一种采用流式细胞术检测浆细胞含量的方法技术

本发明专利技术涉及细胞检测技术领域，尤其地，涉及IPC G01N15技术领域，更具体地，涉及一种采用流式细胞术检测浆细胞含量的方法。本发明专利技术的检测步骤包括以下步骤：取刺激活化得到的浆细胞加入流式管中，加入FcR封闭工作液，孵育；再加入Live/Dead染色工作液，孵育；孵育结束后加入染色缓冲液，离心去上清；加入配制好的抗体工作液，孵育，结束后加入染色缓冲液，离心；加入染色缓冲液，重悬细胞，细胞流式仪上机检测，设置圈门策略。本发明专利技术的检测方法提供了一种稳定可靠的抗体染色方案和浆细胞群圈门策略。定可靠的抗体染色方案和浆细胞群圈门策略。

【技术实现步骤摘要】
一种采用流式细胞术检测浆细胞含量的方法


[0001]本专利技术涉及细胞检测
，尤其地，涉及IPC G01N15
，更具体地，涉及一种采用流式细胞术检测浆细胞含量的方法。

技术介绍

[0002]流式细胞术(Flow Cytometry,FC)是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。在细胞生物学中，流式细胞术的一种常见用途就是检测和定量样品中存在的细胞类型。由于不同的细胞类型在其表面上表达的蛋白不同，因此可实现细胞检测。抗体可特异性靶向这些蛋白，有效添加一个彩色标记，从而区分一种细胞类型与另一种细胞类型。
[0003]现有专利CN201710321625.1公开了小鼠胸腺或脾脏T淋巴细胞亚群的流式细胞术检测方法，获取胸腺或脾脏单细胞，加入抗小鼠的CD3、CD4、CD8单克隆抗体，避光染色后用流式细胞仪进行检测，分析检测结果。
[0004]现有专利CN201910405117.0公开了一种流式细胞术检测鸡胸腺T淋巴细胞亚群的方法，取鸡胸腺组织制备单细胞悬液，加入抗鸡的CD3、CD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种流式细胞术检测浆细胞含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取刺激活化得到的浆细胞加入流式管中，加入配制好的FcR封闭工作液，孵育；S2：加入配制好的Live/Dead染色工作液，孵育；孵育结束后加入染色缓冲液，离心4～7min，去上清；S3：加入配制好的抗体工作液，孵育，结束后加入染色缓冲液，离心4～7min，去上清；S4：加入染色缓冲液，重悬细胞，细胞流式仪上机检测，设置圈门策略。2.根据权利要求1所述的流式细胞术检测浆细胞含量的方法，其特征在于，所述刺激活化得到的浆细胞数量为1
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105～1
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106个。3.根据权利要求1所述的流式细胞术检测浆细胞含量的方法，其特征在于，所述刺激活化得到的浆细胞为由PBMC经刺激剂刺激活化成的浆细胞。4.根据权利要求1所述的流式细胞术检测浆细胞含量的方法，其特征在于，所述FcR封闭工作液的添加量为100～300μL。5.根据权利要求1所述的流式细胞术检测浆细胞含量的方法，其特征在于，所述S1步骤中孵育的温度为室温或2～8℃，孵育的时...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢意，严坤，韩晴，袁洪林，任方芳，
申请(专利权)人：华夏源上海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：