基于胶乳免疫比浊法测定S100A8/9的试剂盒及方法技术

本发明专利技术实施例公开了一种基于胶乳免疫比浊法测定S100A8/9的试剂盒及方法。本发明专利技术提供的基于胶乳免疫比浊法测定S100A8/9的试剂盒，能有效提高检测S100A8/9的灵敏度和特异性，重复性更好，抗干扰能力强，且试剂稳定性良好，实现了在生化分析仪上的自动检测，操作简单、检测方便快捷，便于临床推广。另外，本发明专利技术提供的试剂盒对肺癌和纤维化进程检测也更加方便，有利于对肿瘤标志物和预后标志物的检测。利于对肿瘤标志物和预后标志物的检测。利于对肿瘤标志物和预后标志物的检测。

【技术实现步骤摘要】
基于胶乳免疫比浊法测定S100A8/9的试剂盒及方法


[0001]本专利技术实施例涉及生物分析
，具体涉及一种基于胶乳免疫比浊法测定S100A8/9的试剂盒及方法。

技术介绍

[0002]S100A8(MRP8)和S100A9(MRP14)是钙离子结合蛋白，属于S100家族的结合蛋白。这个家族的成员包含一个共同的结构，由两个“EF手形”基序组成，它们本身由两个α链组成，由一个肽环分离，其中离子Ca
2+
可以结合。在两个“EF手形”基序之间，S100蛋白之间存在一个铰链区变量，通常赋予不同S100蛋白的生物学活性和特异性。它们通常以异源二聚体的形式存在，而同源二聚体由于稳定性而很少存在。它们组成性地表达在髓系细胞的细胞质中，包括髓系前体细胞、多核中性粒细胞(PNN)和单核细胞，但在淋巴细胞中不表达。它们出现在早幼粒细胞阶段，在成熟的粒细胞中达到最大，占胞质总蛋白的40％。在生理条件下，当单核细胞分化为巨噬细胞时，它们就会消失。S100A8/A9在嗜中性粒细胞和单核细胞中组成性地表达为Ca
2+<br/>传感器，参与本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包被有S100A8/9抗体的胶乳微球溶液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)向缓冲液加入胶乳微球，得活化的胶乳微球体系；2)向所述活化的胶乳微球体系加入S100A8/9抗体，搅拌，之后加入EDC
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HCl溶液和NHS溶液，进行偶联反应，得偶联体系；3)向所述偶联体系加入封闭液进行封闭，之后进行离心，取上清，得混合体系；4)向所述混合体系加入储存液，过夜保存，得所述包被有S100A8/9抗体的胶乳微球溶液；其中，所述缓冲液由体积比为1：3～5的MES缓冲液和硼酸缓冲液组成，所述MES缓冲液以水为溶剂，包括MES
·
H2O6.0～7.0g/L、NaOH4.5～5.5g/L，pH为6.0～6.5；所述硼酸缓冲液以水为溶剂，包括硼酸3.0～3.2g/L、四硼酸钠1.4～1.6g/L，pH为7.2～7.5。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述胶乳微球为羧基聚苯乙烯胶乳颗粒，粒径为140～160nm；所述胶乳微球与缓冲液的体积比为1：3.8～4.2。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述S100A8/9抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.1的第26
‑
33位氨基酸所示；所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.1的第51
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58位氨基酸所示；所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.1的第97
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110位氨基酸所示；所述轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.2的第26
‑
31位氨基酸所示；所述轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.2的第49
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51位氨基酸所示；所述轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.2的第88
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97位氨基酸所示。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述S100A8/9抗体的终浓度为0.04～0.06mg/ml；所述EDC
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HCl的终浓度为1.8～2.2mM；所述NHS的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝立颖，彭勇，韩豪杰，
申请(专利权)人：北京世纪沃德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：