胎盘间充质干细胞来源的胞外囊泡、制剂及其在制备抗卵巢早衰相关药物制剂中的应用制造技术

技术编号:36937710 阅读:24 留言:0更新日期:2023-03-22 18:59
本申请公开了胎盘间充质干细胞来源的胞外囊泡、制剂及其在制备抗卵巢早衰相关药物制剂中的应用。该胞外囊泡,以WesternBlot方法检测结果计,高表达CD63、CD81、CD44、CD29、CD105、VEGF和HGF蛋白;以RT

【技术实现步骤摘要】
胎盘间充质干细胞来源的胞外囊泡、制剂及其在制备抗卵巢早衰相关药物制剂中的应用


[0001]本申请涉及胞外囊泡
,尤其涉及胎盘间充质干细胞来源的胞外囊泡、制剂及其在制备抗卵巢早衰相关药物制剂中的应用。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新和多向分化潜能的多能十细胞,因其独特的分化潜能、造血支持和免疫调控等特性,MSC已作为一种细胞治疗手段被广泛的应用于多种疾病。胞外囊泡(EVs)由细胞主动释放到细胞外环境中的纳米级膜性囊泡,EVs富含脂类、胞浆蛋白、核酸等物质,且其蛋白组成在一定程度上可以指示生物来源和分类。EVs已被证实广泛应用于药物载体、组织修复以及神经再生等领域。2009年BRUNO等通过复制甘油诱导的小鼠急性肾衰竭模型证实了MSC

EVs在急性肾损伤中的治疗潜力。此后MSC

EVs便被广泛的应用于多种组织损伤动物模型中。
[0003]然而,对于不同来源的MSCs的胞外囊泡分泌的调控,现有技术研究有限,尤其是对胞外囊泡发挥功能作用的蛋白大分子或小分子表达进行调本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.胎盘间充质干细胞的胞外囊泡,以WesternBlot方法检测结果计,所述胞外囊泡高表达CD63、CD81、CD44、CD29、CD105、VEGF和HGF蛋白;以RT

PCR检测计,所述胞外囊泡还高表达let

7d、let

7e和let

7g三种miRNA。2.根据权利要求1所述的胞外囊泡,其特征在于,其平均径为264.3~389.0nm,PDI值为0.075~0.150。3.权利要求1或2所述的胞外囊泡的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:获得分离的原代胎盘间充质干细胞;将所述原代胎盘间充质干细胞进行传代培养,得到第2代胎盘间充质干细胞;将所述第2代胎盘间充质干细胞进行依次传代培养,得到其第5代或第6代的胎盘间充质干细胞培养物;收集所述第5代或第6代的胎盘间充质干细胞培养物,分离纯化以得到所述胞外囊泡;其中,传代培养过程中使得了包含雌二醇苯甲酸酯、霉酚酸酯和10

O

(2

L

甘氨酰)

银杏内醋B盐酸盐中的至少一种添加物的DMEM/F12培养液进行培养。4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,其中传代培养为将所述第2代胎盘间充质干细胞培养物作为种子依次进行传代,传代培养中使用了的培养基包括第3代培养液、第4代培养液和第5代培养液;所述第3代培养液为包含0.1~0.25μM雌二醇苯甲酸酯的DMEM/F12培养液;所述第4代培养液为包含0.15~0.35μM雌二醇苯甲酸酯和0.5~2μM霉酚酸酯的DMEM/F12培养液;所述第5代培养液为包含0.15~0.3μM雌二醇苯甲酸酯、4.0~7.5μM霉酚酸酯和10~15μg/mL10

O

(2

L

甘氨酰)

【专利技术属性】
技术研发人员:朱源源
申请(专利权)人:上海圣石生物医学科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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