一种蛋白质谷氨酰胺酶及其应用制造技术

本发明专利技术属于酶的基因工程技术领域，具体涉及通过易错PCR技术体外定向进化获得酶活力提高的蛋白质谷氨酰胺酶突变体及其制备。所述突变体是在来自解朊金黄杆菌(Chryseobacterium proteolyticum)的野生型蛋白质谷氨酰胺酶的基础上发生第144位的A144G突变获得的，具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。将上述高活力蛋白质谷氨酰胺酶在枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌表达系统内发酵酶活最高值分别为2.9U/mL和6.5U/mL。mL和6.5U/mL。mL和6.5U/mL。

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白质谷氨酰胺酶及其应用

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[0001]本专利技术属于酶的基因工程
，具体涉及通过易错PCR技术体外定向进化获得酶活力提高的蛋白质谷氨酰胺酶突变体及其制备。

技术介绍
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[0002]蛋白质谷氨酰胺酶(EC 3.5.1.44,protein glutaminase,PG)是近年来广泛关注的脱酰胺酶，属于酰胺基水解酶类。PG可以水解大分子蛋白质和一些小肽侧链的谷氨酰胺并生成蛋白质L
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谷氨酸和氨，从而改善蛋白质的各项功能性质，降低植物蛋白酶的致敏性，在食品、生物医药以及化妆品等行业具有极大的应用价值。
[0003]PG是由日本科学家Yamaguchi S和Yokoe M在2000年首次发现，他们从土壤中分离获得产PG的菌株C.proteolyticium 9670,该菌株和大部分金黄杆菌一样，可以产生一种Flexirubin型色素，这种色素经过KOH处理会变为红色，在HCl中和后恢复原来的颜色。随后在2001年，Yamaguchi S等人研究发现PG是以pro
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PG形式表达并公布其基因序列。2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质谷氨酰胺酶突变体，其特征在于，所述蛋白质谷氨酰胺酶突变体具有SEQ IDNO.3所示的氨基酸序列。2.权利要求1所述蛋白质谷氨酰胺酶突变体的编码基因。3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于，所述编码基因具有SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。4.包含权利要求2所述编码基因的重组质粒或重组菌株。5.如权利要求4所述的重组质粒，其特征在于，采用的表达载体为pET

【专利技术属性】
技术研发人员：刘逸寒，李子源，路福平，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：