番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用，应用的方法为：使番茄SlCab12基因在植株中进行过表达，增强植株对番茄褪绿病毒抗病性，番茄SlCab12基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术将番茄SlCab12基因可作为目的基因导入番茄植株中，通过改变番茄SlCab12基因在番茄植株中的过表达、增加了番茄光合作用能力，提高了其对番茄褪绿病毒的抗病性，极大降低了番茄褪绿病毒带来的危害，该应用方法安全、可靠，在番茄选育新品种研究等方面具有很好的应用前景。育新品种研究等方面具有很好的应用前景。育新品种研究等方面具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用


[0001]本专利技术涉及植物保护
，尤其涉及一种番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用。

技术介绍

[0002]番茄是我国重要的农业经济作物之一，因其口感较好和营养价值高深受人们喜爱，随着番茄产业的不断发展，不同地区番茄品种的流通以及媒介昆虫的爆发，为病害的发生提供了机会。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)属于长线形病毒科(Closteroviridae)，毛形病毒属(Crinivirus)，是一种主要由烟粉虱以半持久方式传播的病毒，侵染番茄时会导致植株叶片脉间黄化褪绿，叶片卷曲，严重时脉间完全褪绿黄化，叶片变脆变厚，果实完全失去商业价值。该病毒潜伏期长，发病率高，严重危害番茄的生长，可造成50％以上的减产，并且近年来该病毒的覆盖范围还在逐渐扩大。
[0003]光合作用是维持植物生长发育重要的途径，由SlCab12编码的LHCA4是植物光系统I中一种主要且高度保守的叶绿素a/b结合蛋白，可以与一些色素分子相结合对光能实施捕获，这在光合作用过程的进行中有着至关重要的作用。
[0004]目前对于番茄褪绿病毒等病害的防治，只能通过较为简单的黄板和喷施化学药剂的方式进行来杀虫治疗，这种方式治疗效率低、农药残留危害大，并且在一定程度上会造成番茄的减产。因此选育和种植抗病品种是最经济、有效、环保的防治方法，具有更大应用前景。

技术实现思路

[0005]本专利技术针对上述需要解决的技术问题，提供了一种番茄SlCab12基因过表达能够增强番茄对番茄褪绿病毒抗病性的应用，能够用于培育具有抗番茄褪绿病毒能力的番茄新品种。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用，所述应用的方法为：使番茄SlCab12基因在植株中进行过表达，增强植株对番茄褪绿病毒抗病性，所述番茄SlCab12基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0007]上述的应用，进一步的，所述应用的方法为：
[0008]S1、构建含番茄SlCab12基因的过表达载体；
[0009]S2、将所述含番茄SlCab12基因的过表达载体转入农杆菌感受态细胞中，获得含番茄SlCab12基因过表达载体的农杆菌工程菌；
[0010]S3、将所述农杆菌工程菌转入到番茄植物体内，得到含有番茄SlCab12基因过表达载体的转基因番茄植株。
[0011]上述的应用，进一步的，所述S1具体包括以下步骤：
[0012]S1
‑
1、根据番茄SlCab12基因设计引物对，进行PCR扩增获得番茄SlCab12基因片段；
[0013]S1
‑
2、酶切所述番茄SlCab12基因片段和载体；
[0014]S1
‑
3、将酶切后的所述番茄SlCab12基因片段与载体连接获得含番茄SlCab12基因的过表达载体。
[0015]上述的应用，进一步的，所述引物对的DNA序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。
[0016]上述的应用，进一步的，所述载体为pCAMBIA1300
‑
GFP。
[0017]与现有技术相比，本专利技术的优点在于：
[0018]本专利技术提供了一种番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用，通过构建番茄SlCab12基因过表达载体在番茄植株中过表达，测定感染番茄褪绿病毒前后的对照番茄以及过表达番茄的叶绿素含量、可溶性糖含量和病毒基因表达水平，发现过表达番茄叶绿素含量要高于对照番茄，同时反应光合能力强弱的可溶性糖含量过表达番茄同样高于对照，并且番茄褪绿病毒侵染以后，过表达番茄植株病毒含量要低于对照植株。由此证实了过表达番茄SlCab12基因可增强番茄对番茄褪绿病毒的抗病性。因此，本专利技术提供的番茄SlCab12基因可作为目的基因导入番茄植株中，通过改变番茄SlCab12基因在番茄植株中的过表达、增加了番茄光合作用能力，提高了其对番茄褪绿病毒的抗病性，极大降低了番茄褪绿病毒带来的危害，该应用方法安全、可靠，在番茄选育新品种研究等方面具有很好的应用前景。
附图说明
[0019]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述。
[0020]图1为本专利技术实施例2中番茄SlCab12基因表达载体图。
[0021]图2为本专利技术实验一中感染番茄褪绿病毒前后番茄SlCab12基因过表达株系与野生型对MicroTom的叶绿素含量对比图。
[0022]图3为本专利技术实验二中感染番茄褪绿病毒前后番茄SlCab12基因过表达株系与野生型对MicroTom的可溶性糖含量对比图。
[0023]图4为本专利技术实验三中感染番茄褪绿病毒前后番茄SlCab12基因过表达株系与野生型对MicroTom的病毒相对含量对比图。
具体实施方式
[0024]以下结合具体优选的实施例对本专利技术作进一步描述，但并不因此而限制本专利技术的保护范围。
[0025]除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本专利技术的保护范围。
[0026]除非另有特别说明，本专利技术中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0027]实施例
[0028]以下实施例中所采用的材料和仪器均为市售。
[0029]实施例1：
[0030]一种SlCab12基因，其DNA序列如SEQ ID NO:1所示，具体为：ATGGCCACTGTAACAACGCAAGCCTCCGCCGCGGTCTTCCCTCCATCCGCCACTAAGACAAGGTTCCTCAACGGATCATCCGGTAAACTAAACAGAGATTTCTCTTTTAAATCATCAACGTTGTCTTACAATTCATTCAAAGTTGAAGCAAAAAAAGGTGAATGGCTTCCAGGCTTAACCTCTCCTACTTACCTTAATGGAAGTCTTGCGGGTGACAATGGTTTTGATCCATTGGGACTCGCGGAGGATCCGGAGAACTTGAGATGGTTTGTTCAGGCTGAGCTAGTGAACGGTCGATGGGCTATGTTGGGTGTTGCAGGGATGTTACTACCTGAGGTTTTCACTAGCATTGGCCTTCTTAACGTACCAAAATGGTACGATGCTGGAAAATCAGACTACTTTGCATCATCGTCAACATTATTTGTGATCGAGTTCATCTTGTTTCACTACGTTGAAATTCGACGTTGGCAAGA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种番茄SlCab12基因在增强对番茄褪绿病毒抗病性中的应用，其特征在于，所述应用的方法为：使番茄SlCab12基因在植株中进行过表达，增强植株对番茄褪绿病毒抗病性，所述番茄SlCab12基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用的方法为：S1、构建含番茄SlCab12基因的过表达载体；S2、将所述含番茄SlCab12基因的过表达载体转入农杆菌感受态细胞中，获得含番茄SlCab12基因过表达载体的农杆菌工程菌；S3、将所述农杆菌工程菌转入到番茄植物体内，得到含有番茄SlCab12基因过表达载体的转基因番茄植株。3.根据权利要求2所述的应用，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：史晓斌，乐昊，刘勇，张德咏，张战泓，张卓，彭静，高阳，张松柏，陈建斌，
申请(专利权)人：湖南省植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：