一种基于金纳米粒子聚集检测目标HPV基因的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于金纳米粒子聚集检测目标HPV基因的方法，包括制备金纳米粒子溶液、制备亲和素溶液，取5μL目标HPV的DNA杂化反应溶液或目标HPV基因的PCR反应溶液，加入到60μL金纳米粒子溶液中混合；再向混合液中添加5μL亲和素溶液，并在25℃下反应20分钟后，依据金纳米粒子溶液颜色变化直接判断是否含有目标HPV基因。与现有技术相比，本发明专利技术以亲和素首次被用作聚集剂引发金纳米粒子聚集，通过肉眼观察颜色变化即可检测出HPV基因，避免了使用大量盐类物质达到使金纳米粒子聚集的目的；与其他方法相比，此检测方法具有相对灵敏(足以检测PCR产品)、操作简单、检测快(整个检测过程不超过两小时包括样品制备)、经济实惠(不需昂贵检测仪器)等优点。(不需昂贵检测仪器)等优点。(不需昂贵检测仪器)等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种基于金纳米粒子聚集检测目标HPV基因的方法


[0001]本专利技术涉及分子生物学和核酸化学领域，特别是一种基于金纳米粒子聚集检测目标HPV基因的方法。

技术介绍

[0002]一般来讲，检测病毒基因的方法主要有两种，一种是直接检测方法，比如Hybrid Capture 2体系，以抗体捕获、核酸杂交和化学发光信号放大技术为基础的第二代杂交捕获(HC2)法。另一种是以PCR为基础的检测方法，由于HPV各型之间的基因存在较大的变异，多数采用位于HPV基因组相对保守的L1片断的简并引物扩增后，PCR产物经过电泳、杂交等检测方法确定HPV的存在和感染HPV的型别。目前常用的简并引物包括GP5+/6+、MY11/09、SPF10、PG2MY09/11、PGMY等，采用上述简并引物结合反向线形杂交进行HPV分型检测。
[0003]随着对HPV基因检测方法的不断探索，提供灵敏度和易用性的替代方法已被广泛研究。主要是对传统方法进行改进，便携式方法的研发，以及开发比色、荧光、有或无磁分离的电化学生物传感器等。其中，现有的HPV DNA特异性纳米生物传感器本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于金纳米粒子聚集检测目标HPV基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备金纳米粒子溶液：取粒径为5
‑
20nm的金纳米粒子均匀分散到水中制得浓度为1
×
10
‑
9mol/L的金纳米粒子溶液；S2、制备亲和素溶液：取亲和素溶于PBS缓冲溶液中制得浓度为50
‑
100μg/mL的亲和素溶液；S3、取5μL目标HPV基因的PCR反应溶液，加入到60μL金纳米粒子溶液中混合；再向混合液中添...

【专利技术属性】
技术研发人员：朴晶玉，车明洙，金艳花，
申请(专利权)人：延边大学，
类型：发明
国别省市：