用于清除物表核酸污染的水溶液及其湿巾制造技术

本发明专利技术提供用一种用于清除物表核酸污染的水溶液及其湿巾，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为0.1％

【技术实现步骤摘要】
用于清除物表核酸污染的水溶液及其湿巾


[0001]本专利技术涉及核酸检测领域，特别涉及用于清除物表核酸污染的水溶液及其湿巾。

技术介绍

[0002]聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)自问世以来发展迅速，在各个领域都有重要应用。PCR通过变性、退火、延伸这三个阶段温度的循环，能将极少量的DNA模板扩增数百万倍，具有极高的检测敏感性。正是由于PCR高敏感性的特点，实验过程中的任何一个环节发生的极其微量的DNA污染，也足以导致假阳性结果的产生，因而在PCR实验中,控制实验室核酸污染是保证实验结果准确的重要一环。核酸污染一般发生在样本处理环节抽提核酸和检测环节扩增产物泄露，其中最令人头疼的是PCR扩增产物污染，即PCR气溶胶污染。气溶胶为悬浮于气体介质中粒径一般为0.001μm～1000μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态散体系。虽然目前大多PCR反应是闭管的荧光定量PCR，但PCR产物拷贝数多，一般为10
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拷贝/mL，在不断热循环的条件下，任何一点纰漏都容易形成PCR气溶胶。形成的气溶胶飘浮在空气中，黏附到物体表面及检测人员身体上，随着人员及物料流动而污染整个实验室。据测算，一个气溶胶颗粒可能含有48000个拷贝的PCR产物，已远远高于PCR的检测灵敏度，造成假阳性的结果。
[0003]目前通过严格分区物理隔绝的方法防止核酸污染，但核酸检测步骤较多，灵敏度极高，且多个环节样本直接暴露于空气中，核酸污染依然无法彻底避免。尤其物表核酸污染，不像空气中气溶胶污染，可以通过通风、负压来清除，它需要有效的核酸清除方法。
[0004]目前实验室常用的物表核酸清除方法有物理、化学方法和酶法。物理方法中使用较多的是紫外线清除，比如紫外线照射12～18小时，对空气中大于500bp的核酸污染有一定清除效果，但紫外线的清除作用距离在80cm～100cm之间，且对200bp以下的短片段核酸不敏感，所以对污染有小于200bp的PCR产物的物表，清除效果并不理想。在核酸污染化学清除方法中，主要使用一些具有强氧化性的化合物，包括过氧化氢或过氧乙酸、一些含氯化合物等。比较常见的是含氯84消毒液，虽对物表核酸清除有一定效果，但这种含氯消毒剂的稳定性差，有效期短，对金属物表有一定腐蚀作用。而其他常规消毒剂如酒精，其实是核酸提取试剂中的一个组分，对核酸没有任何降解作用。酶法清除其实是通过核酸酶快速与单链、双链、线性、环状等各种形式的DNA或RNA进行反应，将其降解为3至5个碱基长度的5'
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单磷酸寡核苷酸。但这种核酸酶作用没有选择性，还会残留在各种物表，形成次生污染，降解后续样本中的核酸模板，尤其是一些弱阳性的标本，导致出现假阴性结果，所以不适合用来清除物表的核酸污染。
[0005]CN20211042978.3和CN202210026958.2公开了一种清除PCR气溶胶污染的喷剂，主要含有过氧化物、表面活性剂等，尝试通过过氧化物的氧化特性，特异性的氧化DNA核酸分子，达到清除核酸污染的目的。但过氧化物是强氧化剂，不够稳定，很短的时间内就降解成水和氧而失去活性，且对人体有害，实验室大多用于消毒，对核酸的降解作用较弱，一般需用高浓度的过氧化物才能达到一定的核酸降解作用，所以实际使用效果有限。
CN201911003447.3和CN202111352515.4公布的核酸去除剂，它含有过氧化氢，次氯酸钠，酸性物质等，两者的pH均为酸性。一般pH值为3.5～4.5时过氧化氢的稳定性较好，但次氯酸钠只有在碱性环境中才能稳定，在酸性环境中极易降解失效。因此这些清除剂作用物表的核酸清除，处理效果均不佳，寻找一种使用方便、安全、有效、稳定、经济的物表核酸污染清除方法是核酸检测实验室的当务之急。

技术实现思路

[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提一种用于清除物表核酸污染的水溶液，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为0.1％
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0.5％的次氯酸盐，所述溶液的pH为10
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12。
[0007]在一种实施方式中，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为0.1％
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0.5％的次氯酸钠，所述溶液中还包括碳酸氢钠和氢氧化钠。
[0008]在一种实施方式中，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为质量百分比浓度为0.25
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0.5％次氯酸钠、质量百分比浓度为0.25％氢氧化钠和质量百分比浓度为0.25％碳酸氢钠。
[0009]在一种实施方式中，所述溶液中还包括两种稳定剂硅酸钠和EDTA。
[0010]在一种实施方式中，所述溶液还包括质量百分比浓度为1％的硅酸钠和0.01％的EDTA。
[0011]在一种实施方式中，所述溶液还包括十二烷基二苯醚二磺酸钠。
[0012]在一种实施方式中，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为0.5％次氯酸钠、质量百分比浓度为0.25％氢氧化钠、质量百分比浓度为0.25％碳酸氢钠、质量百分比浓度为1％硅酸钠、质量百分比浓度为0.01％EDTA和质量百分比浓度为1％十二烷基二苯醚二磺酸钠。
[0013]在一种实施方式中，本专利技术提供一种核酸清除湿巾，所述核酸清除湿巾用上述的水溶液浸泡水刺无纺布制成。
[0014]本专利技术用于清除物表核酸污染的水溶液包括含次氯酸盐、碱性物质、稳定剂、表面活性剂和水，其中所述含次氯酸盐通过氧化作用破会DNA的一级及二级结构，次氯酸盐包括但不限于次氯酸钠、次氯酸以及含有次氯酸根的化合物；所述碱性物质能破坏DNA的磷酸二酯键和氢键，碱性物质包括但不限于NaOH、NaHCO3、Na2CO3等强碱或碱性的盐溶液；所述稳定剂能够保持含氯化合物的稳定性，稳定剂包括但不限于Na2SiO3，EDTA或碳酸盐；所述表面活性剂通过疏水力非离子表面活性剂与DNA的氢键发生作用降解DNA，且能够增强其他组分溶解度，表面活性剂不限于十二烷基二苯醚二磺酸钠(CR
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MADS)、脂肪醇聚乙烯醚硫酸钠等阴离子表面活性剂。
[0015]核酸污染清除方法，尤其是物表核酸污染清除方法，大多使用商品化的清除剂配合喷壶，喷洒物表，再用无纺布擦拭，所使用的清除剂主要组分多为用于消毒的过氧化物，而实验室自配试剂，是将用于消毒的84消毒液稀释后擦拭物表，存在操作不便，喷洒不均匀，同时普通84消毒液对核酸清除效率不高，稳定性不好。针对上述问题，本专利技术提供一种核酸污染清除湿巾，其中湿巾液为核酸清除剂，操作方便、活性高，稳定性好，用于快速清除PCR实验室物表的核酸污染。湿巾液以对核酸降解有一定效果的次氯酸钠为主要原料，从提高次氯酸钠活性和稳定性入手，探索能直接用于核酸污染清除的专用清除剂。次氯酸钠溶
液的活性和稳定性易受光照、浓度、温度、金属阳离子杂质、pH值等因素影响。在诸多因素中，最重要的是溶液的pH值。正常情况下，碱性环境有利于次氯酸根溶液的储存和使用，但过大的pH值又能抑制氢离子对次氯酸根溶液的分解，从而降低其降解核酸的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于清除物表核酸污染的水溶液，其特征在于，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为0.1％
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0.5％的次氯酸盐，所述溶液的pH为10
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12。2.根据权利要求1所述的水溶液，其特征在于，所述溶液包括有效氯含量0.1％
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0.5％的次氯酸钠，所述溶液中还包括碳酸氢钠和氢氧化钠。3.根据权利要求2所述的水溶液，其特征在于，所述溶液包括有效氯含量质量百分比浓度为0.25
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0.5％次氯酸钠、质量百分比浓度为0.25％氢氧化钠和质量百分比浓度为0.25％碳酸氢钠。4.根据权利要求2所述的水溶液，其特征在于，所述溶液中还包括两种稳定剂硅酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱俊杰，陈昊果，陈春雨，
申请(专利权)人：熠创鼎惠上海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：