一种用3D模型检测CAR-T细胞在实体瘤中浸润的方法技术

本发明专利技术公开了一种用3D模型检测CAR

【技术实现步骤摘要】
一种用3D模型检测CAR
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T细胞在实体瘤中浸润的方法


[0001]本专利技术涉及一种检测细胞的方法，具体涉及一种检测CAR
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T细胞的方法。

技术介绍

[0002]目前，肿瘤免疫治疗已经成为癌症领域进展最快的方面，而细胞治疗技术在其中发挥了重要作用，其主要包括CAR
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T，CAR
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NK，TCR
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T，TIL等类型。嵌合抗原受体T细胞(CAR
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T)主要通过其表面的嵌合抗原受体识别肿瘤特异/相关抗原，然后诱导T细胞内激活信号，启动对肿瘤细胞的特异性杀伤。CAR
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T在血液肿瘤已有多款产品上市，临床表现出了显著且持久的治疗效果，其在实体肿瘤中的应用也被广泛研究，有多款产品处于临床前和临床研究阶段。然而从已有的结果来看，CAR
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T在实体瘤中的效果明显弱于血液肿瘤，主要包括以下三个方面因素：1.实体肿瘤具有异质性，血液肿瘤通常表达单一的、肿瘤特异性/相关抗原，针对相关抗原的CAR/>‑
T可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用3D模型检测CAR
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T细胞在实体瘤中浸润的方法，其特征在于，包括以下具体步骤：1)应用肿瘤细胞和成纤维细胞在低吸附U底板内共培养，形成3D肿瘤微球，建立肿瘤微环境和物理屏障；2)通过提前对CAR
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T细胞进行无害化荧光染色，标记目标细胞，便于后续荧光观察和定量分析；3)多聚甲醛固定3D肿瘤微球，并进行透明化处理，使CAR
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T荧光可以穿透微球被精确检测到；4)使用高内涵共聚焦断层扫描方式，获得微球不同层面的CAR
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T浸润信息；5)建立对核心层面的分析方法，去除球体表面结合CAR
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T的干扰，分析内部不同范围CAR
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T荧光强度，更准确地评估肿瘤微球内部浸润CAR
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T细胞的水平。2.根据权利要求1所述的一种用3D模型检测CAR
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T细胞在实体瘤中浸润的方法，其特征在于，所述肿瘤细胞为CAR
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T的靶细胞。3.根据权利要求1或2所述的一种用3D模型检测CAR
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T细胞在实体瘤中浸润的方法，其特征在于，所述肿瘤细胞为过表达荧光蛋白或/和靶抗原或内源性表达靶抗原的细胞系。4.根据权利要求3所述的一种用3D模型检测CAR
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T细胞在实体瘤中浸润的方法，其特征在于，所述靶抗原或内源性表达靶抗原的细胞系为BxPc
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3、NCI
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N87、...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭彬彬，张瑾，张静，郑勇，顾继杰，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：