将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法技术

一种将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法，其特征在于，通过制备含有外源基因的农杆菌菌液并将其施加至成熟时期的荷花雌蕊上，通过人工授粉的方式获得荷花种子，实现稳定表达。本发明专利技术在受体植物原位进行，避开了荷花组织培养和离体再生过程困难的问题，操作简便，转化效率可达12.5％～40.5％，得到的转基因种子成苗率高，此发明专利技术方法为荷花的分子育种、遗传改良和分子生物学的研究提供了广阔的应用前景。应用前景。应用前景。

【技术实现步骤摘要】
将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法


[0001]本专利技术涉及的是一种基因工程领域的技术，具体是一种将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法。

技术介绍

[0002]荷花是多年生水生草本植物，为印度国花及世界著名宗教圣花，在我国分布极为广泛，栽培历史悠久，是中国传统十大名花之一，具有极高的文化内涵及观赏价值。荷花不仅文化底蕴深厚，且具有极高的经济价值。莲藕是我国重要的蔬菜之一，莲子、莲子胚芽、莲藕、藕节、荷叶及荷花等都可入药。荷花作为著名的观赏植物，可以用作盆花或切花，不仅能美化环境，还可以净化水体，荷花是集观赏、食用、药用及文化于一体的非常重要的花卉。因此，急需加大荷花新品种选育及创新工作的进度，从而提供良好的经济效益和社会效益。
[0003]尽管荷花的全基因组测序已经完成，但荷花的分子育种和分子生物学方面的研究依然远远落后于模式植物，也落后于其它一些重要观赏花卉。主要原因是荷花的遗传转化体系和外植体再生一直是难点，迄今为止鲜有成功报道，导致荷花的转基因研究进展十分缓慢。现有技术很难实现外源基因整合到基因组中稳定表达。因此，为了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法，其特征在于，通过制备含有外源基因的农杆菌菌液并将其施加至成熟时期的荷花雌蕊上，通过人工授粉的方式获得荷花种子，实现稳定表达。2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，所述的含有外源基因的农杆菌菌液，通过以下方式制备得到：将含有外源基因的质粒转入农杆菌中，挑取单克隆，PCR电泳检测获得阳性农杆菌；然后挑取单克隆阳性农杆菌转入YEB液体培养基中，过夜摇动培养16～20小时，使OD
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达到0.5～1.0。3.根据权利要求1所述的方法，其特征是，所述的成熟时期的荷花雌蕊，选择开花第一天或第二天的花朵。4.根据权利要求1所述的方法，其特征是，所述的施加是指：将喷雾...

【专利技术属性】
技术研发人员：张大生，田代科，刘凤栾，刘青青，陈青，
申请(专利权)人：上海辰山植物园，
类型：发明
国别省市：