一种用于防治类风湿关节炎的口服多肽制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种用于防治类风湿关节炎的口服多肽制剂。本发明专利技术提供了一种用于治疗或预防类风湿关节炎的口服多肽制剂，其活性成分为SEQ ID No.1所示多肽，具体为将SEQ ID No.1所示多肽装载于葡聚糖颗粒中后形成。利用本发明专利技术所提供的口服多肽制剂能够有效抑制类风湿关节炎局部的炎性细胞因子分泌，延缓或阻止病情进展。本发明专利技术所提供的口服多肽制剂在治疗类风湿性关节炎方面具有重要应用前景。风湿性关节炎方面具有重要应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种用于防治类风湿关节炎的口服多肽制剂


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种用于防治类风湿关节炎的口服多肽制剂。

技术介绍

[0002]丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是介导细胞反应的重要信号系统，其参与了细胞的生长、分化以及细胞间相互作用，普遍存在于多种生物，包括酵母和哺乳动物细胞。自从1991年Sturgill及其同事在哺乳动物细胞鉴定出细胞外信号调节激酶(ERK)， MAPK信号转导通路的研究取得了迅猛发展。MAPK不同成员具有明显的序列同源性，都是通过“T
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X
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Y”双位点磷酸化达到最大激活。如今，已经有五种p38MAPK异构体分离出来，p38家族根据对刺激的反应性分为两类：p38α/β/β2和p38γ/δ。p38 家族成员的合成和活化不是普遍存在的，但是在不同的细胞系和组织中的p38MAPK 可被不同的介质活化，产生不同的生物学效应，同时也受不同炎症介质的调节。已有的研究表明，p38激酶作为真核细胞的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族的一员，可将各种胞外刺激信号传递至胞核、从而调控基因表达，是多种免疫相关疾病中重要的信号中枢。p38 MARK参与了炎症、应急、发育、细胞生长与凋亡、细胞周期调控、缺血/再灌损伤及心肌肥厚等生理、病理过程中的信号传导。抑制p38 MARK活性，可有效阻断其介导的病理信号转导，从而减轻、甚至消除病理现象。
[0003]聚糖是指以葡萄糖为单糖组成的同型多糖，葡萄糖单元之间以糖苷键连接。其中根据糖苷键的类型又可分为alpha
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葡聚糖和beta
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葡聚糖。葡聚糖以β
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葡聚糖最具生理活性。β
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葡聚糖活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数是通过β
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1,3结合，这是葡萄糖链连接方式。它能够活化巨噬细胞与嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体含量，全面刺激机体免疫系统。那么，机体就有更多准备去抵抗微生物引起的疾病。β
‑
葡聚糖能使受伤机体淋巴细胞产生细胞因子(IL
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1) 的能力迅速恢复正常，有效调节机体免疫机能。大量实验表明，β
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葡聚糖可促进体内 IgM抗体产生，以提高体液免疫能力。这种葡聚糖活化细胞会激发宿主非专一性防御机制，故应用在肿瘤、感染病与治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素β
‑
1,3葡聚糖在美国FDA已认定是种安全的物质，可添加于一般食品，许多报导显示小鼠口服酵母β
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1,3葡聚糖，可增加强腹膜细胞抗菌吞噬作用。
[0004]酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中一种具有增强免疫力活性的多糖
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β
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葡聚糖。β
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葡聚糖广泛存在于各种真菌与植物，如香菇和灵芝、燕麦中，是它们发挥保健作用主要功效物质。而酵母葡聚糖免疫增强活性更强，并具有改善血脂和抗辐射、改善肠道功能的作用。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种用于防治类风湿关节炎的口服多肽制剂。
[0006]第一方面，本专利技术要求保护一种用于治疗或预防类风湿关节炎的口服多肽制剂。
[0007]本专利技术要求保护的用于治疗或预防类风湿关节炎的口服多肽制剂的活性成分为 SEQ ID No.1所示多肽。
[0008]进一步地，所述口服多肽制剂为将SEQ ID No.1所示多肽装载于葡聚糖颗粒中后形成。
[0009]更进一步地，所述口服多肽制剂中，每0.5mg所述葡聚糖颗粒中装载有10
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250μg (如50μg)的SEQ ID No.1所示多肽。
[0010]更加具体地，所述口服多肽制剂可按照包括如下步骤的方法制备得到：
[0011]P1、采用酸碱处理法从对数生长期的活的酵母细胞中提取葡聚糖颗粒，得到葡聚糖颗粒干粉；
[0012]P2、将SEQ ID No.1所示多肽溶于体积百分含量为20％的乙醇水溶液中，得到多肽溶液；然后将步骤P1所得的葡聚糖颗粒干粉加入所述多肽溶液中进行溶胀、冻干；冻干后再加入超纯水进行溶胀、冻干，并反复“溶胀
‑
冻干”过程(指用超纯水进行溶胀、冻干的步骤)，直至所有的所述多肽都被装载入所述葡聚糖颗粒。存于
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20℃备用。
[0013]其中，所述P1可按照包括如下步骤完成：将所述对数生长期的活的酵母细胞分散于80℃的1M NaOH溶液中，保持80℃搅拌1h，然后离心(如8000g离心5min) 收集不溶组分；用超纯水清洗3次去除NaOH以及被热碱液分解的物质，用HCl调pH 为5，保持55℃继续搅拌1h，然后离心(如8000g离心5min)收集不溶组分；依次用超纯水洗涤2次、异丙醇洗涤4次、丙酮洗涤2次；最后真空抽干所有溶剂，得到所述葡聚糖颗粒干粉。存于
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20℃。
[0014]在所述P2中，所述多肽溶液中多肽浓度可为1
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10μg/μL(如1μg/μL)。进行第一次所述溶胀时，所述葡聚糖颗粒干粉与所述多肽溶液的配比可为0.5mg：10
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250μL(如 0.5mg：50μL)。进行所述溶胀的条件为室温溶胀1h。
[0015]在本专利技术的具体实施方式中，所述酵母为酿酒酵母。
[0016]第二方面，本专利技术要求保护前文第一方面所述口服多肽制剂的制备方法。
[0017]本专利技术所要求保护的所述口服多肽制剂的制备方法，包括前文所述P1和所述P2。
[0018]第三方面，本专利技术要求保护SEQ ID No.1所示多肽和葡聚糖颗粒在如下任一中的应用：
[0019]Q1、制备用于治疗类风湿关节炎或改善类风湿关节炎症状的口服药物；
[0020]Q2、制备用于预防类风湿关节炎的口服药物。
[0021]第四方面，本专利技术要求保护前文第一方面所述口服多肽制剂在如下任一中的应用：
[0022]Q1、制备用于治疗类风湿关节炎或改善类风湿关节炎症状的口服药物；
[0023]Q2、制备用于预防类风湿关节炎的口服药物。
[0024]在本专利技术的具体实施方式中，以类风湿性关节炎小鼠模型进行实验。所述口服多肽制剂的给药频次为隔天给药，单次给药剂量为50μg多肽/0.5mg GPs，治疗周期为5 天。
[0025]实验证明，利用本专利技术所提供的口服多肽制剂能够有效抑制类风湿关节炎局部的炎性细胞因子分泌，延缓或阻止病情进展。本专利技术所提供的口服多肽制剂在治疗类风湿性关节炎方面具有重要应用前景。
附图说明
[0026]图1为装载多肽的GPs能保护多肽不被降解，同时显著抑制由LPS诱导的以及 CIA模型的TNF
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α表达水平。(a)GPS可装入多肽，并保护装入其中的多肽不被胃肠道消化酶降解(图中的Q11多肽序列为QQEFQFQFKQQ；图中是以Q11本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于治疗或预防类风湿关节炎的口服多肽制剂，其特征在于：所述口服多肽制剂的活性成分为SEQ ID No.1所示多肽。2.根据权利要求1所述的口服多肽制剂，其特征在于：所述口服多肽制剂为将SEQ ID No.1所示多肽装载于葡聚糖颗粒中后形成。3.根据权利要求2所述的口服多肽制剂，其特征在于：所述口服多肽制剂中，每0.5mg所述葡聚糖颗粒中装载有10
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250μg的SEQ ID No.1所示多肽。4.根据权利要求1
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3中任一所述的口服多肽制剂，其特征在于：所述口服多肽制剂按照包括如下步骤的方法制备得到：P1、采用酸碱处理法从对数生长期的酵母细胞中提取葡聚糖颗粒，得到葡聚糖颗粒干粉；P2、将SEQ ID No.1所示多肽溶于体积百分含量为20％的乙醇水溶液中，得到多肽溶液；然后将步骤P1所得的葡聚糖颗粒干粉加入所述多肽溶液中进行溶胀、冻干；冻干后再加入超纯水进行溶胀、冻干，并反复“溶胀
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冻干”过程，直至所有的所述多肽都被装载入所述葡聚糖颗粒。5.根据权利要求4所述的口服多肽制剂，其特征在于：所述P1是按照包括如下步骤完成的：将所述对数生长期的酵母细...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾军，张旭，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：