昆虫galectin在鳞翅目害虫防治中的应用制造技术

本发明专利技术属于农业病虫害防治技术领域，具体涉及昆虫galectin在鳞翅目害虫防治中的应用。为研究提高真菌杀虫剂效率的方法，本发明专利技术通过用galectin蛋白和莱氏野村菌混合物处理斜纹夜蛾幼虫发现，与只用莱氏野村菌处理斜纹夜蛾幼虫相比，联合处理斜纹夜蛾的半致死时间得到了显著的缩短，杀虫效率得到提高，说明通过将galectin蛋白和莱氏野村菌一起配合使用可以显著提高病原真菌(莱氏野村菌)的杀虫效率，加快真菌杀虫剂的杀虫作用。快真菌杀虫剂的杀虫作用。快真菌杀虫剂的杀虫作用。

【技术实现步骤摘要】
昆虫galectin在鳞翅目害虫防治中的应用


[0001]本专利技术属于农业病虫害防治
，具体涉及昆虫galectin在鳞翅目害虫防治中的应用。

技术介绍

[0002]Galectin是含有β
‑
半乳糖苷(β
‑
galactoside)结合位点的蛋白，广泛存在于动物中，参与多种生理功能，如炎症、免疫反应、细胞迁移、自噬和信号转导。在哺乳动物中，多种疾病都与galectin有关，如纤维化病变、癌症、心脏病等。但昆虫的galectin研究得很少，有研究表明昆虫的galectin可能参与对细菌的识别。然而，目前尚未有galectin在昆虫病原真菌感染中的功能研究。
[0003]斜纹夜蛾(学名：Spodoptera litura Fabricius)是鳞翅目夜蛾科的农作物害虫，取食甘薯、棉花和大豆等近300种植物的叶片，间歇性猖獗为害。目前对斜纹夜蛾的防治主要依靠化学农药，但是化学农药的大量使用导致了害虫抗药性、农药残留、环境污染等问题，严重影响着人类的健康生活和农业的可持续发展。莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)是昆虫的病原真菌，在田间常引发斜纹夜蛾、棉铃虫、大豆夜蛾等多种害虫的流行病害，尤其对夜蛾科害虫有更强的致病力。真菌杀虫剂虽然对环境友好、不容易产生抗药性，但是杀虫效果缓慢，导致其推广应用受到了制约。因此，研究提高真菌杀虫剂效率的方法具有重要的经济价值。

技术实现思路

[0004]为了克服上述现有技术的不足，本专利技术将galectin蛋白和莱氏野村菌联用，从而增强莱氏野村菌的杀虫毒力，加快其杀虫效果。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：
[0006]本专利技术提供了galectin蛋白在防治鳞翅目害虫中的应用。
[0007]本专利技术还提供了galectin蛋白在制备防治鳞翅目害虫的杀虫剂中的应用。
[0008]优选地，所述鳞翅目害虫为斜纹夜蛾。
[0009]优选地，所述galectin蛋白为斜纹夜蛾galectin
‑
12(SlGale12)蛋白，所述SlGale12蛋白NCBI的登录号为LOC111359284，具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。
[0010]本专利技术经研究发现莱氏野村菌感染斜纹夜蛾幼虫后，幼虫血淋巴中SlGale12基因的表达量显著增加，而将SlGale12蛋白和莱氏野村菌混合物处理斜纹夜蛾后，能将斜纹夜蛾的半致死时间LT50从121.636
±
1.589小时缩短到113.600
±
1.391小时，杀虫效果显著提高。说明SlGale12蛋白可以增强莱氏野村菌对斜纹夜蛾的杀虫毒力，加快其杀虫效果。
[0011]更优选地，还包括与SlGale12蛋白相关的生物材料，所述生物材料包括编码SlGale12蛋白的基因、SlGale12基因的表达盒、SlGale12基因的重组载体、SlGale12基因的重组微生物、SlGale12基因的重组细胞系，SlGale12基因具有如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列。
[0012]本专利技术还提供了一种用于防治斜纹夜蛾的杀虫剂，所述杀虫剂包括galectin蛋白和莱氏野村菌。
[0013]优选地，所述galectin蛋白为SlGale12蛋白，所述SlGale12蛋白具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。
[0014]优选地，所述莱氏野村菌为莱氏野村菌的孢子悬浮液。
[0015]本专利技术还提供了一种用于防治斜纹夜蛾的方法，即通过将galectin蛋白和莱氏野村菌联合使用，加快莱氏野村菌对斜纹夜蛾的杀虫效率。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0017]本专利技术公开了galectin在鳞翅目害虫防治中的应用，通过用galectin蛋白和莱氏野村菌混合物处理斜纹夜蛾幼虫发现，与只用莱氏野村菌处理斜纹夜蛾幼虫相比，联合处理斜纹夜蛾的半致死时间得到了显著的缩短，杀虫效率得到提高，说明通过将galectin蛋白和莱氏野村菌一起配合使用可以显著提高病原真菌(莱氏野村菌)的杀虫效率，加快真菌杀虫剂的杀虫作用。
附图说明
[0018]图1为莱氏野村菌感染后SlGale12的表达量变化情况；
[0019]图2为斜纹夜蛾SlGale12 cDNA克隆和载体构建验证结果(A为SlGale12的cDNA扩增结果；B为pET28a
‑
SlGale12质粒酶切验证结果)；
[0020]图3为原核表达SlGale12蛋白的SDS
‑
PAGE图谱；
[0021]图4为添加SlGale12蛋白对莱氏野村菌杀虫率的影响效果。
具体实施方式
[0022]下面对本专利技术的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本专利技术，但并不构成对本专利技术的限定。此外，下面所描述的本专利技术各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
[0023]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到。
[0024]实施例1莱氏野村菌感染后斜纹夜蛾SlGale12基因的表达量变化
[0025](1)实验方法
[0026]将斜纹夜蛾幼虫培养在人工气候培养箱(温度为27
±
2℃，相对湿度为50
±
10％，光周期为白天：黑夜＝13h:11h)中，每天早晚饲喂人工饲料一次，培养至5龄期。将莱氏野村菌Nr(购买自明舟生物)接种于SMAY培养基，25℃下生长10天，用0.05％ Tween20溶液收集莱氏野村菌的分生孢子。然后将莱氏野村菌(5
×
105个孢子/虫)注射到斜纹夜蛾5龄第一天幼虫中，并以注射0.05％ Tween20作为对照，24、48和72小时后收集对照组和处理组的血淋巴，每组3个重复，每个重复包括3条幼虫。抽提总RNA，并反转录获得cDNA，最后采用引物Gale12
‑
qF(CACACGCCCTATTCCTGGAG，SEQ ID NO.1)和Gale12
‑
qR(GAAGCGAGGGTTGAAGTGGA，SEQ ID NO.2)做定量PCR分析基因的表达量。具体操作参照文献“Lu Y,Su F,Zhu K,et al.Comparative genomic analysis of C
‑
type lectin
‑
domain genes in seven holometabolous insect species[J].Insect Biochemistry and Molecular Biology,
magnetic and structural transitions of the parent c本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.galectin蛋白在防治鳞翅目害虫中的应用。2.galectin蛋白在制备防治鳞翅目害虫的杀虫剂中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述鳞翅目害虫为斜纹夜蛾。4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述galectin蛋白为SlGale12蛋白，所述SlGale12蛋白具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，还包括与SlGale12蛋白相关的生物材料，所述生物材料包括编码SlGale12蛋白的基因、SlGale12基因的表达盒、SlGale12基因的重组载体、SlGale12基因的重组微生物、SlGale12基因的重...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢玉珍，余小强，钟杰来，朱启骏，肖妍虹，胡启豪，
申请(专利权)人：华南师范大学，
类型：发明
国别省市：