菊花转录因子CmMYB基因在矮化植株或缩短根长中的应用制造技术

本申请公开了一种菊花转录因子CmMYB蛋白或其编码基因在矮化萱草植株或缩短萱草植株根长中的应用以及一种矮化萱草植株或缩短萱草植株根长的方法，属于生物技术领域。本发明专利技术研究证明，CmMYB的转基因萱草与WT萱草相比，植株矮化且根系变短。本发明专利技术为矮化植株或根系缩短植株的培育提供了一种新途径，对探究CmMYB的功能，揭示植株矮化或根系缩短性状形成机理具有重要意义，并为萱草植株的分子育种提供了重要的参考依据。重要的参考依据。重要的参考依据。

【技术实现步骤摘要】
菊花转录因子CmMYB基因在矮化植株或缩短根长中的应用


[0001]本申请公开了一种菊花转录因子CmMYB蛋白或其编码基因在矮化萱草植株或缩短萱草植株根长中的应用以及一种矮化萱草植株或缩短萱草植株根长的方法，属于生物


技术介绍

[0002]萱草因花型独特，花色繁多且易于栽培繁殖，既可以用于布置各式花坛、道路隔离带、疏林草坡，亦是很好的地被植物，具有很好的园林应用效果。目前，国内对萱草的研究主要集中在杂交及倍性育种、孢粉学、引种栽培和品种筛选评价等方面，国外对萱草的研究主要集中在衰老基因、抗病基因、倍性育种和遗传特性等方面，然而关于萱草株高及株型的研究却很少，而萱草的株高会对萱草的例如抗倒伏效果产生影响，并且在萱草根系的长度也会对移植过程产生影响，例如根系缩短移植时则不易对根系造成大量破坏，使得移植成功率更高，因此作为景观植物的萱草，其株高和根系长度也是进行品种选育时需要着重考虑的因素。
[0003]MYB转录因子在植物中广泛存在，参与了植物生长发育过程中的多种活动，包括细胞形态建成和分化、植物激素合成、抗病反应以及细胞周期调控和细胞程序化死亡等，MYB转录因子在木质部合成和分化过程中也起到非常重要的调控作用。目前，对于MYB基因的功能研究尚不深入，尚未有研究表明菊花转录因子CmMYB与萱草的植株矮化或根系缩短相关。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供菊花转录因子CmMYB蛋白或其编码基因在矮化萱草植株或缩短萱草植株根长中的应用，本专利技术为矮化植株或根系缩短植株的培育提供了一种新途径，对探究CmMYB的功能，揭示植株矮化或根系缩短性状形成机理具有重要意义，并为萱草植株的分子育种提供了重要的参考依据。
[0005]一方面，本专利技术提供了菊花转录因子CmMYB蛋白或其编码基因在矮化萱草植株或缩短萱草植株根长中的应用。
[0006]优选的，所述菊花转录因子CmMYB蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
[0007]优选的，所述菊花转录因子CmMYB蛋白的编码基因如SEQ ID No.1所示。
[0008]另一方面，本专利技术还提供了一种矮化萱草植株或缩短萱草植株根长的方法，包括提高目的植物中菊花转录因子CmMYB蛋白表达水平或mRNA转录水平的步骤。
[0009]优选的，所述方法包括向萱草中导入所述菊花转录因子CmMYB蛋白的步骤。
[0010]优选的，导入所述菊花转录因子CmMYB蛋白通过导入菊花转录因子CmMYB蛋白的编码基因来实现。
[0011]优选的，所述导入通过含有重组载体的根癌农杆菌进行，所述重组载体上含有所述菊花转录因子CmMYB蛋白的编码基因。
[0012]优选的，采用冻融法将所述重组载体转化所述根癌农杆菌。
[0013]优选的，所述重组载体为在植物表达载体PBI121
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GFP的多克隆位点处插入所述菊花转录因子CmMYB蛋白的编码基因。
[0014]优选的，所述根癌农杆菌为根癌农杆菌GV3101。
[0015]本申请的有益效果包括但不限于：
[0016]1.本申请公开了一种菊花转录因子CmMYB基因在矮化萱草植株或缩短萱草根长中的应用，不仅为萱草植物的品种选育和改良有着重要的意义，而且对于揭示植株矮化以及根系缩短性状的形成机理具有重要意义，并且对于探究CmMYB的功能具有重要的意义。
[0017]2.本申请公开了一种矮化萱草植株或缩短萱草植株根长的方法，具体的通过将菊花转录因子CmMYB蛋白的编码基因导入萱草，使得萱草的形状改变，具体的植株矮化、根长缩短，萱草作为一种园艺植物，矮化植株形状更加抗倒伏、易移植，根长缩短也使得萱草在移植过程中，其根系更不易受到损伤，使得移植成活率更高。
附图说明
[0018]此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
[0019]图1为CmMYB转录因子扩增产物凝胶电泳图，其中M：Marker DL2000；1
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4：基因PCR产物；
[0020]图2为转基因萱草阳性植株扩增产物凝胶电泳图，其中M：Marker DL2000；1
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15：阳性材料PCR产物；
[0021]图3为转基因萱草阳性植株荧光检测图，其中A
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C为CmMYB转化材料在自然光下图；F
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H为CmMYB转化材料在荧光下图；D为pBI121
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GFP空载转化材料在自然光下图；I为pBI121
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GFP空载转化材料在荧光下图；E为野生型在自然光下图；J为野生型在荧光下图；
[0022]图4为CmMYB转基因萱草与野生型萱草植株的根长与株高表型图，WT表示野生型植株，Line1，3分别表示转基因萱草的不同株系；
[0023]图5为CmMYB转基因萱草与野生型萱草植株整体株型图，其中WT表示野生型植株，CmMYB表示转基因萱草。
具体实施方式
[0024]下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例。
[0025]如无特别说明，本申请的实施例中的原料和试剂均通过商业途径购买。
[0026]菊花CmMYB基因的克隆
[0027]1、总RNA的提取及质量检测
[0028]提取总RNA(核糖核酸ribonucleic acid)前，将提取过程中用到的所有容器做无RNase(核糖核酸酶ribonuclease)处理，以除基因组DNA的干扰。将离心管等塑料器皿、研钵、研杵等研磨工具和镊子在0.1％(质量分数)DEPC(diethyl pyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)水中浸泡过夜，将水沥干后用报纸包好，高温高压灭菌；所有试剂的配置均用无RNase水，之后采用TRIZOL法提取总RNA，具体包括以下步骤：
[0029]1)取50～100μg菊花叶片(在
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80℃下保存的)加入液氮充分冷却过的研钵中，研磨至粉末状并转入预冷过的1.5mL离心管中，加入1mL TRIZOL，震荡混匀静置5min；
[0030]2)200μL的氯仿加入上述离心管，混匀静置5min，并提前准备冷冻离心机；
[0031]3)12000rpm，4℃离心10min，可见离心管底有沉淀，转上述上层水相约400μL于另一离心管，加入等体积的异丙酮，混匀放置10min，12000rpm，4℃离心10min；
[0032]4)汲取掉上层清液用75％(体积分数)乙醇漂洗2次，混匀静置5min，12000rpm，4℃离心1min，弃上清，置超净台干燥10min；
[0033]5)加入经过DEPC处理的水至30μL，混匀；
[0034]6)所得总RNA用琼脂糖凝胶电泳检测，琼脂糖凝胶电泳采用0.5
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TBE电泳缓冲液和1.5％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.菊花转录因子CmMYB蛋白或其编码基因在矮化萱草植株或缩短萱草植株根长中的应用。2.根据权利要求1中所述的应用，其特征在于：所述菊花转录因子CmMYB蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。3.根据权利要求2中所述的应用，其特征在于：所述菊花转录因子CmMYB蛋白的编码基因如SEQ ID No.1所示。4.一种矮化萱草植株或缩短萱草植株根长的方法，其特征在于：其包括提高目的植物中菊花转录因子CmMYB蛋白表达水平或mRNA转录水平的步骤。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述方法包括向萱草中导入所述菊花转录因子CmMYB蛋白的步骤。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘会君，程曼，马志，岳远志，
申请(专利权)人：山东和正生态农业开发有限公司，
类型：发明
国别省市：