一种抗HIV的抗体制造技术

本发明专利技术公开了一种抗HIV的抗体，所述抗体包含分别如SEQ ID NO.1、2、3所示氨基酸序列的重链互补决定区CDR

【技术实现步骤摘要】
一种抗HIV的抗体


[0001]本专利技术属于细胞免疫学、基因工程领域，涉及一种抗HIV的抗体。

技术介绍

[0002]人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）是引发艾滋病(Acquired Immunodefieiency Syndrome，AIDs)即获得性免疫缺陷综合征的病原体。HIV 包括 HIV
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1 和 HIV
‑
2 两种类型，两者在基因水平上的差异>55%。其中 HTV
‑
1 具有更强的毒力和传染性，世界范围内大多数艾滋病病例是由 HIV
‑
l的感染引起的。与HIV
‑
1相比，HIV
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2 的复制能力和致病性较弱，其感染所造成的病例主要存在于非洲西部地区，并且数量较少。因此，目前全世界主要的研究目标为 HIV
‑
1。
[0003]HIV为逆转录病毒科慢病毒属，它具有慢病毒类似的基本结构特征，由衣壳蛋白组装形成核心，在其外侧，则是由基质蛋白（p17）形成的球状结构，球状结构被一层类脂膜包裹，其上镶嵌着 HIV的包膜蛋白。HIV 的遗传物质为两条 10kb左右的RNA 链，同逆转录聚合酶（RT）存在于衣壳蛋白内部。HIV
‑
1的基因组至少含有9条基因片段，其中病毒的结构蛋白由gag、env、pol基因编码，剩余的基因主要编码调控蛋白，其中gag基因编码P17、P24、P15等。病毒增殖所必须的蛋白酶（PR)、逆转录酶（RT)、整合酶（IN）等则由pol基因编码。env基因负责编码糖基化的包膜蛋白前体gp160，gp160裂解后形成表面膜蛋白 gp120和跨膜蛋白gp41。在各种蛋白和核酸的共同作用下，HIV得以成功组装成大小为100
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120mm的球状病毒颗粒。
[0004]HIV广谱中和抗体，因为识别HIV病毒膜蛋白相对保守的位点，受到HIV病毒变异的影响较小，所以可对抗绝大多数HIV病毒株，比例甚至可以达到90%以上，因而在艾滋病治疗中具有极高的应用价值。但感染者体内这类HIV广谱中和抗体很难产生，究其原因，发现HIV广谱中和抗体（如4E10、B12、2G12、2F5），往往还是自身反应性和多反应性抗体（据报道，75%的HIV抗体具有多反应性），由于可以与人体自身抗原等多种抗原反应，所以在发育过程中，免疫系统会将分泌这类抗体的B细胞克隆清除，以免引起自身免疫反应，这可能是HIV广谱中和抗体难以产生的原因，因此本领域的很多研究正致力于寻找更敏感、更具有特异性、更简便的HIV广谱抗体的筛选及检测技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的之一在于提供一种抗HIV的广谱中和抗体。
[0006]本专利技术的目的之二在于提供了一种筛选抗HIV广谱中和抗体的方法。
[0007]本专利技术的目的之三在于提供了检测或治疗HIV感染的药物和途径。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面提供了一种抗HIV抗体，所述抗体包含： 重链可变区和轻链可变区，其中所述重链可变区包括重链互补决定区，所述重链互补决定区包含：SEQ ID NO.1的氨基酸序列所示的CDR
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H1、SEQ ID NO.2的氨基酸序列所示的CDR
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H2以及SEQ ID NO.3的
氨基酸序列所示的CDR
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H3；所述轻链可变区包含轻链互补决定区，所述轻链互补决定区包含：SEQ ID NO.5的氨基酸序列所示的CDR
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L1、SEQ ID NO.6的氨基酸序列所示的CDR
‑
L2以及SEQ ID NO.7的氨基酸序列所示的CDR
‑
L3。
[0009]进一步，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。
[0010]本专利技术的第二方面提供了一种核酸分子，所述核酸分子编码本专利技术的第一方面所述的抗体。
[0011]本专利技术的第三方面提供了一种载体，所述载体包含本专利技术的第二方面所述的核酸分子。
[0012]本专利技术的第四方面提供了一种包含本专利技术的第二方面所述的核酸分子或本专利技术的第三方面所述的载体的宿主细胞。
[0013]本专利技术的第五方面提供了一种产品，所述产品包含本专利技术的第一方面所述的抗体、本专利技术的第二方面所述的核酸分子、本专利技术的第三方面所述的载体或本专利技术的第四方面所述的宿主细胞。
[0014]本专利技术的第六方面提供了一种用于生成抗HIV广谱中和抗体的方法，所述方法包括：培养本专利技术的第四方面所述的宿主细胞。
[0015]本专利技术的第七方面提供了一种免疫偶联物，所述的免疫偶联物包含本专利技术的第一方面所述的抗体。
[0016]本专利技术的第八方面提供了一种检测样品中HIV病毒的方法，所述方法包括使样品与本专利技术的第一方面所述的抗体接触，从而检测所述样品中的HIV病毒。
[0017]本专利技术的第九方面提供了如下任一项所述的应用：(a)本专利技术的第一方面所述的抗体、本专利技术的第二方面所述的核酸分子、本专利技术的第三方面所述的载体、本专利技术的第四方面所述的宿主细胞、本专利技术的第五方面所述的产品、本专利技术的第六方面所述的方法或本专利技术的第七方面所述的免疫偶联物在制备治疗HIV 感染或HIV相关疾病的药物中的应用；(b)本专利技术的第一方面所述的抗体、本专利技术的第二方面所述的核酸分子、本专利技术的第三方面所述的载体、本专利技术的第四方面所述的宿主细胞、本专利技术的第五方面所述的产品或本专利技术的第七方面所述的免疫偶联物在制备检测HIV感染或HIV相关疾病诊断、预后或治疗监测的产品中的应用；(c)本专利技术的第一方面所述的抗体在HIV免疫组织化学测定中的应用。
附图说明
[0018]图1是pcDNA3.1(+)
‑
Fc表达载体图；图2是人源化BLT小鼠外周血成熟B细胞分选图；图3是BN4抗体自身反应性检测（Hep
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2 Elisa）图；图4是BN4抗体与HIV表面抗原gp140
‑
trimer结合活性检测图。
具体实施方式
[0019]本专利技术基于人源化BLT小鼠的研究。人源化BLT小鼠，是将人胎儿脐带血中CD34
+
的
造血干细胞、胎儿肝和胸腺组织移植到NOD/SCID小鼠体内，使人的造血细胞、淋巴细胞在BLT小鼠体内发育。由于人B细胞处在小鼠体内的发育环境中，对于人体来讲的这类自身反应/多反应性B细胞克隆可能被清除的比例降低，从而可以更多地保留下来。我们建立了人源化BLT小鼠模型，研究BLT小鼠体内人B细胞的发育情况，发现75%的成熟B细胞具有自身/多反应性，比例相当高。在对这些自身/多反应性抗体进行研究过程中，发现了具备HIV广谱中和抗体特征的抗体，这相当于从含高比例自身/多反应性抗体库中进行HIV抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗HIV广谱中和抗体，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中所述重链可变区包括重链互补决定区，所述重链互补决定区包含：SEQ ID NO.1的氨基酸序列所示的CDR
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H1、SEQ ID NO.2的氨基酸序列所示的CDR
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H2以及SEQ ID NO.3的氨基酸序列所示的CDR
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H3；所述轻链可变区包含轻链互补决定区，所述轻链互补决定区包含： SEQ ID NO.5的氨基酸序列所示的CDR
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L1、SEQ ID NO.6的氨基酸序列所示的CDR
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L2以及SEQ ID NO.7的氨基酸序列所示的CDR
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L3。2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述的抗体。4.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所述的核酸分子。5.一种包含权利要求3所述的核酸分子或权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：耿树生，周艺，
申请(专利权)人：北京昭衍生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：