一种深孔细胞培养板、制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种深孔细胞培养板、制备方法及其应用，涉及生物学中细胞培养装置技术领域。该深孔细胞培养板，包括基础深孔细胞板以及表面修饰的化合物；上述化合物通过化学键键连至深孔细胞板表面；上述化合物包括己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物；上述衣康酸衍生物包括乙基肼衍生衣康酸的产物；上述深孔细胞板表面的化合物的接枝率＞0.4%。本发明专利技术制备的深孔细胞培养板具有更优的表面亲水性能，且亲水时效性得到进一步改善，使用寿命明显增加；同时也进一步改善了细胞培养板的力学性能，韧性得到提升。到提升。到提升。

【技术实现步骤摘要】
一种深孔细胞培养板、制备方法及其应用


[0001]本专利技术属于生物学中细胞培养装置
，具体涉及一种深孔细胞培养板、制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]深孔板用于处理、转移和储藏液体样品，目前广泛用于生物领域如细胞培养等；用于极性有机溶液、酸性和碱性溶液等实验室液体的贮存；用于鉴定系统的母板取样及存样、机械取样和自动移液系统；用于自动稀释器、加样器；用于血液凝集反应，抗体滴度的测定。各种不同的领域对环境的要求不同，这就要求深孔板具有良好的耐受性、耐温性、机械强度大等。现有技术中的深孔板结构的方孔上部容易发生样品残留或毛细现象，导致样品损失过多或交叉感染。当前市面上深孔板制作主要用聚丙烯材料，聚丙烯材料因其非极性，呈现疏水特性。对聚丙烯改性使用最多的方法是共混熔融改性，通过小分子亲水添加剂共混，在经热加工后，亲水小分子与聚丙烯材料相容性差，会迁移到材料表面，因而增强聚丙烯的表面亲水性，但由于高温加工时材料易产生热分解、变黄和力学性能降低等问题。其次是表面涂层改性的方案，这种方法通常采用有机硅涂层，比如硅烷偶联剂，同样有进入溶液体系污染的问题，且工艺繁琐，有过程污染风险，批量生产效应低，生产成本高。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种深孔细胞培养板、制备方法及其应用，该深孔细胞培养板具有更优的表面亲水性能，且亲水时效性得到进一步改善，使用寿命明显增加；同时也进一步改善了细胞培养板的力学性能，韧性得到提升。
[0004]本专利技术为实现上述目的所采取的技术方案为：一种深孔细胞培养板，包括基础深孔细胞板以及表面修饰的化合物；上述化合物通过化学键键连至深孔细胞板表面；上述化合物包括己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物；上述衣康酸衍生物包括乙基肼衍生衣康酸的产物；上述深孔细胞板表面的化合物接枝率＞0.4%。本专利技术采用己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物对经过氩氧混合低温等离子体活化的深孔细胞板表面进行接枝改性，能够有效改善深孔细胞培养板表面的亲水性能，其水接触角明显增加；且其亲水时效性得到显著的提升，产品在空气中放置两个月仍然具有优异的亲水性能，有效延长使用寿命。同时，深孔细胞板表面接枝处理后，其力学性能得到一定提升，尤其冲击强度具有显著的增加。其原因可能在于，本专利技术先采用等离子体对深孔细胞板表面进行活化处理，然后采用己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物进行接枝修饰，在培养板表面引入更多的极性官能团，赋予材料新的物理、化学性能，使得深孔细胞培养板表面表现出更佳的亲水性，生物相容性得到改善；己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物通过化学键连接在板材表面，结合力明显增强，且在两者同时存在的条件下，协同复配，更好地附着在培养板表面，进一步延长培养板表面的亲水时效性，同时力学性能得到增强。
[0005]在具体实施例中，化合物通过固相浸润接枝的方法修饰至深孔细胞板表面。
[0006]在具体实施例中，衣康酸衍生物的化学结构如式I所示：I。
[0007]本专利技术还公开了衣康酸衍生物的制备方法，包括：采用乙基肼与衣康酸酐通过酰胺化反应制备获得衣康酸衍生物。
[0008]进一步的，上述衣康酸衍生物的制备方法，具体包括：取衣康酸酐加入三氯甲烷溶解，浓度为0.2~0.3g/mL，水浴加热至20~30℃，然后缓慢加入浓度为0.5~1g/mL的乙基肼
‑
三氯甲烷溶液，滴加完毕后恒温反应30~60min，之后冷却结晶，减压抽滤，产物用三氯甲烷重结晶、减压蒸馏、干燥得到衣康酸衍生物。
[0009]在具体实施例中，衣康酸酐与乙基肼的摩尔比为1~1.2:1。
[0010]本专利技术还公开了上述深孔细胞培养板的制备方法，包括：预处理，取深孔细胞板置于超声波条件下依次采用蒸馏水、丙酮进行清洗得到预处理的深孔细胞板；等离子体活化，采用Ar/O2混合低温等离子体对预处理的深孔细胞板表面进行活化处理得到活化的深孔细胞板；接枝处理，取活化的深孔细胞板浸润于包含己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物的水溶液中进行处理，接枝得到深孔细胞培养板。
[0011]具体的，上述深孔细胞培养板的制备方法，包括：预处理，取深孔细胞板置于超声波条件下蒸馏水洗20~40min，丙酮超声洗20~40min，之后70~80℃下真空干燥10~20min；等离子体活化，将预处理的深孔细胞板放入射频等离子体系中的等离子体反应室里，按照顺序开启机械泵和罗茨泵，待反应室中的工作气压至10
‑3Pa时，设定工艺参数；处理完成后取出样品得到活化的深孔细胞板；接枝处理，预先配制包含己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物的水溶液，加热至60~70℃，然后加入等离子体活化后的深孔细胞板中使其浸没深孔细胞板的待修饰部位，采用固相浸润接枝的方法在深孔细胞板待修饰部位表面接枝化合物，浸润时间为2~4min，取出后用水清洗2~5次、烘干后得到深孔细胞培养板。
[0012]在具体实施例中，Ar/O2混合低温等离子体工艺参数，包括：Ar/O2流量比为38~40/10~13sccm，处理时间4~6min，功率280~320W，工作气压75~85Pa。
[0013]在具体实施例中，水溶液中己二烯酒石酸二胺的浓度为40~45wt%。
[0014]在具体实施例中，水溶液中衣康酸衍生物的浓度为20~25wt%。
[0015]在具体实施例中，水溶液由水/丙酮混合溶液替代。
[0016]优选地，上述水/丙酮混合溶液还加入3
‑
双(2
‑
羟乙基)氨基
‑2‑
羟基丙磺酸。本专利技术在深孔细胞板表面接枝处理过程中加入3
‑
双(2
‑
羟乙基)氨基
‑2‑
羟基丙磺酸，能够起到一定的界面活性剂的作用，更好地促进接枝化合物在深孔细胞板表面的接枝过程，明显增加化合物的接枝率，进而对深孔细胞培养板表面的形貌结构产生有益的改变，从而有效提升深孔细胞培养板的亲水性和力学性能。
[0017]在具体实施例中，3
‑
双(2
‑
羟乙基)氨基
‑2‑
羟基丙磺酸加入量为0.01~0.02mol/L；丙酮与水的体积比为0.8~1.4:1。
[0018]更优选地，深孔细胞板表面的化合物接枝率＞0.7%。
[0019]相比于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术采用己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物对经过氩氧混合低温等离子体活化的深孔细胞板表面进行接枝改性，能够有效改善深孔细胞培养板表面的亲水性能，其水接触角明显增加；且其亲水时效性得到显著的提升，有效延长使用寿命。同时，深孔细胞板表面接枝处理后，其力学性能得到一定提升，尤其冲击强度具有显著的增加。本专利技术在深孔细胞板表面接枝处理过程中加入3
‑
双(2
‑
羟乙基)氨基
‑2‑
羟基丙磺酸，能够明显增加化合物的接枝率，进而对深孔细胞培养板表面的形貌结构产生有益的改变，从而有效提升深孔细胞培养板的亲水性和力学性能。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种深孔细胞培养板，包括基础深孔细胞板以及表面修饰的化合物；所述化合物通过化学键键连至深孔细胞板表面；所述化合物包括己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物；所述衣康酸衍生物包括乙基肼衍生衣康酸的产物；所述深孔细胞板表面的化合物的接枝率＞0.4%。2.根据权利要求1所述的深孔细胞培养板，其特征在于，所述化合物通过固相浸润接枝的方法修饰至深孔细胞板表面。3.权利要求1所述的深孔细胞培养板的制备方法，包括：预处理，取深孔细胞板置于超声波条件下依次采用蒸馏水、丙酮进行清洗得到预处理的深孔细胞板；等离子体活化，采用Ar/O2混合低温等离子体对预处理的深孔细胞板表面进行活化处理得到活化的深孔细胞板；接枝处理，取活化的深孔细胞板浸润于包含己二烯酒石酸二胺和衣康酸衍生物的水溶液中进行处理，接枝得到深孔细胞培养板。4.根据权利要求3所述的深孔细胞培养板的制备方法，其特征在于，所述Ar/O2混合低温等离子体工艺参数，包括：Ar/O2流量比为38~40/10~13sccm，处理时间4~...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔小俊，李晗，胡元松，
申请(专利权)人：杭州皓丰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：