一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备制造技术

本发明专利技术公开了一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备，涉及固定化酶的技术领域。该固定化酶载体以壳聚糖和海藻酸钠为原料，利用碱性溶液冷冻条件下的溶解及氢键重排的方法，制备出力学性质优良且耐高温的壳聚糖复合水凝胶，进一步采用化学交联法制备固定化耐高温酶。基于此，本研究建立的固定化酶制备方法，有助于解决工业酶高温情况下易失活，且难以连续使用的问题。的问题。的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备


[0001]本专利技术涉及固定化酶的
，具体涉及一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备。

技术介绍

[0002]酶的固定化是指利用物理吸附或者化学结合法将酶固定在载体上或者束缚在一定的空间内，通过连续使用或者反复使用来提高酶的利用率的一种技术。常用的固定化方法有包埋法、吸附法、共价结合法和交联法。固定化酶和游离酶相比，具有热稳定性高、成本低、易控制、对变性剂耐受性强等优点，可重复或连续使用，且易于与产品分离，是食品、医药、化工等领域的研究热点之一。
[0003]然而，目前的固定化酶材料大多适用于常温下的固定化反应，对于70℃以上的高温反应很难再保持高的酶活，或者在反应中就开始解离，直至失活。比如树脂、海藻酸钠等，虽然他们在常温下催化的生物相容性和稳定性很好，但是往往不耐高温、机械强度一般，不能直接用来固定耐高温的酶。而一些机械强度高的载体，如纳米铁或者玻璃等，它们的生物相容性不高，而且操作稳定性低。中国专利CN105695442A公开了一种用于酶固定化的改性磁性壳聚糖微球，该专利使用乳液聚合法制备固本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备方法，其特征在于，其步骤包括：S1、将FeCl3和FeSO4·
7H2O溶解在水中，再用碱溶液调节反应液体系pH，加热搅拌，过滤，洗涤滤渣，干燥滤渣，得到Fe3O4磁性纳米颗粒；S2、将海藻酸钠加入水中，溶胀后，加热搅拌至澄清透明，得到海藻酸钠溶液；S3、向上述海藻酸钠溶液中加入碱和壳聚糖，搅拌均匀，制得凝胶，冷冻，取出，解冻，向解冻的凝胶中加入Fe3O4磁性纳米粒子，搅拌至均匀，得到混合液；S4、将上述混合液滴入到金属盐溶液中，固化，制得磁性壳聚糖凝胶珠，回收磁性壳聚糖凝胶珠，洗涤，并将凝胶珠保存在水中；S5、称取保存在水中的凝胶珠加入到的EGDE溶液中，反应，得到壳聚糖复合珠，取出壳聚糖复合珠后除去残存的EGDE；S6、用磷酸缓冲液溶液稀释淀粉酶溶液，将步骤S5中清洗过的壳聚糖复合珠加入到稀释过后的淀粉酶溶液，反应，之后取出壳聚糖复合珠，用磷酸缓冲液溶液洗涤，制得耐热的磁性壳聚糖固定化酶。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中的Fe
3+
和Fe
2+
摩尔比为2：1；步骤S1中所述的加热搅拌条件为加热温度为70℃，搅拌时间为30min；步骤S1中调节反应体系pH的碱溶液为氨水溶液；pH最终调节为9。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中海藻酸钠和水的质量比为(0.03～0.06)：8.4。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S...

【专利技术属性】
技术研发人员：李由然，石贵阳，聂铭甫，张梁，丁重阳，徐沙，顾正华，陈磊，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：