩展，抗药性问题日益严峻。这使得水稻恶苗病病害难以控制，并且还造成环境污染等问题。因此，植物病害防治的重点应由化学防治逐步转向绿色安全的生物防治上。
[0005]生物防治具有持效期长、低污染、低残留、不易产生抗药性、利于人畜安全和环境保护等优点。利用生防菌株及其代谢物防治水稻恶苗病病害有助于保障水稻的安全，减少生态污染问题，具有经济和生态双重效益。目前，水稻恶苗病病害的生防研究主要集中在放线菌(Actinomycetesspp.)芽孢杆菌(Bacillus spp.)、假单胞菌(Pseudomonas spp.)和木霉菌(Trichoderma spp.)等微生物。

技术实现思路

[0006]本专利技术旨在解决水稻恶苗病防治困难的问题，提供了一株草酸青霉菌株、该菌株制备的生防剂及应用。所述草酸青霉PO14对藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi)孢子萌发和菌丝生长均有较强的抑制作用，可用于水稻恶苗病的防治。草酸青霉PO14可为生防剂或生物农药开发提供优良的菌株，在水稻恶苗病生物防冶上有较好的应用前景。
[0007]本专利技术提供的草酸青霉菌株，分离于安徽省淮溪县五铺农场的田间土壤，分类命名为草酸青霉(Penicillium oxalicum)PO14，保藏时间为2021年6月21日，保藏地点为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.22461。
[0008]所述草酸青霉菌株对藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi)菌丝生长和孢子萌发均有较强的抑制作用，在拮抗藤仓镰刀菌中具有良好的应用。
[0009]此外，所述草酸青霉菌株能够抑制核盘菌、灰霉菌、禾谷丝核菌、尖孢镰刀菌、坎诺单孢菌、假禾谷镰刀菌和禾顶囊壳菌菌丝生长，具有良好的拮抗效果。
[0010]基于所述草酸青霉菌株对藤仓镰刀菌良好的拮抗效果，所述草酸青霉菌株在防治水稻恶苗病中具有良好的应用前景。
[0011]本专利技术还提供了所述草酸青霉菌株在制备防治水稻恶苗病的生防产品中的应用。
[0012]可选的，所述生防产品为生防剂或生物农药。
[0013]例如本专利技术提供的一种生防剂，包含所述草酸青霉菌株的孢子悬浮液。
[0014]可选的，所述孢子悬浮液的制备方法为：
[0015]将活化的草酸青霉菌株接种至PDA固体培养基中培养5～7天，使用无菌水冲洗，得到所述孢子悬浮液。
[0016]所述生防剂可应用于防治由藤仓镰刀菌引起的水稻恶苗病。
[0017]例如本专利技术提供的一种防治水稻恶苗病的方法，包括：
[0018]将水稻种子浸泡于所述生防剂；
[0019]或在水稻苗期，将所述生防剂喷施于水稻苗的茎基部。
[0020]可选的，所述生防剂的浓度为1
×
106～1
×
107cfu/mL。
[0021]可选的，所述水稻种子的浸泡时间为3～5h。
[0022]与现有技术相比，本专利技术至少具有以下有益效果之一：
[0023](1)本专利技术提供的草酸青霉PO14对藤仓镰刀菌具有显著的抑制效果，在平板对峙试验中，能有效抑制禾谷镰刀菌菌丝的生长；其孢子悬液能有效抑制藤仓镰刀菌孢子的萌发。
[0024](2)本专利技术提供的草酸青霉PO14在盆栽试验条件下能显著抑制有藤仓镰刀菌引起的徒长，可用其开发出生防产品，应用于对水稻恶苗病的生物防治。
附图说明
[0025]图1为菌株4C17的菌落形态；
[0026]图2为草酸青霉PO14的系统发育树；
[0027]图3为草酸青霉PO14与藤仓镰刀菌的平板对峙试验的结果，A：藤仓镰刀菌，B：B1为藤仓镰刀菌，B2为草酸青霉；
[0028]图4为草酸青霉PO14孢子悬液对藤仓镰刀菌孢子萌发的影响结果，A：藤仓镰刀菌孢子，B为藤仓镰刀菌和草酸青霉孢子混合液；
[0029]图5A为草酸青霉PO14对水稻恶苗病的防治效果图，A：清水对照组，B：草酸青霉PO14处理组，C：藤仓镰刀菌对照组，D：咯菌腈处理组；
[0030]图5B为草酸青霉PO14对水稻株高的影响图，A：清水对照组，B：草酸青霉PO14处理组，C：藤仓镰刀菌对照组，D：咯菌腈处理组；
[0031]图6为草酸青霉PO14与其他七种病原菌的平板对峙试验结果，A：六种病原菌，其中A1为核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)，A2为灰霉菌(Botrytis cinerea)，A3为禾谷丝核菌(Rhizoctonia zeae)，A4为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，A5为坎诺单孢菌(Monosporascus cannonballu)，A6为假禾谷镰刀菌(Fusarium pseudograminearum)，A7为禾顶囊壳菌(Gaeumannomyces graminis)；B：草酸青霉PO14与七种病原菌的对峙。
具体实施方式
[0032]下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案做进一步的说明，但本专利技术不仅限于此。
[0033]以下实施例涉及的培养基和试剂组分包括：
[0034]马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉12g，去离子水定容至1L，121℃灭菌20min，自然pH。
[0035]0.7mol/L NaCl溶液：NaCl 40.9g，去离子水定容至1L，121℃灭菌20min，自然pH。
[0036]CMC培养液：CMC
‑
Na 15.0g，酵母膏1g，NH4NO
3 1g，KH2PO
4 1g，MgSO4·
7H2O 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.草酸青霉菌株，其特征在于，分类命名为草酸青霉(Penicillium oxalicum)PO14，保藏号为CGMCC No.22461。2.根据权利要求1所述的草酸青霉菌株在拮抗藤仓镰刀菌、核盘菌、灰霉菌、禾谷丝核菌、尖孢镰刀菌、坎诺单孢菌、假禾谷镰刀菌和禾顶囊壳菌中的应用。3.根据权利要求1所述的草酸青霉菌株在防治水稻恶苗病中的应用。4.根据权利要求1所述的草酸青霉菌株在制备防治水稻恶苗病的生防产品中的应用。5.一种生防剂，其特征在于，包含如权利要求1所述草酸青霉菌株的孢子悬浮液。6.根据权利要求5所述的生防剂，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹燕妮，陈云，马忠华，商庆华，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：