【技术实现步骤摘要】
一种应用于青蟹苗种呼肠孤病毒检测的qRT
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PCR试剂盒
[0001]本专利技术涉及水产动物病原检测与病害防控
,具体地说,是一种应用于拟穴青蟹苗种呼肠孤病毒检测的qRT
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PCR试剂盒及检测方法。
技术介绍
[0002]早期研究显示,青蟹呼肠孤病毒(Mud Crab Reovirus,MCRV)感染可导致青蟹近100%的死亡率。近年来的研究显示,该病毒感染非常普遍,几乎所有青蟹养殖池塘都可以检测到该病毒,给青蟹健康养殖造成巨大威胁。
[0003]研究发现,MCRV可以通过多种方式感染青蟹幼体,造成苗种带毒。因此,在青蟹苗种阶段进行病原检测,是切断MCRV传播的关键位点。在青蟹繁育过程中,从受精卵孵化到仔蟹需要经历等多个发育阶段,而了解受精卵和孵化幼体携带MCRV状况,能为健康苗种生产提供可靠保障。前期研究发现,受精卵及其蚤状幼体感染MCRV后,病毒含量通常较低,需利用高灵敏诊断技术检测,才能避免假阴性检测结果出现。因此,开发高灵敏MCRV检测方法是获取健康苗种的前提条件。< ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种应用于青蟹苗种呼肠孤病毒检测的qRT
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PCR试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒检测青蟹呼肠孤病毒基因组片段VP11的ORF区;所述的试剂盒包括一对特异性引物,上、下游引物序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒还包括特异的TaqMan探针,探针序列如SEQ ID NO:3所示。3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒还包括含有适于荧光探针的Taq酶预混试剂和含随机引物Random6的反转录酶预混试剂。4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒的PCR反应体系为:2
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Premix Ex Taq(Probe qPCR)10μL,VP11
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F和VP11
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R各0...
【专利技术属性】
技术研发人员:李新苍,秦闯,赵姝,周俊芳,房文红,王元,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院东海水产研究所,
类型:发明
国别省市:
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