一种检测肺炎支原体毒素的引物组、试剂盒及其方法技术

本发明专利技术提供了一种快速检测肺炎支原体毒素的引物组、试剂盒和方法，属于体外诊断技术领域。本发明专利技术检测肺炎支原体毒素的引物组可精准的扩增出目的基因片段，特异性强，经该引物组结合检测方法最低检测浓度为0.4986pg/μL，灵敏度高；与荧光定量PCR检测方法相比，操作简便快捷。便快捷。便快捷。

【技术实现步骤摘要】
24μg、10mmol/L的dNTPs 3.5μL，由蒸馏水补加至总反应体系为25μL。
[0014]优选的，所述引物组包括5pmol外引物F30.1μL、5pmol外引物B3 0.1μL，40pmol内引物FIP 0.4μL、40pmol内引物BIP0.4μL，20pmol环引物LF0.8μL、20pmol环引物LB 0.8μL。
[0015]优选的，所述混合反应条件为60～70℃反应30～70cycles，0.5～2min/cycle。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0017]本专利技术检测肺炎支原体毒素的引物组，可精准的扩增出目的基因片段，不受肺炎克雷伯菌、感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、肺炎链球菌、产酸克雷伯菌等相似菌的影响，具有较强的特异性。
[0018]本专利技术检测肺炎支原体毒素的试剂盒，除包含所述引物组，还包括Bst DNA聚合酶、Tris
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HCl缓冲液、KCl、(NH4)2SO4、Tween
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20、甜菜碱、MgSO4、dNTPs、去离子水，多重试剂协同作用，使得其检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测肺炎支原体毒素的引物组，其特征在于，所述引物组包括：外引物F3、B3，内引物FIP、BIP和环引物LF、LB；所述外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；所述环引物LF的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。2.一种检测肺炎支原体毒素的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的引物组。3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述引物组中外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF以及环引物LB的摩尔比为(1～3)：(1～3)：(5～10)：(5～10)：(3～6)：(3～6)。4.如权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，还包括Bst DNA聚合酶、Tris
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HCl缓冲液、KCl、(NH4)2SO4、Tween
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20、甜菜碱、MgSO4、dNTPs。5.一种非诊断目的的检测肺炎支原体的检测方法，其特征在于，利用如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：苑鑫，刘威，王福生，方云，牛文凯，邹大阳，秦艳红，杨宁，张丽冰，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第五医学中心，
类型：发明
国别省市：