用于土拉弗朗西斯菌的CRISPR-Cas12a检测引物组及其应用制造技术

本发明专利技术公开了用于土拉弗朗西斯菌的CRISPR

【技术实现步骤摘要】
用于土拉弗朗西斯菌的CRISPR
‑
Cas12a检测引物组及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及用于土拉弗朗西斯菌的CRISPR
‑
Cas12a检测引物组及其应用，更加具体的涉及用于土拉弗朗西斯菌的CRISPR
‑
Cas12a检测引物、crRNA及其用途。

技术介绍

[0002]土拉热也称土拉菌病，是由土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)引起的一种人兽共患热性传染疾病，因其最初在野生啮齿动物尤其是野兔中流行，所以也被称为兔热病。土拉弗朗西斯菌属于弗朗西斯菌属，其由四个亚种组成，其中A型和B型是引起人类疾病的主要亚种，A型亚种菌株主要分布于加拿大和美国，其毒力最强，B型菌株几乎遍布于包括欧洲在内的整个北半球，据流行病调查显示，我国目前土拉菌病例均为B型亚种。土拉菌病以体温升高、淋巴结肿大、脾和其他内脏点状坏死变化为特征。临床表现大多起病急，体温升高迅速，伴有头痛、乏力、食欲减退、肌肉疼痛和盗汗，继而病情发展，出现谵妄、昏睡、烦躁不安等急性全身中毒症本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测土拉弗朗西斯菌的CRISPR
‑
Cas12a系统，包括Cas12a蛋白和crRNA，或二者形成的复合体；所述crRNA包括用于与Cas12a蛋白结合的锚定序列和靶向土拉弗朗西斯菌靶点序列的向导序列；所述土拉弗朗西斯菌的靶点序列来自土拉弗朗西斯菌的SEQ ID No.1所示的ACX55_1601基因上。2.根据权利要求1所述的CRISPR
‑
Cas12a系统，其特征在于：所述土拉弗朗西斯菌的靶点序列为SEQ ID No.18第22
‑
43位所示RNA片段的编码DNA。3.根据权利要求1或2所述的CRISPR
‑
Cas12a系统，其特征在于：所述crRNA的序列为SEQ ID No.18；或，所述Cas12a蛋白为LbCas12a蛋白。4.一种用于检测土拉弗朗西斯菌的试剂盒，其包括如下：1)权利要求1
‑
3任一所述的用于检测土拉弗朗西斯菌土拉弗朗西斯菌的CRISPR
‑
Cas12a系统；2)用于特异性扩增权利要求1
‑
3任一中的所述土拉弗朗西斯菌土拉弗朗西斯菌靶点序列的RAA扩增引物；3)作为荧光报告分子的探针；所述探针的两端分别标记荧光基团和淬灭基团。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述RAA扩增引物由SEQ ID No.4所示的单链DNA分子和SEQ ID No.9所示的单链DNA分子组成；所述探针的核苷酸序列为SEQ ID No.24。6.如下任一物质：A1)权利要求1
‑
3任一中所述的crRNA；A2)权利要求1
‑
3任一中所述的Cas12a蛋白和crRNA，或者二者形成的复合体；A3)权利要求4或5中所述的RAA扩增引物；A4)权利要求4或5中所述的探针。7.如下任一应用：B1)权利要求1
‑
3任一所述的系统或权利要求4或5所述的试剂盒或权利要求6所述的物质在检测或辅助检测土拉弗朗西斯菌土拉弗朗西斯菌或其核酸中的应用；B2)权利要求1
‑
3任一所述的系统或权利要求4或5所述的试剂盒或权利要求6所述的物质在制备检测或辅助检测土拉弗朗西斯菌土拉弗朗西斯菌或其核酸的产品中的应用；B3)权利要求1
‑
3任一所述的系统或权利要求4或5所述的试剂盒或权利要求6所述的物质在检测或辅助检测待测样本中是否含有土拉弗朗西斯菌土拉弗朗西斯菌或其核酸中的应用；B4)权利要求1
‑
3任一所述的系统或权利要求4或5所述的试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐永，李越希，陆年宏，毛颖清，吕瑞辰，王俊虎，谭伟龙，曹勇平，朱长强，艾乐乐，杨超越，王翰丞，
申请(专利权)人：苏州澳利康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：