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非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒及其制备和应用制造技术

技术编号:37207309 阅读:35 留言:0更新日期:2023-04-20 22:59
本发明专利技术公开了一种非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒,包括ELISA反应板,ELISA反应板由重组表达的ASFV非结构重组蛋白pCold

【技术实现步骤摘要】
非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒及其制备和应用


[0001]本专利技术属于病毒检测
,尤其涉及一种非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒及其制备和应用。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟(Africanswinefever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)感染家猪和野猪引起的一种以急性、高热为主要特征的高度接触性传染病,该病病程较短,死亡率高达100%,给国内养猪业带来严重的威胁和巨大的经济损失。根据临床症状,该病可分为最急性、急性、亚急性和慢性四种类型。ASFV的自然宿主包括家猪、野猪和钝缘软蜱,钝缘软蜱被病毒感染后,虽然临床症状不明显,但会呈现持续感染状态,终生携带病毒,因此其不仅是ASFV的储存宿主还是传播媒介。该病被世界动物卫生组织(OIE)列为法定通报的动物传染病,被我国列为一类动物传染病。
[0003]非洲猪瘟和经典猪瘟从临床上很难分辨,染病猪只常常伴随着发热、呼吸困难及内脏出血,通过临床症状很难进行鉴别诊断。
[0004]自非洲猪瘟病毒传入我国以来,给我国养猪业造成了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒,包括ELISA反应板,其特征在于:所述ELISA反应板由重组表达的ASFV非结构重组蛋白pCold
‑Ⅰ‑
B119L抗原包被;所述重组蛋白pCold
‑Ⅰ‑
B119L由序列表SEQ.ID.No.1的碱基序列编码或者具有序列表SEQ.ID.No.2的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒,其特征在于还包括封闭液、洗涤液、稀释液、酶标试剂、阳性对照样品、阴性对照样品、显色液和终止液。3.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒,其特征在于:所述抗原包被采用的包被液为ELISA Coating Buffer 10
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包被液;所述封闭液为含5%脱脂奶粉的PBST;所述洗涤液为含0.05%Tween

20的PBST;所述稀释液为PBST;所述酶标试剂为辣根过氧化物酶标记的山羊抗猪IgG抗体;所述阳性对照样品为ASFV阳性血清样品;所述阴性对照样品为ASFV阴性血清样品;所述显色液为TMB底物显色试剂盒;所述终止液为1M H2SO4。4.权利要求1所述非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒的制备方法,其特征在于:将制备得的重组表达的ASFV非结构重组蛋白pCold
‑Ⅰ‑
B119L经BCA蛋白检测试剂盒测定浓度后,用包被液将其稀释到8μg/ml,每孔100μl加入到ELISA反应板中,于37℃孵育4h即得包被抗原的ELISA反应板。5.一种重组表达的ASFV非结构重组蛋白pCold
‑Ⅰ‑
B119L的制备方法,其...

【专利技术属性】
技术研发人员:‑Ⅰ‑
申请(专利权)人:广西大学
类型:发明
国别省市:

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