一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统的制备方法及其产品和应用技术方案

一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统的制备方法及其产品和应用，通过水热法制备MOFs纳米粒子；通过膜分散法制备脂质体包覆的载药纳米粒子；最后通过巨噬细胞摄取，制备得到巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统。本发明专利技术利用MOFs材料的荧光上转换发光特性、磁学特性、光催化能力等功能，通过巨噬细胞表面受体修饰的脂质体进行包覆，制备巨噬细胞靶向的载药纳米脂质体颗粒，降低药物毒性的同时，有利于巨噬细胞摄取。该递药系统具有天然的组织归巢能力、良好的靶向性和深穿透能力，能将载药纳米粒子递送至组织深处，提高药物治疗效果，为纳米技术用于临床免疫治疗提供新思路。为纳米技术用于临床免疫治疗提供新思路。

【技术实现步骤摘要】
一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统的制备方法及其产品和应用


[0001]本专利技术涉及一种生物医用材料
的方法，具体是一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统的制备方法及其产品和应用。

技术介绍

[0002]巨噬细胞作为先天免疫系统中的一类专业吞噬细胞和呈递抗原的细胞，广泛存在于组织和器官中，如肺部有肺泡巨噬细胞、肝脏的库普弗细胞、骨骼中的破骨细胞、肿瘤区域的肿瘤巨噬细胞等。
[0003]随着纳米技术的发展，利用纳米粒子改造巨噬细胞或巨噬细胞衍生体（如巨噬细胞膜、巨噬细胞衍生外囊泡等），在免疫治疗中的应用得到了广泛的关注。巨噬细胞具有天然的组织归巢能力，能通过紧密的生物屏障到达血管不足区，他们还能表现出隐形能力，避免被其他单核细胞吞噬，从而形成长时间的循环。因此，巨噬细胞是一种优良的载体，具有良好的靶向性和深穿透能力，同时，能发挥其固有的细胞吞噬功能。工程化巨噬细胞作为药物递送载体面临的挑战活巨噬细胞载药系统的包封率问题，有必要开发智能设计，以降低有效载荷的毒性，提高药物装载效率。
[0004]基于以上背景，本专利技术制备了一种以金属
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有机框架MOFs材料为核心，以连接靶向剂的脂质体为有机核壳进行包覆，通过巨噬细胞吞噬，制备具有小分子药物负载能力、造影能力、巨噬细胞靶向能力的诊疗一体化纳米颗粒，最后通过巨噬细胞摄取，制备巨噬细胞介导的药物递送载体。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的在于提供一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统的制备方法。
[0006]本专利技术的再一目的在于：提供一种上述方法制备的巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统。
[0007]本专利技术的又一目的在于：提供一种上述产品的应用。
[0008]本专利技术目的通过下述方案实现：种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统的制备方法，通过水热法制备MOFs纳米粒子；通过膜分散法制备脂质体包覆的载药纳米粒子；最后通过巨噬细胞摄取，制备巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统；包括以下步骤：（1）将对苯二甲酸（H2IPA）、包括稀土盐或氯化铁的配位金属盐溶于N,N
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二甲基甲酰胺（DMF）与水的混合溶液中，加入微量的聚乙烯吡咯烷酮（PVP，K30）作为表面活性剂，反应物在100 ℃温度下，油浴搅拌加热10 min，过滤后室温下真空干燥，得到MOFs纳米粒子；（2）按质量比10:1:1
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5:1:1称取巨噬细胞受体修饰的磷脂、MOFs、纳米药物分散于氯仿中，55℃旋转蒸发60min除去氯仿，得到均匀的脂质薄膜；加入PBS，在超声震荡下使脂质薄膜重悬，在冰浴环境下使用超声波细胞粉碎机进行声振乳化，设置功率为130W，时间6min；产物经8000rpm离心5min，去除上清液，沉淀用PBS洗涤3次，加入PBS重悬沉淀，得到载
药纳米脂质体分散液；（3）将巨噬细胞与载药纳米脂质体共培养4小时，用胰酶消化后、离心，再用PBS重悬，得到巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统制剂。
[0009]进一步的，步骤（2）所述的磷脂为一种或多种脂质体磷脂，包括DPPC、DSPE；巨噬细胞受体包括甘露糖、清道夫受体。
[0010]进一步的，步骤（3）所述巨噬细胞为原型巨噬细胞或M1、M2型巨噬细胞。
[0011]本专利技术还提供了一种上述方法制备的巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统。
[0012]本专利技术也提供了一种上述产品在的靶向药物中的应用。
[0013]本专利技术的优点在于：1，利用MOFs材料的荧光上转换发光特性、磁学特性、光催化能力等功能，通过巨噬细胞表面受体修饰的脂质体进行包覆，制备巨噬细胞靶向的载药纳米脂质体颗粒，降低药物毒性的同时，有利于巨噬细胞摄取。
[0014]2，该递药系统具有天然的组织归巢能力、良好的靶向性和深穿透能力，能将载药纳米粒子递送至组织深处，提高药物治疗效果。
附图说明
[0015]附图1，巨噬细胞摄取载药纳米粒后的光学图像。
具体实施方式
[0016] 以下实施例以专利技术技术方案为前提进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围并不限于下述的实施例。
[0017]实施例1一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统，通过水热法制备MOFs纳米粒子；通过膜分散法制备脂质体包覆的载药纳米粒子；最后通过巨噬细胞摄取，制备巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统；按以下步骤制备：（1）将1 mmol对苯二甲酸（H2IPA）、1 mmol六水合硝酸铕和1 mmol六水合硝酸钆溶于30 ml N,N
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二甲基甲酰胺（DMF）与水的混合溶液中，加入微量的聚乙烯吡咯烷酮（PVP，K30）作为表面活性剂，反应物在100 ℃温度下，油浴搅拌加热10 min，过滤后室温下真空干燥，得到MOFs纳米粒子；（2）称取50mg二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）、10mg 甘露糖
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DSPE、10mg MOFs、1mg光动力光敏剂MC540，分散于5mL氯仿中，55℃旋转蒸发60min除去氯仿，得到均匀的脂质薄膜；加入3mL的PBS，在超声震荡下使脂质薄膜重悬，在冰浴环境下使用超声波细胞粉碎机进行声振乳化，设置功率为130W，时间6min；产物经8000rpm离心5min，去除上清液，沉淀用PBS洗涤3次，加入3mL的PBS重悬沉淀，得到载药纳米脂质体分散液；（3）将M2型肿瘤相关巨噬细胞106个细胞/mL接种于24孔板中贴壁培养，加入20μL载药纳米脂质体分散液，共培养4小时；用胰酶消化后、离心，再用PBS重悬，得到巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统制剂。巨噬细胞摄取载药纳米粒后的光学图像见图1所示。
[0018]实施例2一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统，与实施例1步骤近似，按以下步骤制
备：（1）按实施例1步骤（1）方法制备，得到MOFs纳米粒子；（2）称取50mg二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）、10mg 甘露糖
‑
DSPE、10mg MOFs、1mg盐酸阿霉素，分散于5mL氯仿中，55℃旋转蒸发60min除去氯仿，得到均匀的脂质薄膜；加入3mL的PBS，在超声震荡下使脂质薄膜重悬，在冰浴环境下使用超声波细胞粉碎机进行声振乳化，设置功率为130W，时间6min；产物经8000rpm离心5min，去除上清液，沉淀用PBS洗涤3次，加入3mL的PBS重悬沉淀，得到载药纳米脂质体分散液；（3）将M2型肿瘤相关巨噬细胞106个细胞/mL接种于24孔板中贴壁培养，加入20μL上述载药纳米脂质体分散液，共培养4小时；用胰酶消化后、离心，再用PBS重悬，得到巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统制剂。
[0019]实施例3一种巨噬细胞介导诊疗一体化纳米递药系统，与实施例1步骤近似，按以下步骤制备：（1）将1 mmol对苯二甲酸（H2IPA）、1 mmol 六水合氯化铁溶于30 ml的N,N
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二甲基甲酰胺（DMF）与水的混合溶液中，加入微量的聚乙烯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
MOFs、1mg盐酸阿霉素，分散于5mL氯仿中，55℃旋转蒸发60min除去氯仿，得到均匀的脂质薄膜；加入3mL的PBS，在超声震荡下使脂质薄膜重悬，在冰浴环境下使用超声波细胞粉碎机进行声振乳化，设置功率为130W，时间6min；产物经8000rpm离心5min，去除上清液，沉淀用PBS...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔大祥，杨迪诚，朱君，徐艳，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：