溴代嗜氮酮类化合物在制备破骨细胞分化抑制剂上的应用制造技术

本发明专利技术提供溴代嗜氮酮类化合物在制备破骨细胞分化抑制剂上的应用，属于生物医药领域。公开一个溴代嗜氮酮类化合物，其结构式如式(Ⅰ)所示，将其命名为isochromophiloneG，其对LPS诱导的NF

【技术实现步骤摘要】
溴代嗜氮酮类化合物在制备破骨细胞分化抑制剂上的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及溴代嗜氮酮类化合物在制备破骨细胞分化抑制剂上的应用。

技术介绍

[0002]骨质疏松症是老龄化人群和绝经后女性中常见的溶骨性疾病。骨骼是一种高度动态的组织，会不断重塑，并通过破骨细胞骨吸收和成骨细胞骨形成过程达到平衡。破骨细胞(osteoclasts，OCs)由核因子
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κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear kappa B ligand，RANKL)的受体激活剂与其在单核细胞/巨噬细胞前体上的受体RANK结合而启动形成，是人体内唯一具有骨吸收功能的细胞。破骨细胞活性缺陷导致骨硬化和骨髓衰竭，过度激活可导致骨质疏松症、类风湿性关节炎、肿瘤骨转移等溶骨性疾病，抑制OCs的形成和再吸收功能是治疗骨质疏松症的重要策略之一。
[0003]目前临床上运用的破骨细胞分化相关抑制剂主要为地诺昔单抗和双膦酸盐类药物，但都具有一定的并发症和副作用。因此，研制安全有效的新型破骨细胞分化抑制剂具有重要价值。嗜氮酮类化合物(azaphilones或azaphilonoids)属于真菌源聚酮类次级代谢产物，化学结构上含异色满(isochromane)及其衍生物异喹啉基本骨架，通常具有卤素取代，溴代较为少见，近年来被报道具有抗肿瘤、抗炎、抗微生物及酶抑制等活性及作为色素添加剂。关于嗜氮酮类化合物抗破骨细胞分化活性的研究鲜见报道，故其抗破骨细胞分化潜力有待进一步挖掘。
专利
技术实现思路

[0004]本专利技术的第一个目的是，针对上述问题，提供一个溴代嗜氮酮类化合物。
[0005]为达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：
[0006]本专利技术的溴代嗜氮酮类化合物在制备破骨细胞分化抑制剂上的应用，所述溴代嗜氮酮类化合物的结构式如式(Ⅰ)所示，将其命名为isochromophilone G：
[0007][0008]进一步说明，所述的破骨细胞分化抑制剂为治疗破骨细胞过度活化造成的溶骨性疾病的药物。
[0009]本专利技术通过实验得到：溴代嗜氮酮类化合物对LPS诱导的NF
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κB荧光素酶具有显著抑制作用，半抑制浓度(IC
50
值)为28μM，可以作为研制NF
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κB核因子表达抑制剂的先导化合物。
[0010]本专利技术通过实验得到：溴代嗜氮酮类化合物能够抑制RANKL诱导的BMMs(Bone marrow macrophage cells，骨髓巨噬细胞)细胞分化成破骨细胞，且对BMMs细胞无明显细胞毒性，因此可望开发成为安全有效的新型破骨细胞分化抑制剂药物。
[0011]本专利技术还提供溴代嗜氮酮类化合物或其药用盐在制备NF
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κB核因子表达抑制剂或破骨细胞分化抑制剂药物中的应用。用于防治破骨细胞过度活化造成的骨质疏松、类风湿性关节炎、肿瘤转移骨破坏等溶骨性疾病。
[0012]本专利技术还提供一个NF
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κB核因子表达抑制剂或破骨细胞分化抑制剂药物，包括有效量的作为活性成份的溴代嗜氮酮类化合物或其药用盐，和药学上可以接受的载体或辅料。
[0013]进一步说明，所述的破骨细胞分化抑制剂为口服制剂、注射剂型或外用剂型。
[0014]本专利技术还提供一种用于制备如上所述的溴代嗜氮酮类化合物的间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4，其保藏编号为：GDMCC No.60671。
[0015]本专利技术还提供一种制备溴代嗜氮酮类化合物的方法，所述的溴代嗜氮酮类化合物是从间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4的发酵培养物中制备分离得到的。
[0016]在本专利技术中，进一步说明，所述的制备溴代嗜氮酮类化合物的方法，具体步骤如下：
[0017]a)、制备间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4的发酵培养物，用乙酸乙酯浸泡发酵产物，将发酵培养物切成小块，超声提取15min，经蒸馏浓缩后得到总提取物；
[0018]b)、将总提取物经中压正相液相色谱，用石油醚/二氯甲烷作为洗脱剂，从体积比(100：0)～(0：100)进行梯度洗脱，收集石油醚/二氯甲烷体积比70：30梯度洗脱下来的流份，继续过中压反相C18柱色谱，用甲醇/水作为洗脱剂，从体积比(10：90)～(100：0)进行梯度洗脱，收集甲醇/水体积比30：70梯度洗脱下来的流份，收集流份再经高效液相色谱纯化后得到溴代嗜氮酮类化合物。
[0019]在本专利技术中，进一步说明，所述的步骤a)的制备间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4的发酵培养物是将活化的间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4接入种子培养基中，25℃，180rpm，培养72h制得种子液，将种子液以5％的接种量接入到发酵培养基中，25℃，静态培养30天制得发酵培养物。
[0020]在本专利技术中，进一步说明，所述的种子培养基配方为每1L升培养基中含有：麦芽提取粉15g，溴化钠15g，余量为水，pH 7.5。
[0021]在本专利技术中，进一步说明，所述的发酵培养基的配方为每1L三角瓶培养基中含有：小麦150g，溴化钠2.7g，大豆蛋白胨1.8g，水180mL，pH 7.5。
[0022]由于采用上述技术方案，本专利技术具有以下有益效果：
[0023]本专利技术在对海南三亚红海榄(Rhizophora stylosa)共附生间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4的次生代谢产物的研究过程中，分离获得一个新颖少见的溴代嗜氮酮类化合物，其对LPS诱导的NF
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κB荧光素酶具显著抑制作用(IC
50
值为28μM)，能够抑制RANKL诱导的BMMs细胞分化成破骨细胞，因此是开发成为新型NF
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κB核因子表达抑制剂或破骨细胞分化抑制剂药物的理想候选化合物。
附图说明
[0024]图1是溴代嗜氮酮类化合物isochromophilone G的关键HMBC(单箭头)、COSY(加粗线)和NOESY(双箭头虚线)相关图；
[0025]图2是溴代嗜氮酮类化合物isochromophilone G的实测和计算ECD谱图；
[0026]图3是溴代嗜氮酮类化合物isochromophilone G(20μM)对在RAW264.7细胞经脂多糖(LPS)诱导的NF
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κB荧光素酶的抑制活性对比图，BAY 11
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7028是阳性对照，
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表示p<0.001vs.control group；***表示p<0.001vs.LPS group；
[0027]图4是溴代嗜氮酮类化合物isochromophilone G破骨前体BMMs细胞分化的TRAP染色结果示意图；
[0028]图5是溴代嗜氮酮类化合物isochromophilone G(简称icp本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.溴代嗜氮酮类化合物在制备破骨细胞分化抑制剂上的应用，所述溴代嗜氮酮类化合物的结构式如式(Ⅰ)所示，将其命名为isochromophilone G：2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的破骨细胞分化抑制剂为治疗破骨细胞过度活化造成的溶骨性疾病的药物。3.根据权利要求所述的应用，其特征在于：所述的破骨细胞分化抑制剂为治疗骨质疏松、类风湿性关节炎、肿瘤转移骨破坏的药物。4.根据权利要求1所述的溴代嗜氮酮类化合物或其药用盐在制备破骨细胞分化抑制剂或NF
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κB核因子表达抑制剂药物中的应用，其特征在于：所述的破骨细胞分化抑制剂为口服制剂、注射剂型或外用剂型。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述破骨细胞分化抑制剂或NF
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κB核因子表达抑制剂药物，包括有效量的溴代嗜氮酮类化合物或其药用盐，和医学或药学上可以接受的载体或辅料。6.一种用于制备权利要求1所述的溴代嗜氮酮类化合物的间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4，其保藏编号为：GDMCC No.60671。7.一种制备权利要求1所述的溴代嗜氮酮类化合物的方法，其特征在于，所述的溴代嗜氮酮类化合物是从间座壳菌(Diaporthe sp.)BGS4的发酵培养物中制备分离得到的。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述制备溴...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗小卫，林妙萍，谭艳辉，张艳婷，高程海，刘永宏，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：