一种肿瘤组织消化细胞分离培养皿制造技术

本实用新型专利技术公开了一种肿瘤组织消化细胞分离培养皿。培养皿由设在基板上阵列设置上部开口且下部封闭的细胞培养腔构成。细胞培养腔的上沿设置第一过滤部件；第一过滤部件顶部开口，侧壁和底部呈倒锥台型,第一过滤部件底部及侧壁下部封闭，侧壁上部设有第一筛孔组。第一过滤部件上设置第二过滤部件，第二过滤部件顶部开口且侧壁上部封闭，第二过滤部件底部及侧壁下部设有第二筛孔组。本实用新型专利技术的细胞分离培养皿实现了一体化肿瘤组织消化及肿瘤细胞分离培养，可广泛用于所有实体肿瘤组织的细胞培养。胞培养。胞培养。

【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤组织消化细胞分离培养皿


[0001]本技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种兼具肿瘤组织消化、细胞分离及细胞培养的培养皿。

技术介绍

[0002]人体肿瘤组织是最宝贵的遗传资源之一，可广泛用于疾病诊断，原代细胞培养，科学研究，药物靶点筛查，基因测序，个性化医疗等领域。但由于将手术切除的实体肿瘤组织经过胰酶消化变成细胞的过程比较繁琐，因此操作不当很容易引起细胞污染，从而导致实验失败及宝贵的肿瘤组织浪费。为解决这一难题，本技术提供了一种可具有拆分结构腔室的一体化肿瘤组织消化及细胞分离培养装置。

技术实现思路

[0003]本技术提供了一种细胞分离培养皿，特别是一种肿瘤组织消化细胞分离培养皿。具体地，所述培养皿，包括基板、细胞培养腔和第一过滤部件；其中，所述细胞培养腔于所述基板上，且所述细胞培养腔包括开口部、腔侧壁、腔底部和由所述腔侧壁和所述腔底部构成的腔室；所述第一过滤部件呈倒锥台型套设于所述腔室内，并将所述腔室分隔为上层腔室和下层腔室，所述第一过滤部件包括顶部开口、侧壁和底部，并在所述侧壁的上部设有第一筛孔组，所述第一筛孔组设置为能够使细胞由所述上层腔室进入所述下层腔室。
[0004]本技术中，所述细胞培养腔为本领域常规的多孔细胞培养板中细胞培养孔的设置，例如12孔细胞培养板、15孔细胞培养板，24孔细胞培养板。所述细胞培养腔的直径优选地地为10～30mm，细胞培养腔的深度优选地为10～40mm。
[0005]本技术中，经破碎后的肿瘤组织置入第一过滤部件中，加入胰酶消化，得到肿瘤细胞。消化后的肿瘤细胞经冲洗通过第一筛孔组，进入细胞培养腔中进一步进行培养。
[0006]本技术所述的肿瘤组织消化细胞分离培养皿，进一步包括第二过滤部件。所述第二过滤部件可拆卸地套设于所述第一过滤部件的上方，且在所述第二过滤部件的底部及侧壁下部设有第二筛孔组。
[0007]本技术中所述第一筛孔组的下边沿高于所述第二筛孔组的上边沿，形成高度差ΔH1。
[0008]其中，第一筛孔组的筛孔孔径不小于使肿瘤细胞通过筛孔的最小尺寸。优选地，第一筛孔组的筛孔孔径为10～100μm，优选地为10～50μm，更优选15～25μm。
[0009]第一过滤部件上进一步设置第二过滤部件，第二过滤部件顶部开口且侧壁上部封闭，第二过滤部件底部及侧壁下部设有第二筛孔组。
[0010]第二过滤部件中进行肿瘤组织的剪切和破碎。肿瘤组织经破碎后，形成的组织碎片、肿瘤细胞团通过第二筛孔组的筛孔。第二筛孔组的筛孔孔径为10～1000μm，优选地为 50～500，更优选地为100～300μm。
[0011]本技术中，第一筛孔组的下边沿高于第二筛孔组的上边沿，形成高度差ΔH1，
优选地，ΔH1不小于0.3cm，更优选地，ΔH1约为1cm。
[0012]本技术中，一过滤部件与第二过滤部件的底部之间存在一定间距ΔH2，所述间距ΔH2大于第二筛孔组筛孔的孔径，优选地，所述间距ΔH2不小于0.3cm，更优选地，ΔH2约为1cm。
[0013]本技术中，所述的“约”为其目标值上下波动不大于10％，优选地，为其目标值上下波动不大于5％。
[0014]本技术中，第一筛孔组的下边沿高于第二筛孔组的上边沿的目的在于：实际消化培养过程，在第二过滤部件与第一过滤部件层叠放置的情况下在当加入缓冲液或培养基时，由上述高度差ΔH1，缓冲液或培养基的液位高于第二筛孔组的上边沿，形成对细胞培养腔的封闭。
[0015]另一方面，由上述高度差ΔH1以及ΔH2，在第二过滤部件中经剪切和破碎的肿瘤组织通过第二筛孔组的筛孔进入第一过滤部件时，能够完全由第一过滤部件下部侧壁和底部组成的腔体所容纳。
[0016]本技术中所述细胞培养腔为多个，且形成细胞培养腔阵列。
[0017]本技术中，在基板的上方设有上盖。所述上盖与基板配合，使细胞培养腔与外界隔离，防止外界对细胞培养腔污染。
[0018]本技术中，细胞培养腔优选地为上部开口的圆筒型结构。在更加优选的方案中，细胞培养腔的腔侧壁和腔底部连接处设有斜坡结构，即在细胞培养腔的腔侧壁和底部连接处设有斜坡。在另外的实施方式中，细胞培养腔的腔侧壁和底部通过圆角连接。
[0019]本技术中，为了便于将培养的肿瘤细胞输送至细胞培养腔外，在细胞培养腔的底部开口并设有流道。为了控制流道的开闭，优选地，在所述流道上设有阀。在更加优选的实施方式中，所述流道与微流控芯片的进料通道连通。
[0020]本技术实现了多孔一体化肿瘤组织消化及肿瘤细胞分离培养，可广泛用于所有实体肿瘤组织的细胞培养。
附图说明：
[0021]图1：示例性肿瘤组织消化细胞分离培养皿，其中设有15个细胞培养腔。
[0022]图2：示例性细胞培养腔的截面示意图，其中设有第一过滤部件和第二过滤部件。
[0023]图3：第一筛孔组的下边沿与第二筛孔组的上边沿位置关系示意图。
[0024]其中：1为细胞培养腔，2为细胞培养腔底部，3为第一过滤部件，4为第二过滤部件，5为细胞培养腔侧壁，6为斜坡结构，7为基板，8为上盖。
具体实施方式
[0025]下面通过具体实施方式来进一步说明本技术的技术方案。
[0026]实施例1
[0027]以聚乙烯材料制成多孔一体化肿瘤组织消化及肿瘤细胞分离培养皿。该培养皿上设置15个细胞培养腔形成的阵列。其中每个细胞培养腔为上部开口且下部封闭的结构。细胞培养腔的上沿设置第一过滤部件；第一过滤部件顶部开口，侧壁和底部呈倒锥台型, 第一过滤部件底部及侧壁下部封闭，侧壁上部设有第一筛孔组。第一筛孔组的筛孔孔径为20μ
m。细胞培养腔的腔侧壁和底部连接处设有斜坡结构。
[0028]将手术切除的人体肿瘤样本置入第一过滤部件中，通过弯剪将肿瘤组织剪碎；用适量缓冲液冲洗组织碎片，加入胰酶，37℃消化3小时，消化完毕后，用缓冲液冲洗，并添加培养基，必要时在添加培养基之前进一步用胰酶消化，使消化后的单个细胞通过第一筛孔组的筛孔进入培养腔中。
[0029]实施例2
[0030]以聚乙烯材料制成多孔一体化肿瘤组织消化及肿瘤细胞分离培养皿。该培养皿上设置15个细胞培养腔形成的阵列。其中每个细胞培养腔为上部开口且下部封闭的结构。细胞培养腔的上沿设置第一过滤部件；第一过滤部件顶部开口，侧壁和底部呈倒锥台型, 第一过滤部件底部及侧壁下部封闭，侧壁上部设有第一筛孔组。第一过滤部件上设置第二过滤部件，第二过滤部件顶部开口且侧壁上部封闭，第二过滤部件底部及侧壁下部设有第二筛孔组。第一筛孔组的下边沿高于第二筛孔组的上边沿。第一筛孔组的筛孔孔径为10～20μm，第二筛孔组的筛孔孔径为40～50μm。第一过滤部件与第二过滤部件之间间距为1cm。细胞培养腔的腔侧壁和底部连接处设有斜坡结构。
[0031]将手术切除的人体肿瘤样本置入第二过滤部件中，通过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤组织消化细胞分离培养皿，其特征在于，包括基板(7)、细胞培养腔(1)和第一过滤部件(3)；其中，所述细胞培养腔(1)设置于所述基板上，且所述细胞培养腔(1)包括开口部、腔侧壁(5)、腔底部(2)和由所述腔侧壁(5)和所述腔底部(2)构成的腔室；所述第一过滤部件(3)呈倒锥台型套设于所述腔室内，并将所述腔室分隔为上层腔室和下层腔室，所述第一过滤部件(3)包括顶部开口、侧壁和底部，并在所述侧壁的上部设有第一筛孔组，所述第一筛孔组设置为能够使细胞由所述上层腔室进入所述下层腔室。2.根据权利要求1所述的肿瘤组织消化细胞分离培养皿，其特征在于，进一步包括第二过滤部件(4)，所述第二过滤部件(4)可拆卸地套设于所述第一过滤部件(3)的上方，且在所述第二过滤部件(4)的底部及侧壁下部设有第二筛孔组。3.根据权利要求2所述的肿瘤组织消化细胞分离培养皿，其中，所述第一筛孔组的下边沿高于所述第二筛孔组的上边沿形成高度差ΔH1。4.根据权利要求3所述的肿瘤组织消化细胞分离培养皿，其中，所述ΔH1不小于0.3cm。5.根据权利要求1所述的肿瘤组织消化细胞分离培养皿，其中，第一筛孔组的筛孔孔...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄杰，华权高，王子峰，
申请(专利权)人：浙江生研生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：