流式细胞仪及其工作方法技术

本发明专利技术提供了流式细胞仪及其工作方法，所述流式细胞仪包括流通池和检测单元；还包括：多根弯曲的弹性纤维的一端固定在所述流通池的内壁，另一端悬空，弹性纤维之间围出允许单细胞逐个通过的通道；相邻弹性纤维间的缝隙阻止单细胞的通孔。本发明专利技术具有聚焦效果好等优点。点。点。

【技术实现步骤摘要】
流式细胞仪及其工作方法


[0001]本专利技术涉及细胞检测，特别涉及流式细胞仪及其工作方法。

技术介绍

[0002]在流式细胞仪中，通常采用层流鞘液聚焦及声波辅助聚焦等技术使颗粒和细胞处于流通池的中心区域，继而通过激光激发和摄像获得粒子的光谱信号和图像信息。
[0003]但，目前的聚焦技术由鞘液流体或声波与颗粒/细胞相互作用，其相互作用力不够强，并不能很好的将颗粒/细胞限制在中心位置，颗粒/细胞位置的波动会导致仪器检测信号的稳定性变差。
[0004]还有，依层流赖鞘聚焦会使颗粒/细胞高速经过检测区，高流速不利于获取更为可靠、准确的光谱信号和清晰的图像信息，而声波聚焦还受颗粒/细胞的尺寸限制，难适用于颗粒尺寸跨度大的使用场景。

技术实现思路

[0005]为解决上述现有技术方案中的不足，本专利技术提供了一种流式细胞仪。
[0006]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0007]流式细胞仪，所述流式细胞仪包括流通池和检测单元；所述流式细胞仪还包括：
[0008]弹性纤维，多根弯曲的弹性纤维的一端固定在所述流通池的内壁，另一端悬空，弹性纤维之间围出允许单细胞逐个通过的通道；相邻弹性纤维间的缝隙阻止单细胞的通孔。
[0009]本专利技术的目的还在于提供了流式细胞仪的工作方法，该专利技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
[0010]根据本专利技术流式细胞仪的工作方法，所述工作方法为：
[0011]细胞进入所述流通池内，流动中的细胞被约束在所述通道内，液体从弹性纤维之间流过；
[0012]单细胞逐个通过所述通道，检测单元检测单细胞。
[0013]与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果为：
[0014]1.聚焦效果好；
[0015]利用弯曲的弹性纤维形成约束细胞的通道，使得细胞逐个通过通道，提高了细胞聚焦效果；
[0016]2.检测信号稳定；
[0017]弹性纤维均匀地设置在流通池的内壁，形成的通道的中心轴线和流通池的中心轴线共线，便于检测单元中的激光准确地聚焦在单细胞上，从而获得准确的光谱信号和成像信息；
[0018]细胞无需高速通过，提高了信号稳定性。
附图说明
[0019]参照附图，本专利技术的公开内容将变得更易理解。本领域技术人员容易理解的是：这些附图仅仅用于举例说明本专利技术的技术方案，而并非意在对本专利技术的保护范围构成限制。图中：
[0020]图1是根据本专利技术实施例1的流式细胞仪的结构示意图；
[0021]图2是根据本专利技术实施例1的流式细胞仪另一结构示意图。
具体实施方式
[0022]图1
‑
2和以下说明描述了本专利技术的可选实施方式以教导本领域技术人员如何实施和再现本专利技术。为了解释本专利技术技术方案，已简化或省略了一些常规方面。本领域技术人员应该理解源自这些实施方式的变型或替换将在本专利技术的范围内。本领域技术人员应该理解下述特征能够以各种方式组合以形成本专利技术的多个变型。由此，本专利技术并不局限于下述可选实施方式，而仅由权利要求和它们的等同物限定。
[0023]实施例1：
[0024]图1示意性地本专利技术实施例的流式细胞仪的结构图，如图1所示，所述流式细胞仪包括：
[0025]流通池11和检测单元，流通池和检测单元是本领域的现有技术；
[0026]弹性纤维31
‑
32，如图2所示，多根弯曲的弹性纤维31
‑
32的一端固定在所述流通池11的内壁，另一端悬空，弹性纤维31
‑
32之间围出允许单细胞21逐个通过的通道；相邻弹性纤维31
‑
32间的缝隙阻止单细胞21的通孔。
[0027]为了便于检测，进一步地，所述通道的中心轴线和所述流通池11的中心轴线共线，多根弹性纤维31
‑
32均匀地设置在所述流通池11的内壁。
[0028]为了使单细胞21逐个通过通道，进一步地，沿着细胞21流动方向，所述通道的半径逐渐变小，自然状态下，所述通道的最小半径小于细胞21的半径。
[0029]本专利技术实施例流式细胞仪的工作方法，所述工作方法为：
[0030]细胞21进入所述流通池11内，流动中的细胞21被约束在所述通道内，液体从弹性纤维31
‑
32之间流过；
[0031]单细胞21逐个通过所述通道，检测单元检测单细胞21。
[0032]实施例2：
[0033]根据本专利技术实施例1的流式细胞仪及其工作方法在浮游藻类检测中的应用例。
[0034]浮游藻类粒径范围跨度大(0.5μm
‑
1000μm)，藻细胞形态多样，部分藻细胞会聚集成团状、纤维状、树枝状、盘状等。水生态监测中常用光学纤维镜来对藻类进行定性分类和定量计数，该过程繁琐耗时且需要专业藻类知识人员，会引入主观误差，不利于藻类监测数据的标准化管理。目前可用于藻类在线监测的精密仪器如FlowCAM，Cytosense通过光谱法和成像法实现仪器自动化监测藻类，具有效率高、自动化、标准化等优势。但FlowCAM流通池未使用鞘液层流聚焦技术，其藻细胞运动速度<10mm/s容易成像，但未聚焦的藻细胞不一定在焦平面，不利于清晰成像。Cytosense使用了鞘液层流聚焦技术，虽然藻细胞在焦平面附近小范围波动，但藻细胞运动速度达2m/s使得成像困难。
[0035]在该应用例中，如图1
‑
2所示，流通池11的内壁的周向允许设置多根弹性纤维31
‑
32，弯曲的第一组弹性纤维31在自然状态下，形成细胞通道，沿着细胞21传输方向，该通道的半径逐渐变小，且最小半径小于细胞21半径，使得细胞21逐个挤出通道，确保了在流通池11中心轴线上，单细胞21依次通过检测区，弹性纤维31
‑
32采用金属丝；第二组弹性纤维32处于相邻的第一组弹性纤维31之间，用于阻挡细胞的通道，流通池11采用石英材质。
[0036]本专利技术实施例流式细胞仪的工作方法，所述工作方法为：
[0037]藻细胞样品经过预处理使团簇的藻分散成单一细胞或纤维等，若样品中藻浓度过高，则可加入去离子水稀释至合适浓度；
[0038]将预处理后藻细胞样品引入流通池11，水由弹性纤维31
‑
32间隙流过，藻细胞在第一组弹性纤维31导向下逐渐处于中心位置，被约束在所述通道内；
[0039]在流动细胞21挤压下，前端的单细胞21逐个撑开第一组弹性纤维31，从所述通道的尾端挤出，检测单元检测单细胞21。
[0040]上述实施例举例说明了弹性纤维采用金属丝，当然还可以是玻璃丝或塑料丝或其它纤维，只要能提供约束细胞的弹力即可。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.流式细胞仪，所述流式细胞仪包括流通池和检测单元；其特征在于，所述流式细胞仪还包括：弹性纤维，多根弯曲的弹性纤维的一端固定在所述流通池的内壁，另一端悬空，弹性纤维之间围出允许单细胞逐个通过的通道；相邻弹性纤维间的缝隙阻止单细胞的通孔。2.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其特征在于，所述通道的中心轴线和所述流通池的中心轴线共线。3.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其特征在于，所述弹性纤维是塑料丝、玻璃丝或金属丝。4.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其特征在于，多根弹性纤维均匀...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨春，李锐，俞晓峰，
申请(专利权)人：杭州谱育科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：