具有主动补偿的电穿孔制造技术

披露了一种用负载物电穿孔细胞的装置，该装置包括：电极，这些电极为包括这些细胞和该负载物的流体流动限定路径；电源，该电源跨这些电极耦合；以及控制电路。在一些示例中，该控制电路被配置成：检测由于这些电极之间的电阻增大导致的所产生电流的减小；以及控制该电源以增大该所产生电流，从而维持这些电极之间的电场。可以基于这些电极之间的电阻的先前值来预测该电阻的未来值。在其他示例中，该控制电路被配置成：检测在这些电极之间流动的流体的参数；以及响应于检测到这些参数，控制该电源以生成或停止生成电脉冲。还披露了用负载物电穿孔细胞的其他示例装置和方法。穿孔细胞的其他示例装置和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有主动补偿的电穿孔
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据35U.S.C.
§
120要求于2020年7月22日提交的美国专利申请序列号16/935,987的优先权，该美国专利申请的全部内容通过援引并入本文。


[0003]本披露内容涉及具有主动补偿的电穿孔。

技术介绍

[0004]本节提供与本披露内容相关的背景信息，该信息不一定是现有技术。
[0005]转染通常用于将核酸引入细胞以产生基因修饰的细胞。存在用于转染细胞的多种物理、化学和病毒方法，包括光电穿孔、利用磷酸钙的基于聚合物的方法、显微注射、电穿孔、病毒转导和脂质介导的方法(例如，使用脂质体
‑
DNA复合物)。当使用电穿孔来转染细胞时，将受控制的直流(DC)电脉冲施加到细胞以产生跨膜电位。这个跨膜电位引起细胞膜的有序结构的可逆破坏，从而导致在膜中形成孔。然后，感兴趣的分子可以通过孔进入细胞。可以通过调整各种参数来控制孔形成，这些参数包括在电穿孔过程中使用的平行电极之间的距离、电脉冲的特性、跨电极的电场强度等。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用负载物电穿孔细胞的装置，该装置包括：两个电极，该两个电极彼此间隔开并且为包括这些细胞和该负载物的流体在其间流动限定路径，当流体流动经过该路径时，这些电极之间具有电阻；DC电源，该DC电源跨这些电极耦合；以及控制电路，该控制电路被配置成：控制该DC电源以一定电压向这些电极提供多个电脉冲，以产生经过这些电极的电流，从而在这些电极之间以定义值生成电场；检测由于这些电极之间的电阻增大导致的所产生电流的减小；在一段时间内确定这些电极之间的电阻的多个值；基于该电阻的所确定的多个值来预测这些电极之间的电阻的未来值；以及基于该电阻的未来值控制该DC电源以增大该所产生电流，从而将这些电极之间的电场维持在该定义值。2.如权利要求1所述的装置，其中，该电阻的所确定的多个值包括第一值和第二值，并且其中，该控制电路被配置成在至少该电阻的第一值与该电阻的第二值之间应用线性投影，以及基于该线性投影来预测这些电极之间的电阻的未来值。3.如权利要求2所述的装置，其中，该控制电路被配置成基于定义数量的电脉冲的数据长度来应用该线性投影。4.如权利要求2所述的装置，其中，该控制电路被配置成当该所产生电流处于定义值时确定该电阻的第一值。5.如权利要求4所述的装置，其中，该所产生电流的定义值是该所产生电流的峰值。6.如权利要求1所述的装置，其中，该控制电路被配置成控制该DC电源以将该所产生电流增大至定义值。7.如权利要求6所述的装置，其中，该所产生电流的定义值是该所产生电流的峰值。8.如权利要求1所述的装置，其中，该控制电路被配置成控制该DC电源以增大该多个电脉冲的电压，从而增大该所产生电流。9.如前述权利要求中任一项所述的装置，其中，该控制电路包括比例积分微分控制器、比例积分控制器、比例微分控制器和比例控制器中的至少一个控制器。10.如权利要求9所述的装置，其中，该比例积分微分控制器、该比例积分控制器、该比例微分控制器和/或该比例控制器中的该至少一个控制器的增益因子是固定的或可变的。11.如前述权利要求中任一项所述的装置，其中，该控制电路被配置成：检测与该流体相关联的参数；以及响应于检测到与该流体相关联的该参数，控制该DC电源以生成该多个电脉冲。12.如权利要求11所述的装置，其中，与该流体相关联的该参数是第一参数，并且其中，该控制电路被配置成：检测与该流体相关联的第二参数；以及响应于检测到与该流体相关联的该第二参数，控制该DC电源以停止生成该多个电脉冲。13.一种用负载物电穿孔细胞的装置，该装置包括：两个电极，该两个电极彼此间隔开并且为包括这些细胞和该负载物的流体在其间流动限定路径；DC电源，该DC电源跨这些电极耦合以提供多个电脉冲，以产生经过这些电极的电流，从而在这些电极之间生成电场；以及控制电路，该控制电路被配置成检测与该流体相关联的第一参数；响应于检测到与该
流体相关联的该第一参数，控制该DC电源以生成该多个电脉冲；检测与该流体相关联的第二参数；以及响应于检测到与该流体相关联的该第二参数，控制该DC电源以停止生成该多个电脉冲。14.如权利要求13所述的装置，其中，与该流体相关联的该第一参数包括流体的存在，和/或其中，与该流体相关联的该第二参数包括流体的不存在。15.如权利要求14所述的装置，进一步包括耦合到该控制电路的第一传感器和第二传感器，该第一传感器与该路径流体连通以检测该流体的存在，并且该第二传感器与该路径流体连通以检测该流体的不存在。16.如权利要求15所述的装置，其中，该第一传感器和/或该第二传感器包括光传感器或被配置成感测与该流体相关联的电参数的传感器。17.如权利要求13所述的装置，其中，与该流体相关联的该第二参数包括流体的存在，其中，该装置进一步包括与该路径流体连通的阀、以及与该路径流体连通并且定位在该阀的出口侧以检测该流体的存在的传感器，并且其中，该控制电路被配置成响应于该阀检测到该流体的存在，控制该DC电源以停止生成该多个电脉冲。18.一种用负载物电穿孔细胞的装置，该装置包括：两个电极，该两个电极彼此间隔开...

【专利技术属性】
技术研发人员：张志玮，J，
申请(专利权)人：南特细胞公司，
类型：发明
国别省市：