L-酪氨酸产量相关蛋白yedZ及其生物材料和应用制造技术

本发明专利技术公开了L

【技术实现步骤摘要】
L
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酪氨酸产量相关蛋白yedZ及其生物材料和应用


[0001]本申请属于生物
尤其涉及L
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酪氨酸产量相关蛋白yedZ及其生物材料和应用。

技术介绍

[0002]酪氨酸(L
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tyrosine，Tyr)是一种重要的营养必需氨基酸，对人和动物的新陈代谢、生长发育起着重要的作用，广泛应用在食品、饲料、医药和化工等行业。其常作为苯丙酮尿症患者的营养补充剂，以及多肽类激素、抗生素、L
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多巴、黑色素、对羟基肉桂酸、对羟基苯乙烯等医药化工产品的制备原料。而随着更多高附加值L
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酪氨酸衍生物如丹参素、白藜芦醇、羟基酪醇等在生物体内发现，L
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酪氨酸越来越朝着平台型化合物的方向发展。

技术实现思路

[0003]本申请提供了L
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酪氨酸产量相关蛋白yedZ及其生物材料和应用，本申请解决的技术问题是如何调控或提高微生物的L
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氨基酸产量，尤其是L
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酪氨酸。
[0004]为了解决上述问题，本申请提供了蛋白质。
[0005]本申请所提供的蛋白质为下述任一种：
[0006]所述蛋白质为下述任一种：
[0007]A1)蛋白质，所述蛋白为yedZ蛋白或将所述yedZ蛋白的氨基酸序列的第180位丙氨酸残基替换为下述任一种氨基酸残基得到的yedZ突变蛋白：
[0008]精氨酸残基、半胱氨酸残基、苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、异亮氨酸、甲硫氨酸残基、缬氨酸残基、丝氨酸残基、脯氨酸残基、苏氨酸残基、酪氨酸残基、组氨酸残基、谷氨酰胺残基、天冬酰胺残基、赖氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、色氨酸残基、丝氨酸残基或甘氨酸残基；所述yedZ蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质；
[0009]A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控微生物L
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酪氨酸产量的蛋白质；
[0010]A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有调控微生物L
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酪氨酸产量得融合蛋白质。
[0011]上述蛋白质为yedZ蛋白或将所述yedZ蛋白的氨基酸序列的180位丙氨酸残基替换为下述任一种；
[0012]所述氨基酸残基为缬氨酸残基、色氨酸残基、苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、异亮氨酸残基或甲硫氨酸残基；所述yedZ蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质。
[0013]上文中，将序列2的第180位丙氨酸残基突变为缬氨酸残基得到的蛋白质的氨基酸序列是序列6。
[0014]上述蛋白质中，所述蛋白标签(protein
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tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。
[0015]上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gapexistencecost，Perresiduegapcost和Lambdaratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。
[0016]上述蛋白质中，所述80％以上的同一性可为至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。
[0017]上述蛋白质中，序列2(SEQ ID No.2)由个211个氨基酸残基组成。
[0018]为了解决上述问题，本申请提供了生物材料。
[0019]所述生物材料为下述任一种：
[0020]B1)、编码上述蛋白质的核酸分子；
[0021]B2)、含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0022]B3)、含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；
[0023]B4)、含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0024]B5)抑制或降低或下调所述蛋白质的编码基因的表达核酸分子；
[0025]B6)表达B5)所述RNA分子的编码基因；
[0026]B7)含有B6)所述基因的表达盒；
[0027]B8)含有B6)所述基因的重组载体、或含有B7)所述表达盒的重组载体；
[0028]B9)有B6)所述基因的重组微生物、或含有B7)所述表达盒的重组微生物、或含有B4)所述重组载体的重组微生物。
[0029]上述生物材料中，B1)所述的核酸分子为下述任一种：
[0030]Z1)编码序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；
[0031]Z2)编码序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；
[0032]Z3)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，540位胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；
[0033]Z4)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；
[0034]Z5)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；
[0035]Z6)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为腺嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；
[0036]Z7)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为腺
嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，540位胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；
[0037]Z8)核苷酸序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；
[0038]Z9)核苷酸序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；
[0039]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蛋白质，其特征在于，所述蛋白质为下述任一种：A1)蛋白质，所述蛋白为yedZ蛋白或将所述yedZ蛋白的氨基酸序列的第180位丙氨酸残基替换为下述任一种氨基酸残基得到的yedZ突变蛋白：精氨酸残基、半胱氨酸残基、苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、异亮氨酸、甲硫氨酸残基、缬氨酸残基、丝氨酸残基、脯氨酸残基、苏氨酸残基、酪氨酸残基、组氨酸残基、谷氨酰胺残基、天冬酰胺残基、赖氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、色氨酸残基、丝氨酸残基或甘氨酸残基；所述yedZ蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控微生物L
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酪氨酸产量的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有调控微生物L
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酪氨酸产量得融合蛋白质。2.如权利要求1所示的蛋白质，其特征在于，所述蛋白为yedZ蛋白或将所述yedZ蛋白的氨基酸序列的180位丙氨酸残基替换为下述任一种；所述氨基酸残基为缬氨酸残基、色氨酸残基、苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、异亮氨酸残基或甲硫氨酸残基；所述yedZ蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质。3.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：B1)、编码权利要求1或2所述蛋白质的核酸分子；B2)、含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)、含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；B4)、含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；B5)抑制或降低或下调所述蛋白质的编码基因的表达核酸分子；B6)表达B5)所述RNA分子的编码基因；B7)含有B6)所述基因的表达盒；B8)含有B6)所述基因的重组载体、或含有B7)所述表达盒的重组载体；B9)有B6)所述基因的重组微生物、或含有B7)所述表达盒的重组微生物、或含有B4)所述重组载体的重组微生物。4.如权利要求3所述的生物材料，其特征在于，B1)所述的核酸分子为下述任一种：Z1)编码序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；Z2)编码序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；Z3)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，540位胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；Z4)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；Z5)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸
残基得到的DNA分子；Z6)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为腺嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；Z7)编码序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为腺嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，540位胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；Z8)核苷酸序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；Z9)核苷酸序列是SEQ ID No.5所示的DNA分子；Z10)核苷酸序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基替换为胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基，539位胞嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基，540位胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸残基替换为鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸残基得到的DNA分子；Z11)核苷酸序列是将SEQ ID No.1的第538位的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏爱英，孟刚，苏厚波，赵春光，贾慧萍，田斌，
申请(专利权)人：宁夏伊品生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：