蛋白磁珠包被物及其制备方法、应用和目标抗体检测方法技术

本发明专利技术提供了一种蛋白磁珠包被物，包括：磁性基球单元；蛋白质或多肽单元；聚乙二醇链，所述聚乙二醇链的一侧末端通过硫醚键与所述磁性基球单元连接，另一侧末端通过碳氮双键与所述蛋白质或多肽单元的末端连接。该蛋白磁珠包被物中由于聚乙二醇链远离蛋白质或多肽单元的活性位点，在对蛋白质或多肽单元对应的抗体或抗原进行检测时，可避免由于出现由于蛋白质或多肽单元的活性位点被遮盖而导致的检出率下降问题，提高检出率；同时由于聚乙二醇链具有亲和性和亲水性，以及良好的安全性和生物相容性，可提高蛋白质或多肽单元的结构稳定性，避免蛋白质或多肽单元在偶联过程中发生构象变化。象变化。

【技术实现步骤摘要】
蛋白磁珠包被物及其制备方法、应用和目标抗体检测方法


[0001]本专利技术涉及
，特别是涉及一种蛋白磁珠包被物及其制备方法、应用和目标抗体检测方法。

技术介绍

[0002]化学发光平台的免疫检测和免疫诊断所使用的方法是使抗原或抗体通过物理吸附或者化学交联的方式结合到纳米磁珠表面，并保持其免疫学活性。在测定时受检标本按不同的步骤与磁珠表面的抗原或者抗体进行免疫反应，再与标记了示踪物的抗原或抗体形成复合物，根据发光进行定量或者定性研究。
[0003]在生物医药中，聚乙二醇(PEG)因具有亲和性和亲水性，以及良好的安全性和生物相容性，故而广泛的被应用与蛋白质或者多肽共价偶联来改变其生物化学特性。但是，进行检测时存在阳性信号值受到抑制，信噪比和检出率不能满足性能需求的问题。

技术实现思路

[0004]基于此，有必要提供一种能够提高检测时的信噪比和检出率的蛋白磁珠包被物及其制备方法、应用和目标抗体检测方法。
[0005]本专利技术的第一方面提供了一种蛋白磁珠包被物，包括：
[0006]磁性基球单元；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白磁珠包被物，其特征在于，包括：磁性基球单元；蛋白质或多肽单元；聚乙二醇链，所述聚乙二醇链的一侧末端通过硫醚键与所述磁性基球单元连接，另一侧末端通过碳氮双键与所述蛋白质或多肽单元的末端连接。2.如权利要求1所述的蛋白磁珠包被物，其特征在于，所述聚乙二醇链含有的碳原子的个数为偶数；可选地，所述聚乙二醇含有的碳原子的个数为2～24。3.如权利要求1～2中任一项所述的蛋白磁珠包被物，其特征在于，所述蛋白磁珠包被物的制备原料包括表面连接有氨基的磁性基球、末端连接有α氨基的蛋白质或多肽以及两侧末端分别连接有巯基和醛基的聚乙二醇醛；其中，所述硫醚键由所述聚乙二醇醛一侧末端连接的巯基与所述磁性基球表面连接的氨基反应生成；所述碳氮双键由所述聚乙二醇醛另一侧末端连接的醛基与所述蛋白质或多肽末端连接的α氨基反应生成。4.如权利要求3所述的蛋白磁珠包被物，其特征在于，所述蛋白质或多肽包括gp210抗原、sp100抗原、甲状腺球蛋白和组蛋白中的一种或多种。5.一种如权利要求1～4中任一项所述的蛋白磁珠包被物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将两侧末端分别连接有巯基和醛基的聚乙二醇醛与末端连接有α氨基的蛋白质或多肽在还原剂的作用下发生第一反应，制备中间体；将所述中间体与表面连接有氨基的磁性基球在交联剂的作用下发生第二反应，制备所述蛋白磁珠包被物。6.如权利要求5所述的蛋白磁珠包被物的制备方法，其特征在于，制备所述中间体时包括如下条件中的至少一项：(1)所述蛋白质或多肽、所述聚乙二醇醛及所述还原剂的摩尔比为1:(5～40):200；(2)所述还原剂包括硼氢化钠、醋酸硼氢化钠和氰基硼氢化钠中的一种或多种；(3)所述第一反应采用的用于溶解所述聚乙二醇醛的溶剂包括水、N,N
‑
二甲基甲酰胺和二甲亚砜中的一种或多种；(4)所述第一反应的反应pH值为4～5；(5)所述第一反应的反应温度为4℃，反应时间为16～18h；或所述第一反应的反应温度为25℃，反应时间为6～8h；进行第二反应时包括如下条件中的至少一项：(1)所述交联剂包括4
‑
(N
‑
马来酰亚胺基甲基)环己烷
‑1‑
羧酸琥珀酰亚胺酯和4
‑
(N
‑
马来酰亚胺甲基)环己烷
‑1‑
羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐中的一种或多种；(2)所述磁性基球与所述交联剂的质量比为1:(0.05～0.2)；...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐敬敬，祝亮，王刚，陈永堂，钱纯亘，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：