TiO2-MoO3纳米阵列及基于其的miR-145-3p早检传感芯片及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物传感检测技术领域，具体涉及TiO2‑

【技术实现步骤摘要】
TiO2‑
MoO3纳米阵列及基于其的miR
‑
145
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3p早检传感芯片及其应用


[0001]本专利技术涉及生物传感检测
，具体涉及TiO2‑
MoO3纳米阵列及基于其的miR
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145
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3p早检传感芯片及其应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]现有技术中miRNA的检测方法主要有Northern blot分析、实时荧光定量PCR检测(real
‑
time qPCR)、DNA微阵列芯片和二代测序等，但是这些方法往往存在灵敏度低、耗时长，重复性差或者检测成本较高，不适于临床大样本分析等问题。
[0004]并且专利技术人发现现有技术中结直肠癌外泌体miR
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3p的检测方法局限于纯生物领域，针对这一弊端有必要探索结直肠癌外泌体miR
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3p新的检测方法。

技术实现思路

[0005]针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的是提供一种TiO2‑
MoO3纳米阵列及基于其的miR
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3p早检传感芯片及其应用，利用TiO2‑
MoO3纳米复合材料的信号放大作用，并利用体系中光致电信号的强度变化来对真实外周血抽提的结直肠癌外泌体miR
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3p进行检测，具有成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速等优点。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术的技术方案如下所述：
[0007]在本专利技术的第一方面，提供一种TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0008](1)制备TiO2纳米线：将前驱体溶液和布好种子的导电碳布在高温高压条件下加热，取出导电碳布，将导电碳布在高温下加热一段时间，制得生长在导电碳布上的TiO2纳米线；
[0009](2)将步骤(1)制备得到的生长有TiO2纳米线的碳布作为基板，用(NH4)6Mo7O
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水溶液做电解质溶液，进行循环伏安扫描，然后在惰性环境中高温加热，制得TiO2‑
MoO3纳米阵列。
[0010]在本专利技术的第二方面，提供一种基于TiO2‑
MoO3纳米阵列的miR
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3p早检传感芯片的制备方法，包括以下步骤：
[0011](1)将导电基板作为工作电极，铂片为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，构成三电极电解池；
[0012](2)在导电基板表面上滴涂第一方面制备得到的TiO2‑
MoO3纳米阵列；
[0013](3)继续滴涂目标结直肠癌外泌体miR
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3p的特异性探针到工作电极表面，晾干后得到基于TiO2‑
MoO3纳米阵列结直肠癌外泌体miR
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3p早检传感芯片。
[0014]在本专利技术的第三方面，提供一种第一方面所述制备方法制备得到的TiO2‑
MoO3纳米阵列，或第二方面所述制备方法制备得到的基于TiO2‑
MoO3纳米阵列的miR
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3p早检传感芯片在结直肠癌外泌体miR
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3p检测中的应用。
[0015]在本专利技术的第四方面，提供一种结直肠癌外泌体miR
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3p的检测方法，检测步骤如下：
[0016](1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂片电极为辅助电极，第二方面制备的TiO2‑
MoO3纳米阵列结直肠癌外泌体miR
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3p早检传感芯片为工作电极，在pH 7～9的PBS，0.1～0.3mmol/L的抗坏血酸缓冲溶液中进行测试；
[0017](2)用时间
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电流法对目标结直肠癌外泌体miR
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3p标准溶液进行检测，输入电压为0.1V，取样间隔20s，取样时间20s，运行时间500s，光源选择430nm，记录电流变化，绘制工作曲线；
[0018](3)将待测样品代替目标结直肠癌外泌体miR
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3p标准溶液，按照工作曲线的绘制方法进行测定。
[0019]本专利技术的具体实施方式具有以下有益效果：
[0020]本专利技术利用TiO2‑
MoO3纳米复合材料的信号放大作用，利用体系中光致电信号的强度变化来对真实外周血抽提的结直肠癌外泌体miR
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3p进行检测，该方法具有成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速等优点，而且制备过程较为简单，大大克服了目前结直肠癌外泌体miR
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3p检测方法局限于纯生物领域的弊端，有效拓展了结直肠癌外泌体miR
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3p检测方法的范围，具有实际应用推广价值；
[0021]本专利技术中结直肠癌外泌体miR
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3p的检测方法不需经过预处理，电极选择性、灵敏度和重现性较好，电极响应快，测得线性范围100～10
‑3μmol/mL，检测限为10
‑3μmol/mL；
[0022]本专利技术使用TiO2‑
MoO3做为光电信标物质，MoO3对TiO2的杂合大大缩短了二者之间的距离，促进了TiO2的光电性能，增强本专利技术所述传感芯片的光电性能；
[0023]本专利技术所检测结直肠癌外泌体miR
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3p均从实际外周血中提取，具有一定的实用价值。
具体实施方式
[0024]应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本申请使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0025]需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
[0026]本专利技术的一种实施方式中，提供了一种TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0027]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)制备TiO2纳米线：将前驱体溶液和布好种子的导电碳布在高温高压条件下加热，取出导电碳布，将导电碳布在高温下加热一段时间，制得生长在导电碳布上的TiO2纳米线；(2)将步骤(1)制备得到的生长有TiO2纳米线的碳布作为基板，用(NH4)6Mo7O
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水溶液做电解质溶液，进行循环伏安扫描，然后在惰性环境中高温加热，制得TiO2‑
MoO3纳米阵列。2.如权利要求1所述的TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，其特征在于，所述前驱体溶液是将丙酮、浓盐酸和钛酸丁酯混合得到；优选地，所述丙酮、浓盐酸和钛酸丁酯的体积比为20～22：21～23：1～2。3.如权利要求1所述的TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，其特征在于，所述布好种子的导电碳布为：将裸导电碳布浸没于TiCl4乙醇溶液中，取出后将导电碳布高温下加热制得；优选地，TiCl4乙醇溶液中TiCl4的体积含量为2.2～3.2％；优选地，所述高温加热为350～450℃下加热1～3h，进一步优选400℃下加热2h。4.如权利要求1所述的TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，其特征在于，步骤(1)中前驱体溶液和布好种子的导电碳布在高压釜中加热到180～220℃，保持2～4h；优选地，加热到200℃；或者，步骤(1)中取出导电碳布后用乙醇洗涤并干燥；或者，步骤(1)中导电碳布在高温下加热一段时间为400～500℃下加热1～3h，优选450℃下加热2h。5.如权利要求1所述的TiO2‑
MoO3纳米阵列的制备方法，其特征在于，步骤(2)中(NH4)6Mo7O
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水溶液的浓度为0.01～0.10mol/L；或者，步骤(2)中循环伏安扫描的区间为
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0.7～0V，扫速为20mV/s，重复4～60个周期；或者，步骤(2)中高温加热为400～500℃下加热1～3h，优选450℃下加热2h。6.一种基于TiO2‑
MoO3纳米阵列的miR
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3p早检传感芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将导电基板作为工作电极，铂片为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，构成三电极电解池；(2)在导电基板表面上滴涂权利要求1
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5任一权利要求所述制备方法制备得到的TiO2‑
MoO3纳米阵列；(3)继续滴涂目标结直肠癌外泌体miR
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【专利技术属性】
技术研发人员：庞雪辉，解建东，庞迎新，卢文君，孙乐斌，吕晓奕，
申请(专利权)人：山东师范大学，
类型：发明
国别省市：