使用混合脱保护剂合成RNA核酸的方法技术

本发明专利技术提供一种使用混合脱保护剂合成RNA核酸的方法，所述方法是固相亚磷酰胺三酯法，所述RNA核酸至少分成三段合成，合成的每段RNA核酸长度在30

【技术实现步骤摘要】
使用混合脱保护剂合成RNA核酸的方法


[0001]本专利技术涉及核酸合成领域，特别涉及一种使用混合脱保护剂合成RNA核酸的方法。

技术介绍

[0002]单链核酸由一定数量的脱氧核苷酸或者核苷酸组合而成。长链RNA核酸一般是由50个以上的核苷酸(rA、rG、rC、rU)组合而成。长链RNA核酸广泛应用于新型治疗策略开发、Crispr基因编辑、FISH(荧光原位杂交技术)以及RNA修饰对RNA
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蛋白质复合物影响等领域。
[0003]长链RNA核酸在基因组功能研究、药物发现和生物合成等方面的作用日益重要。然而，长链RNA核酸合成一直面临着序列组成复杂、二级结构、修饰标记困难等挑战，尽管已经开发了一些巧妙的策略来优化这些问题并提高长链RNA的合成效率，但受序列结构位阻效应影响，大于50个碱基长度的长链RNA仍无法稳定且高效的合成。因此，迫切需要寻找一种合成长链RNA核酸的新方法。
[0004]在目前固相亚磷酰胺三酯法合成核酸合成中，当合成链过长，可采用分段合成，在合成到50及以上碱基时，可适当增加单体反应遍数，并适当本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.合成RNA核酸的脱保护剂，通过固相亚磷酰胺三酯法合成RNA核酸，其特征在于，所述脱保护步骤中使用的脱保护剂是二氯乙酸和三氯乙酸的二氯甲烷溶液，其中是二氯乙酸和三氯乙酸的质量比为13:2
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2:3。2.根据权利要求1所述的脱保护剂，其特征在于，二氯乙酸和三氯乙酸的二氯甲烷溶液的总的质量浓度为3g/100mL。3.根据权利要求1所述的脱保护剂，其特征在于，其中二氯乙酸和三氯乙酸的质量比为4:1。4.权利要求1
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3任一所述的脱保护剂在合成RNA核酸中的应用，在所述应用中所述RNA核酸至少分成三段合成，合成的每段RNA核酸长度在30
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60碱基，第一段RNA核酸合成依照固相亚磷酰胺三酯法的脱保护、活化耦合、盖帽、氧化四个步骤完成第一段RNA核酸的合成，第二段以上每段RNA核酸合成依照固相亚磷酰胺三酯法的脱保护、活化耦合、盖帽、氧化和盖帽五个步骤完成第二段以上每段RNA核酸的合成。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述耦合步骤中活化耦合剂为0.50M
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0.75M乙巯基四氮唑的乙腈溶液。6.根据权利要求4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡晶晶，王舒心，苏敏，杨凯森，
申请(专利权)人：百力格生物科技上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：