【技术实现步骤摘要】
血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒和制备方法及检测方法
[0001]本专利技术涉及免疫层析检测领域,具体涉及一种血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒和制备方法及检测方法。
技术介绍
[0002]血小板在维持正常止血中起着关键的作用。当暴露于受损的血管时,血小板将粘附在暴露的内皮下基质上,随后,在损伤的部位释放或产生的各种因子(如凝血酶、二磷酸腺苷(ADP)或胶原等)激活血小板,血小板激活后,血小板上的糖蛋白GPIIb/IIIa受体发生构象改变,使得其与纤维蛋白原等粘附蛋白结合,导致邻近的血小板补充到损伤部位并聚集形成止血塞或血栓。
[0003]目前市面上常用的抗血小板药物主要是环氧酶
‑
1抑制剂(主要代表药物:阿司匹林)、P2Y12受体抑制剂(代表药物:氯吡格雷,普拉给雷和替格瑞洛)和GP IIb/IIIa抑制剂(代表药物:阿西单抗、依替巴肽、替罗非班)。GP IIb/IIIa受体抑制剂通过可逆或不可逆的方式封闭GP IIb/IIIa受体,从而导致血小板不能通过GP IIb/IIIa受体途径而被激活。
[0004]临床上,服用GP IIb/IIIa受体抑制剂的患者多数具有较为严重而紧急的血栓风险,因此对于服用GP IIb/IIIa受体抑制剂的患者而言,监测其服药效果具有重要意义。实际情况中,由于个体血小板功能活性以及药物疗效的差异性,这可能会导致服用GP IIb/IIIa受体抑制剂的患者达不到理想的用药效果。因此,临床上检测患者的GP I ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒,其特征在于,包括:试纸条和样本稀释液;或试纸条;所述试纸条为包括底板和在所述底板上依次重叠搭接有样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫,所述试纸条记为试纸条A;或所述试纸条为包括底板和在所述底板上依次重叠搭接有样品
‑
结合一体垫、层析膜和吸水垫,所述试纸条记为试纸条B;所述试纸条A和样本稀释液,或试纸条A中:所述样本稀释液、样品垫和/或结合垫上包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体和抗红细胞抗体;所述样品垫、结合垫和/或层析膜上包被凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽;所述层析膜上设置有相间隔的检测线和质控线,所述检测线上包被纤维蛋白原,所述质控线上包被多克隆抗体;所述试纸条B和样本稀释液,或试纸条B中:所述样本稀释液和/或样品
‑
结合一体垫上包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体和抗红细胞抗体;所述样品
‑
结合一体垫和/或层析膜上包被凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽;所述层析膜上设置有相间隔的检测线和质控线,所述检测线上包被纤维蛋白原,所述质控线上包被多克隆抗体。2.根据权利要求1所述的血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒,其特征在于,所述血小板表面特异性受体抗体为P2Y12受体抗体、P选择素受体抗体、前列腺素受体抗体、血小板趋化因子受体抗体和/或5
‑
羟色胺受体抗体;可选的,所述血小板表面特异性受体抗体为P2Y12受体抗体、P选择素受体抗体和/或5
‑
羟色胺受体抗体;可选的,所述血小板表面特异性受体抗体为P2Y12受体抗体和/或P选择素受体抗体。3.根据权利1或2所述的血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒,其特征在于,所述试纸条A和样本稀释液中,所述样本稀释液或样品垫上包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体;可选的,所述试纸条A和样本稀释液中,所述样本稀释液包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体;可选的,所述试纸条B和样本稀释液中,所述样本稀释液包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体;可选的,所述试纸条A和样本稀释液中,所述样品垫和/或结合垫上包含有抗红细胞抗体、凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽;可选的,所述试纸条B和样本稀释液中,所述样品
‑
结合一体垫上包含有抗红细胞抗体、凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒,其特征在于,所述样本稀释液中含有缓冲盐0.01M~0.2M pH7.4~7.5;蛋白保护剂0.2wt%~5wt%;抗凝剂3.2~3.8wt%;增稠剂0.2wt%~3wt%;防腐剂0.01wt%~
0.1wt%;和/或表面活性剂0.01wt%~0.5wt%;可选的,所述样本稀释液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体的浓度为0.01wt%~2wt%;可选的,所述样本稀释液中缓冲盐为PBS,TRIS,HEPES,和硼酸中的至少一种;可选的,所述蛋白保护剂为BSA,酪蛋白,明胶和海藻糖中的至少一种;可选的,所述样本稀释液中,所述抗凝剂为枸橼酸钠;可选的,所述增稠剂为PVP40,PEG20000和PVA中的至少一种;可选的,所述防腐剂为叠氮化钠,P300,和庆大霉素中的至少一种;可选的,所述表面活性剂为吐温20,曲拉通100,吐温80,表面活性剂S9,和表面活性剂S7中的至少一种。5.一种如权利要求1
‑
4任一项所述的血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒的制备方法,其特征在于,包括:所述试纸条的制备和所述样本稀释液的制备;或试纸条的制备;所述试纸条包括试纸条A或试纸条B;所述试纸条A的制备,包括:采用样品垫处理液浸泡所述样品垫,干燥;采用结合垫处理液浸泡所述结合垫,干燥;采用含纤维蛋白原的划膜液在所述层析膜进行划膜形成检测线,采用含多克隆抗体的划膜液在所述层析膜进行划膜形成质控线,干燥;所述样本稀释液、样品垫处理液和/或结合垫处理液包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体和抗红细胞抗体;所述样品垫、结合垫和/或层析膜上包被凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽;在底板上依次重叠搭接有所述样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫;或所述试纸条B的制备,包括:采用样品
‑
结合一体垫处理液浸泡所述样品
‑
结合一体垫,干燥;采用含纤维蛋白原的划膜液在所述层析膜上进行划膜形成检测线,采用含多克隆抗体的划膜液在所述层析膜上进行划膜形成质控线,干燥;所述样本稀释液和/或样品
‑
结合一体垫处理液包含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体和抗红细胞抗体;所述样品
‑
结合一体垫和/或层析膜包含凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽;在底板上依次重叠搭接有所述样品
‑
结合一体垫、结合垫、层析膜和吸水垫。6.根据权利要求5所述的血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述样本稀释液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,荧光标记的血小板表面特异性受体抗体的浓度为0.01wt%~2wt%;和/或所述样品垫处理液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,荧光标记的血小板表面特异性受体抗体的浓度为0.01wt%~2wt%;和/或所述结合垫处理液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,荧光标记的血小板表面特异性受体抗体的浓度为0.01wt%~2wt%;和/或所述样品
‑
结合一体垫处理液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,荧光标记的血小板表面特异性受体抗体的浓度为0.01wt%~2wt%;和/或
所述试纸条A和样本稀释液中,所述样品垫和/或结合垫上包含有抗红细胞抗体、凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽;和/或所述试纸条B和样本稀释液中,所述样品
‑
结合一体垫上包含有抗红细胞抗体、凝血酶受体I激活肽和凝血酶受体IV激活肽。7.根据权利要求5或6所述的血小板GP IIb/IIIa受体抑制率的免疫层析检测试剂盒的制备方法,其特征在于,当所述样品垫处理液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,所述样品垫处理液中含有的凝血酶受体I激活肽浓度为1
‑
20mM,凝血酶受体IV激活肽浓度为5~10mM,抗红细胞抗体浓度为0.01~0.25mg/mL;可选的,当所述样品垫处理液中含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,所述样品垫处理液中还含有缓冲盐0.01~0.5M,pH7.4~7.5;蛋白保护剂0.2wt%~0.5wt%;防腐剂0.01wt%~0.05wt%;增稠剂0.01wt%~0.5wt%;和/或表面活性剂0.01wt%~0.2wt%;可选的,当所述样品垫处理液中不含有荧光标记的血小板表面特异性受体抗体时,所述样品垫处理液中含有的凝血酶受体I激活肽浓度为1
‑
20mM,凝血酶受体IV激活肽浓度为0.001~1μM,抗红细胞抗体浓度为0.01~0.5mg/mL;可选的,当所述样品垫处理液中不含有荧光标记的血...
【专利技术属性】
技术研发人员:聂延召,李奎,胡飞,张静,邱笑违,
申请(专利权)人:北京乐普诊断科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。