一种糖基转移酶突变体及其编码基因制造技术

本发明专利技术公开了一种糖基转移酶突变体及其编码基因，Reb D甜度高、无苦味和甘草余味，是非常优质的代糖选择，Reb D的生产成本高是限制其作为甜味剂推广的主要原因。本发明专利技术设计的三种植物来源突变的糖基转移酶，可以野生型3倍左右的量在微生物中高量表达。同时表达得到的突变体的热稳定性也明显优于野生型。因此，本发明专利技术公开的三种糖基转移酶的突变体参与的Red A催化生成Red D的酶催化反应体系可以在较高温度下进行，这样可以明显提高该反应体系的催化效率，提高Red D的生产效率。D的生产效率。D的生产效率。

【技术实现步骤摘要】
一种糖基转移酶突变体及其编码基因


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，更具体的是涉及一种糖基转移酶突变体及其编码基因。

技术介绍

[0002]甜菊糖，又名甜菊糖苷，具有高甜度(蔗糖的300～450倍)、低热值(蔗糖的1/300)等特点，天然蔗糖替代品，被誉为“世界第三糖原”。甜菊糖从甜叶菊中萃取得到，生产商们在甜叶菊中提取出的甜菊糖中大都是甜菊苷(Stevioside,STV)和莱鲍迪苷A（Rebaudioside A，Reb A）。但是STV和Reb A具有苦味和甘草余味，这大大限制了甜菊糖苷作为甜味剂在食品中的应用。
[0003]研究发现莱鲍迪苷D（Rebaudioside D，Reb D）保持了甜菊糖高甜度和低热值的优点的同时，还不具有苦味和甘草余味，是非常优质的代糖选择。然而Reb D的规模生产存在较大的瓶颈：Reb D在甜叶菊中占比不到1％，通过植物提取生产Reb D的成本高昂。糖基转移酶基本为植物来源，其在微生物中的表达量较少，这导致目前通过微生物发酵法或者酶催化法生产Reb D的成本也处于较高水平。因此，如何提高植物来本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种糖基转移酶突变体，其特征在于，如SEQ ID NO.1所示的野生型糖基转移酶进行如下突变：L5I
‑
L34H
‑
R41P
‑
I48K
‑
A56S
‑
I62V
‑
N87M
‑
P88N
‑
H91K
‑
P99S
‑
R103K
‑
N127S
‑
E128S
‑
Q129H
‑
C140G
‑
S149H
‑
E167D
‑
V168Y
‑
V171K
‑
T202E
‑
C211L
‑
T212R
‑
G244D
‑
T245K
‑
D266E
‑
V270I
‑
F272H
‑
S277A
‑
A285V
‑
K301E
‑
R312I
‑
T329I
‑
G331A
‑
A341L
‑
I356F
‑
P361F
‑
G387E
‑
T392V
‑
L393I
‑
S395K
‑
K414E
‑
I419K
‑
A426E；或L5I
‑
L34H
‑
I48K
‑
I62V
‑
N87M
‑
P88N
‑
H91K
‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭保党，吴炜坤，武强强，倪叶雯，刘德川，
申请(专利权)人：杭州力文所生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：