基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法技术

本发明专利技术公开了基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法，包括以下步骤：A、首先取适量血清，并冷藏处理；B、将冷藏后的血清进行补体热灭活处理；C、将补体热灭火处理后的血清加入杜氏磷酸盐缓冲液，混合均匀后，加入到细胞分离液中，得到单个核细胞；D、将分离后的单个核细胞接种在培养液中，进行培养血清间充质干细胞；E、最后对血清间充质干细胞的纯化及扩增，本发明专利技术采用的培养优化方法操作简单，能够降低培养成本，能够为干细胞提供稳定的生长环境，显著提高干细胞培养效率；本发明专利技术培养液中添加的添加剂能够刺激细胞生长和细胞分裂，降低培养成本，提高了干细胞的增殖能力。力。

【技术实现步骤摘要】
基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法


[0001]本专利技术涉及干细胞培养
，具体为基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法。

技术介绍

[0002]干细胞是指来自于胚胎、胎儿、成人的具有自我更新和不断繁殖以及分化为多种细胞能力的一类细胞，是机体及其他各种组织细胞的初始来源，这些细胞能够分化成为各种不同的组织细胞，是生物医学领域不佳而缺少的细胞来源，对于临床应用的意义非凡，因此近年来干细胞的研究是生物医学研究的热点。而由于干细胞在机体组织中含量甚微，因此体外培养、扩增干细胞，以使干细胞的数量满足干细胞相关作用及机制的需要，是干细胞研究领域中的关键技术。
[0003]间充质干细胞(Mesenchymal stem cell，MSC)可以从多种组织中获得，如骨髓、脐带等，它不仅具有多向分化潜能，还可以调节T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞等的免疫学活性。目前血清培养基中一般添加bFGF、EGF、SCF等生长因子，因生长因子价格昂贵，大大增加了培养成本，培养效率低，因此，有必要进行改进。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法，其特征在于：包括以下步骤：A、首先取适量血清，并冷藏处理；B、将冷藏后的血清进行补体热灭活处理；C、将补体热灭火处理后的血清加入缓冲液，混合均匀后，加入到细胞分离液中，得到单个核细胞；D、将分离后的单个核细胞接种在培养液中，进行培养血清间充质干细胞；E、最后对血清间充质干细胞的纯化及扩增。2.根据权利要求1所述的基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法，其特征在于：所述步骤A中取血清400ml
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500ml，冷藏温度为2℃
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5℃。3.根据权利要求1所述的基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法，其特征在于：所述步骤B中补体灭活温度为55℃
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60℃，灭活时间为30min
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40min。4.根据权利要求1所述的基于热灭活补体活性的血清的间充质干细胞培养优化方法，其特征在于：所述步骤C中缓冲液采用杜氏磷酸盐缓冲液。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王博昊，
申请(专利权)人：江苏圣澄干细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：