【技术实现步骤摘要】
角膜接触镜泪蛋白含量测量方法及其应用
[0001]本专利技术涉及生物蛋白检测领域，尤其涉及一种角膜接触镜泪蛋白含量测量方法及其应用。
技术介绍
[0002]角膜接触镜如何除蛋白的问题困扰了行业半个多世纪，引发了各国的眼视光行业对接触镜佩戴安全的高度重视。我国也因角膜接触镜上的角膜感染案例频发，从而将接触镜在2012年便列入第三类医疗器械类，作为高风险管理，其原因在于：接触镜材质结构有大量肉眼不见的纤维透氧孔，人眼时刻分泌大量的泪液，泪液里含有大量泪蛋白，泪蛋白极易渗透到纤维透氧孔中，造成镜片DK值降低(透氧率)，造成角膜缺氧、水肿等症状，严重的会造成角膜受损，细菌感染，角膜炎症甚至是视力受损等问题。
[0003]为了有效清除接触镜表面的泪蛋白，保障消费者的眼部安全，市场也推出了多种用于去除角膜接触镜表面泪蛋白的方法。但由于肉眼不可见泪蛋白是否被完全有效的洗脱降解，逐渐的蛋白检测方法就被重视发展起来，以使得通过科学检测有效验证蛋白是否被完全降解。但是现阶段市场上的角膜接触镜有效除蛋白的检测方法因角膜接触镜内部纵横交错的...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种有效测量角膜接触镜泪蛋白含量的方法，其特征在于，所述方法通过微量紫外分光光度计检测角膜接触镜蛋白提取溶液中的蛋白浓度，具体包括：提供蛋白提取溶液，所述蛋白提取溶液包括8M盐酸胍水溶液；将表面吸附有蛋白的角膜接触镜放置在所述蛋白提取溶液中，所述蛋白提取溶液将所述蛋白自所述角膜接触镜上分离，自所述蛋白提取溶液中取出所述角膜接触镜，通过所述微量紫外分光光度计检测所述蛋白提取溶液中的蛋白浓度，得到镜片吸附蛋白浓度值，通过所述镜片吸附蛋白浓度值和蛋白提取液体积计算得到镜片吸附蛋白含量值。2.根据权利要求1所述的有效测量角膜接触镜泪蛋白含量的方法，其特征在于，所述方法还包括：制备所述表面吸附有蛋白的角膜接触镜：将待培养的角膜接触镜和蛋白培养液置于培养皿中密封培养，镜片培养过程中，所述蛋白培养液中的一部分蛋白游离在所述蛋白培养液中，一部分蛋白沉淀在所述角膜接触镜上，剩余部分蛋白沉淀在所述培养皿内壁上；于内壁上沉淀有蛋白的所述培养皿中加入乙腈三氟乙酸溶液，振荡、静置预定时长，使得所述培养皿内壁上的蛋白脱落并溶于所述乙腈三氟乙酸溶液中，通过所述微量紫外分光光度计检测所述乙腈三氟乙酸溶液中的蛋白浓度，将所述蛋白浓度与所述乙腈三氟乙酸溶液的体积相乘，得到沉淀在所述培养皿内壁上的蛋白含量。3.根据权利要求1或2所述的有效测量角膜接触镜泪蛋白含量的方法，其特征在于，其还包括：制备所述表面吸附有蛋白的角膜接触镜，具体包括：配置蛋白培养液，记录蛋白培养液的原始蛋白浓度，将所述角膜接触镜置于所述蛋白培养液中培养48～72小时，获得表面吸附有蛋白的角膜接触镜；其中，配置所述蛋白培养液包括根据所述蛋白培养液中的蛋白的等电点调节所述蛋白培养液的PH值；所述角膜接触镜于所述蛋白培养液中的培养温度范围为36℃～42℃；将所述角膜接触镜的内凹面朝上置于所述蛋白培养液中。4.根据权利要求3所述的有效测量角膜接触镜泪蛋白含量的方法，其特征在于，将待培养的角膜接触镜和所述蛋白培养液加入培养皿中，37℃恒温密封培养48小时，获得表面吸附有蛋白的角膜接触镜；分别检测游离在所述蛋白培养液中的蛋白含量、沉淀在所述角膜接触镜上的蛋白含量，以及沉淀在所述培养皿内壁上的蛋白含量，计算获得所述方法对蛋白的提取率。5.根据权利要求4所述的有效测量角膜接触镜泪蛋白含量的方法，其特征在于，检测游离在所述蛋白培养液中的蛋白含量，具体包括:通过所述微量紫外分光光度计检测游离在所述蛋白培养液中的蛋白浓度，再将所述蛋白浓度与所述蛋白培养液的体积相乘，获得游离在所述蛋白培养液中的蛋白含量，记为培养后剩余培养液中蛋白含量；检测沉淀在所述角膜接触镜上的蛋白含量，具体包括：将培养后的所述角膜接触镜置于8M盐酸胍水溶液中振荡、静置预定时长，使得所述角膜接触镜上的蛋白自镜片上脱离并溶解于所述8M盐酸胍水溶液中，通过所述微量紫外分光
光度计检测所述8M盐酸胍水溶液中的蛋白浓度，将所述蛋白浓度与所述8M盐酸胍水溶液的体积相乘，得到沉淀在所述角膜接触镜上的蛋白含量，记为镜片蛋白提取液中蛋白含量；检测沉淀在所述培养皿内壁上的蛋白含量，具体包括：于内壁上沉...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁梦瑶，孙碧霞，
申请(专利权)人：苏州三个臭皮匠生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。