用于产生免屠宰肉的营养培养基制造技术

本文提供了用于产生免屠宰肉的营养培养基制剂和工程化生长因子及其方法。基制剂和工程化生长因子及其方法。基制剂和工程化生长因子及其方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于产生免屠宰肉的营养培养基
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年6月5日提交的美国临时专利申请号63/035,661的优先权，其内容通过引用以其整体并入本文。
[0003]通过引用序列表并入
[0004]本申请包含序列表，该序列表已通过EFS
‑
WEB以ASCII格式提交，并在此通过引用以其整体并入。所述ASCII副本创建于2021年6月7日，名为MPHM_015_01WO_SeqList_ST25.txt，大小为7.97kb。

技术介绍

[0005]采用通过体外培养后生动物细胞产生的肉类作为从屠宰动物获得的传统动物肉的替代品，势头越来越好。此类肉(在本文中也可互换地称为细胞肉、体外产生的细胞肉、基于细胞培养的肉、体外肉、培养肉、实验室培养的肉或清洁肉)提供了传统肉的可持续替代品并克服了相关的缺点，如微生物污染和暴露于激素和抗生素。它还提供了一些环境效益，包括保护土地和水资源的使用、高热量转换和减少温室气体排放。此外，它还解决了与传统肉产生相关的动物福利问题。
[0006]广泛采用细胞肉的一个障碍是其相对较高的成本。细胞肉的产生与其培养中使用的细胞培养基有着错综复杂的联系，目前估计约占最终产品成本的80％。用于细胞肉产生的细胞培养基的配方面临独特的挑战，例如可扩展性、安全和监管考虑以及成本效率。源自动物源性血清，如胎牛血清，是大多数细胞培养基的常见组分，为高效细胞培养提供营养物和蛋白质的基本混合物。然而，动物源性血清目前还没有达到培养细胞肉所需的工业规模。由于其异质的动物来源，使用动物源性血清还可引入批次间可变性和危险病原体，并且因此需要更多涉及的质量控制措施。
[0007]随着细胞肉越来越接近市场，如FDA和USDA的机构及其国际同行会被要求提供安全和监管监督。用于细胞肉类培养的细胞培养基及其组分可被FDA视为需要监管监督的食品添加剂。
[0008]因此，开发用于产生细胞肉的细胞培养基配方的需求尚未得到满足，该配方满足高安全标准、成本效率、工业规模的适用性，并且含有最少或没有动物源性血清和/或其他动物源性组分。本文提供了用于产生细胞肉的新型细胞培养基组合物和方法，其满足这些及相关需求。

技术实现思路

[0009]本文提供了与用于产生免屠宰肉的营养培养基的产生和使用相关的组合物和方法。
[0010]因此，在一个方面，本文提供了一种用于产生免屠宰肉的可食用营养培养基，所述培养基包含多种成分，其中每种成分被批准用于食品和/或等于或低于其ADI值。在一些实施方案中，被批准用于食品的成分是公认安全的(GRAS)。在一些实施方案中，所述成分被
FDA、USDA、食品法典、欧洲食品安全局和/或食品化学法典批准用于食品中。
[0011]在一些实施方案中，培养基含有不超过10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或不超过0.01％％的动物源性血清。在一些实施方案中，培养基基本上不含动物源性血清或不含动物源性血清。在一些实施方案中，培养基含有不超过10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或不超过0.01％％的动物源性组分。在一些实施方案中，培养基基本上不含动物源性组分或不含动物源性组分。在一些实施方案中，培养基是在化学上定义的。
[0012]在一些实施方案中，培养基还包含生长因子。在一些实施方案中，培养基还包含通用生长因子。在一些实施方案中，通用生长因子是FGF
‑
2。在一些实施方案中，通用FGF
‑
2包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。在一些实施方案中，通用FGF
‑
2由SEQ ID NO:4所示的核酸序列编码。
[0013]在一些实施方案中，通用生长因子是PDGF
‑
BB。在一些实施方案中，通用PDGF
‑
BB包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列。
[0014]在一些实施方案中，通用生长因子是IGF
‑
1。在一些实施方案中，通用IGF
‑
1包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列。
[0015]在一些实施方案中，通用生长因子是VEGF
‑
A。在一些实施方案中，通用VEGF
‑
A包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列。
[0016]在一些实施方案中，培养基用于培养免屠宰肉，并且生长因子是顺式生长因子，其中顺式生长因子与培养中的细胞的属匹配。在一些实施方案中，与非顺式生长因子相比，顺式生长因子的使用允许增强的细胞生长或肉产生。在一些实施方案中，与非顺式生长因子相比允许增强细胞生长的顺式生长因子是顺式原鸡属(Gallus)转铁蛋白。在一些实施方案中，顺式生长因子是培养中细胞的属的相应天然存在的生长因子的变体。在一些实施方案中，顺式生长因子变体是原鸡属LR3
‑
IGF1。在一些实施方案中，原鸡属LR3
‑
IGF1包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
[0017]在一些实施方案中，生长因子选自下组：IGF1、LR3
‑
IGF1、FGF
‑
1、FGF
‑
2、PDGF、CTGF、EGF、TGFB、BMP、HGF、转铁蛋白、胰岛素、WNT、白介素、白蛋白、VEGF、同源物、旁系同源物、直向同源物、变体、前体、同源异构体及其组合。在一些实施方案中，生长因子任选地选自表10。在一些实施方案中，生长因子是鸡生长因子、鸭生长因子、牛生长因子、绵羊生长因子、鱼生长因子、猪生长因子、哺乳动物生长因子、禽生长因子、爬行动物生长因子、两栖动物生长因子、蛛形纲动物生长因子或硬骨鱼生长因子。
[0018]在一些实施方案中，培养基包含粘附蛋白。在一些实施方案中，粘附蛋白任选地选自表14。
[0019]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种氨基酸，其任选地在表1中提供的浓度范围内。
[0020]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种碳水化合物，其任选地在表2中提供的浓度范围内。
[0021]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种维生素，其任选地在表3中提供的浓度范围内。
[0022]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种无机盐，其任选地在表4中提供的浓
度范围内。
[0023]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种微量金属，其任选地在表5中提供的浓度范围内。
[0024]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种脂质，其任选地在表6中提供的浓度范围内。
[0025]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种食用油，其任选地在表6中提供的浓度范围内。
[0026]在一些实施方案中，多种成分包含一种或多种生长因子，其任选地在表12中提供的浓度范围内。
[0027]在一些实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于产生免屠宰肉的可食用营养培养基，所述培养基包含多种成分，其中每种成分被批准用于食品和/或等于或低于其ADI值。2.如权利要求1所述的培养基，其中被批准用于食品的成分是公认安全的(GRAS)。3.如权利要求1所述的培养基，其中所述培养基基本上不含动物源性组分。4.如权利要求1所述的培养基，其中所述培养基基本上不含动物源性血清。5.如权利要求1所述的培养基，其还包含生长因子。6.如权利要求5所述的培养基，其中所述生长因子是选自下组的通用生长因子：通用FGF
‑
2(SEQ ID NO:3)、通用PDGF
‑
BB(SEQ ID NO:5)、通用IGF
‑
1(SEQ ID NO:6)和通用VEGF
‑
A(SEQ ID NO:7)，或与它们具有至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％的序列同一性的序列。7.如权利要求5所述的培养基，其中所述培养基包含顺式生长因子，其中所述顺式生长因子与所产生肉的来源的属匹配。8.如权利要求7所述的培养基，其中与非顺式生长因子相比，所述顺式生长因子的使用允许增强的肉产生。9.如权利要求8所述的培养基，其中所述顺式生长因子是顺式原鸡属(Gallus)转铁蛋白。10.如权利要求7所述的培养基，其中所述顺式生长因子是所产生肉的属的相应天然存在的生长因子的变体。11.如权利要求10所述的培养基，其中顺式生长因子变体是原鸡属LR3
‑
IGF1，任选地包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。12.如权利要求5所述的培养基，其中所述生长因子选自下组：IGF
‑
1、LR3
‑
IGF1、FGF
‑
1、FGF
‑
2、PDGF、CTGF、EGF、TGFB、BMP、HGF、转铁蛋白、胰岛素、WNT、白细胞介素、白蛋白、VEGF、同源物、旁系同源物、直向同源物、变体、前体、同源异构体及其组合。13.如权利要求5所述的培养基，其中所述生长因子选自表10。14.如权利要求5所述的培养基，其中所述生长因子为鸡生长因子、鸭生长因子、牛生长因子、绵羊生长因子、鱼生长因子、猪生长因子、哺乳动物生长因子、鸟类生长因子、爬行动物生长因子、两栖动物生长因子、蛛形纲动物生长因子或硬骨鱼生长因子。15.如权利要求1所述的培养基，其进一步包含选自表14的粘附蛋白。16.如权利要求1所述的培养基，其中所述多种成分包含一种或多种浓度范围如下所示的氨基酸：
17.如权利要求1所述的培养基，其中所述多种成分包含一种或多种浓度范围如下所示的碳水化合物：碳水化合物最低浓度(g/L)最高浓度(g/L)
D
‑
葡萄糖112半乳糖0.12甘露糖0.12麦芽糖0.12岩藻糖0.12蔗糖0.112果糖0.12阿洛糖0.12阿卓糖0.12古洛糖0.12艾杜糖0.12塔罗糖0.12阿洛酮糖0.12山梨糖0.12塔格糖0.12乳糖0.12肌醇0.010.25核糖0.12。18.如权利要求1所述的培养基，其中所述多种成分包含一种或多种浓度范围如下所示的维生素：维生素最低浓度(g/L)最高浓度(g/L)抗坏血酸(Vit C)0.00010.5D
‑
生物素(Vit B7)1.00E
‑
060.005麦角骨化醇(VitD2)1.00E
‑
065.00E
‑
05叶酸(Vit B9)0.00150.02甲萘醌(Vit K3)0.000010.0005烟酰胺(尼克酰胺，Vit B3)0.0010.01烟酸(Vit B3)1.00E
‑
065.00E
‑
02D
‑
泛酸钙(Vit B5)0.00050.01盐酸吡哆辛(Vit B6)1.00E
‑
050.01核黄素(Vit B2)0.00010.005盐酸硫胺(Vit B1)0.00250.05氰钴胺(Vit B12)1.00E
‑
050.005DL
‑
α
‑
生育酚(Vit E)1.00E
‑
070.002D
‑
α
‑
生育酚(Vit E)1.00E
‑
070.002对氨基苯甲酸(PABA)0.0010.01盐酸吡哆醛(Vit B6)0.00050.01。
19.如权利要求1所述的培养基，其中所述多种成分包含一种或多种浓度范围如下所示的无机盐：的无机盐：20.如权利要求1所述的培养基，其中所述多种成分包含一种或多种浓度范围如下所示的微量金属：微量金属最低浓度(g/L)最高浓度(g/L)半五水合镉0.000000010.000001氯化钴0.00000010.00001钼酸铵0.00000010.0001钼酸钠0.00000010.0001偏钒酸铵0.000000010.000005偏钒酸钠0.0000000010.000005氯化锶六水合物0.000010.01硫酸铜2.50E
‑
060.0025亚硒酸钠1.00E
‑
061.00E
‑
04偏硅酸钠0.000010.001氯化铜1.00E
‑
070.001柠檬酸铁铵0.0011硫酸亚铁1.00E
‑
050.001硝酸铁1.00E
‑
050.001硫酸镍六水合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：K，
申请(专利权)人：阿普賽德食品公司，
类型：发明
国别省市：