一种辅助鉴别白杨派植物方法及使用试剂盒技术

本发明专利技术涉及林木分子辅助育种技术领域，尤其为一种杨属间不同派系关系辅助鉴定方法及可使用的鉴定试剂盒，可对不同杨属派系种间与进化过程中相对保守性基因EXPA1的克隆，比对分析派系间的序列变异规律，并通过派系间的序列特征分析，筛选得到白杨派特异分子标记，以及用于区分杨属五大派系间的特异引物对PtA2F/PtA2R，研发出能够鉴别白杨派杨树的方法及鉴定试剂盒，利用试剂盒及鉴别方法，能鉴定白杨派杨树树种(特异扩增条带为368bp)，能用于杨属间派系的鉴定、亲缘关系分析及进化路程分析等，并为杨树的分子标记辅助育种和品种遗传改良工作提供理论基础和技术支持，有效鉴定五莲杨属于白杨派的分类地位，具有高灵敏性、特异性以及直观、简洁、准确等优点。准确等优点。准确等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种辅助鉴别白杨派植物方法及使用试剂盒


[0001]本专利技术涉及林木分子辅助育种
，具体为一种辅助鉴别白杨派植物方法及使用试剂盒。

技术介绍

[0002]杨树指杨柳科(Salicaceae)杨树(Populus L.)的所有树种的统称，是以无性繁殖为主、雌雄异株的落叶乔木。尹春英(2004)和栾鹖慧(2011)介绍到杨树适应范围广泛，遍及北美洲、亚洲、欧洲，有较强的适应性和抗逆性。杨树种类繁多，目前世界约有品种超过100种，我国杨树资源丰富，国内约有60种，且特有种多，西北、西南、华北及东北地区均有分布。
[0003]王战等(1984)根据形态特性、生物学属性及地理空间所处位置的不同，将杨属分为五大派：黑杨派(Sect.Aigeiros Duby)、白杨派(Sect.Lence Duby)、胡杨派(Sect.Turanga Bge)、青杨派(Sect.Tacamahaca Spach)和大叶杨派(Sect.Leucoides Spach)。白杨派的代表种之一银白杨(P.alba L.)是白杨派树种中最古老的种，遍布于亚洲、欧洲和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
Premix Taq即为Ex Taq Version 2.0plus dye，0.4μl DNA模板，无菌水补至15μl。9.根据权利要求7所述的一种辅助鉴别白杨派植物方法的试剂盒，其特征在于：所述的PCR扩增程序为：94℃预变性5min，98℃变性10sec，58℃退火30sec，72℃延伸40～60sec，35个循环，然后72℃充分延伸7min。10.根据权利要求1所述的一种辅助鉴别白杨派植物方法，其特征在于：所述引物对1的片段大小为820bp～885bp，其中引物对1包括PtA1F和PtA1R，其中PtA1F的引物序列为5'
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CCCAACAACAACCTTTATGG
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3'，PtA1R的引物序列为5'
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CAACCAGAACAGCGTTTGAC
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3'；所述引物对2的片段大小为368bp，其中引物对1包括PtA2F和PtA2R，其中PtA2F的引物序列为5'
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GCAGCACTTTTTCTTAGTATT
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3'，PtA2R的引物序列为5'
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CTCATGCTCATCCAACCAGT
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3'；具体的序列5引物对PtA1F/PtA1R对基因EXPA1片段进行扩增的序列为白杨派
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Lumao50
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:CCCAACAACAGCCTTTATTGCCCCAAAACAATAGCTCTCTGAAGCCATGAAAATATACTCGAGAGGTTGGCAGAAGAACATCCACGATAACTGCCAAAAAAACCTATTTTTGGTGGGTCTTTATCGTTTTTGGCAACCAATTTTCTACCTTTGAATTCTTGTTGTGATCCAAAAATTTGTTTAACTGAAGTCACCAAACAGTTATGAACGGGCTGATGTAATTAAGTGACGTCGGTGGGTTAGTTGGACCTCAACAACTTTCTCTTGTGTCCTTCACTTATTTTAGCCACGGGACCGTTTATGGTCGCCTTCGGTGATTTGTTTTTAC...

【专利技术属性】
技术研发人员：王艳，徐吉臣，鲁仪增，仝伯强，赵云朝，李文清，孙涛，韩义，穆艳娟，孙延国，畅盼，王毅，张利，李庆伟，
申请(专利权)人：山东省林草种质资源中心山东省药乡林场，
类型：发明
国别省市：