氨基酸产量相关蛋白编码基因rplP及其生物材料和应用制造技术

本发明专利技术公开了氨基酸产量相关蛋白rplP及其生物材料和应用，属于生物技术领域。本申请所要解决的问题是调控微生物氨基酸产量，氨基酸具体可为L

【技术实现步骤摘要】
氨基酸产量相关蛋白编码基因rplP及其生物材料和应用


[0001]本申请属于生物
尤其涉及氨基酸产量相关蛋白rplP及其生物材料和应用。

技术介绍

[0002]属于肠杆菌属的微生物是革兰氏阳性的，并且已广泛用于生产L
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氨基酸。L
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氨基酸，在动物饲料工业以及人类医学和化妆品工业中获得应用。
[0003]已经进行了许多尝试来改进使用肠杆菌属菌株生产L
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氨基酸的方法。其中之一是重组DNA技术的研究，通过该技术可操纵特定基因以敲低或减弱表达从而生产L
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氨基酸。另外，已经进行了这样的研究，即扩增并分析了参与L
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氨基酸生物合成的每种基因对L
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氨基酸生产的影响，从而修饰生产L
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氨基酸的棒状杆菌属菌株。
[0004]在通过发酵生产氨基酸的工业中，生产高浓度的氨基酸和微生物的改善的生产潜力是重要因素。因此，一直在努力增强微生物的氨基酸生产潜力并在发酵培养过程中稳定地维持改善的氨基酸生产潜力。
[0005]因此，仍然需要开发一种L
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氨基酸生产潜力得到提高并且可以稳定保持的菌株。

技术实现思路

[0006]本申请所要解决的技术问题是如何调控或提高微生物的L
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氨基酸产量，尤其是L
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苏氨酸、L
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色氨酸、L
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缬氨酸或L
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精氨酸。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提供了蛋白质：
[0008]本专利技术所提供的蛋白质如下任一种蛋白质
[0009]A1)蛋白质，所述蛋白为rplP蛋白或将所述rplP蛋白的氨基酸序列的第73位异亮氨酸残基替换为下述任一种：
[0010]苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、甲硫氨酸残基、缬氨酸残基、丝氨酸残基、脯氨酸残基、苏氨酸残基、丙氨酸残基、酪氨酸残基、组氨酸残基、谷氨酰胺残基、天冬酰胺残基、赖氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、半胱氨酸残基、色氨酸残基、精氨酸残基、丝氨酸残基或甘氨酸残基；所述rplP蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质；
[0011]A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控微生物氨基酸产量的蛋白质；
[0012]A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。
[0013]如上蛋白为rplP蛋白或将所述rplP蛋白的氨基酸序列的第73位异亮氨酸残基替换为下述任一种；
[0014]所述氨基酸残基为亮氨酸残基、苯丙氨酸残基、缬氨酸残基、天冬氨酸残基、丙氨酸残基或甘氨酸残基；所述rplP蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质。
[0015]上文中，将序列2的第73位异亮氨酸残基突变为亮氨酸残基得到的蛋白质的氨基酸序列是序列6。上文中，将序列2的第73位异亮氨酸残基突变为苯丙氨酸残基得到的蛋白
质的氨基酸序列是序列8。上文中，将序列2的第73位异亮氨酸残基突变为缬氨酸残基得到的蛋白质的氨基酸序列是10。上文中，将序列2的第73位异亮氨酸残基突变为天冬氨酸残基得到的蛋白质的氨基酸序列是12。上文中，将序列2的第73位异亮氨酸残基突变为丙氨酸残基得到的蛋白质的氨基酸序列是14。上文中，将序列2的第73位异亮氨酸残基突变为甘氨酸残基得到的蛋白质的氨基酸序列是16。
[0016]上述蛋白质中，所述蛋白标签(protein
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tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。
[0017]上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。
[0018]上述蛋白质中，所述80％以上的同一性可为至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。
[0019]上述蛋白质中，序列2(SEQ ID No.2)由个273个氨基酸残基组成。
[0020]为解决上述技术问题，本专利技术还提供了生物材料：
[0021]本专利技术所提供的生物材料可为下述任一种：
[0022]B1)、编码上述蛋白质的核酸分子；
[0023]B2)、含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0024]B3)、含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；
[0025]B4)、含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0026]B5)抑制或降低或下调所述蛋白质的编码基因的表达核酸分子；
[0027]B6)表达B5)所述RNA分子的编码基因；
[0028]B7)含有B6)所述基因的表达盒；
[0029]B8)含有B6)所述基因的重组载体、或含有B7)所述表达盒的重组载体；
[0030]B9)有B6)所述基因的重组微生物、或含有B7)所述表达盒的重组微生物、或含有B4)所述重组载体的重组微生物。
[0031]上述生物材料中，B1)所述的核酸分子为下述任一种：
[0032]Z1)编码序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；
[0033]Z2)编码序列是SEQ ID No.7所示的DNA分子；
[0034]Z3)编码序列是SEQ ID No.9所示的DNA分子；
[0035]Z4)编码序列是SEQ ID No.11所示的DNA分子；
[0036]Z5)编码序列是SEQ ID No.13所示的DNA分子；
[0037]Z6)编码序列是SEQ ID No.15所示的DNA分子；
[0038]Z7)核苷酸序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；
[0039]Z8)核苷酸序列是SEQ ID No.7所示的DNA分子；
[0040]Z9)核苷酸序列是SEQ ID No.9所示的DNA分子；
[0041]Z10)核苷酸序列是SEQ ID No.11所示的DNA分子；
[0042]Z11本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蛋白质，其特征在于，所述蛋白质为下述任一种：A1)蛋白质，所述蛋白为rplP蛋白或将所述rplP蛋白的氨基酸序列的第73位异亮氨酸残基替换为下述任一种：苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、甲硫氨酸残基、缬氨酸残基、丝氨酸残基、脯氨酸残基、苏氨酸残基、丙氨酸残基、酪氨酸残基、组氨酸残基、谷氨酰胺残基、天冬酰胺残基、赖氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、半胱氨酸残基、色氨酸残基、精氨酸残基、丝氨酸残基或甘氨酸残基；所述rplP蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控微生物氨基酸产量的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。2.如权利要求1所示的蛋白质，其特征在于，所述蛋白为rplP蛋白或将所述rplP蛋白的氨基酸序列的第73位异亮氨酸残基替换为下述任一种；所述氨基酸残基为亮氨酸残基、苯丙氨酸残基、缬氨酸残基、天冬氨酸残基、丙氨酸残基或甘氨酸残基；所述rplP蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质。3.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：B1)、编码权利要求1或2所述蛋白质的核酸分子；B2)、含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)、含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；B4)、含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；B5)抑制或降低或下调所述蛋白质的编码基因的表达核酸分子；B6)表达B5)所述RNA分子的编码基因；B7)含有B6)所述基因的表达盒；B8)含有B6)所述基因的重组载体、或含有B7)所述表达盒的重组载体；B9)有B6)所述基因的重组微生物、或含有B7)所述表达盒的重组微生物、或含有B4)所述重组载体的重组微生物。4.如权利要求3所述的生物材料，其特征在于，B1)所述的核酸分子为下述任一种：Z1)编码序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；Z2)编码序列是SEQ ID No.7所示的DNA分子；Z3)编码序列是SEQ ID No.9所示的DNA分子；Z4)编码序列是SEQ ID No.11所示的DNA分子；Z5)编码序列是SEQ ID No.13所示的DNA分子；Z6)编码序列是SEQ ID No.15所示的DNA分子；Z7)核苷酸序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；Z8)核苷酸序列是SEQ ID No.7所示的DNA分子；Z9)核苷酸序列是SEQ ID No.9所示的DNA分子；Z10)核苷酸序列是SEQ ID No.11所示的DNA分子；Z11)核苷酸序列是SEQ ID No.13所示的DNA分子；Z12)核苷酸序列是SEQ ID No.15所示的DNA分子。
5.下述任一种材料在调控微生物氨基酸产量、或制备调控微生物氨基酸产量、或微生物育种中的用途：C1)蛋白质，所述蛋白质为权利要求1或2所述的蛋白质或为下述任一种蛋白质：M1)氨基酸序列是序列2的蛋白质；M2)将M1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与M1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控微生物氨基酸产量的蛋白质；M3)在...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏爱英，孟刚，苏厚波，赵春光，贾慧萍，田斌，
申请(专利权)人：宁夏伊品生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：