质谱定量检测多肽产品中酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列制造技术

本发明专利技术公开了质谱定量检测多肽产品中酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列，属于检验检测技术领域。由于酪蛋白糖巨肽具有多种可能的糖基化修饰，故对其质谱定量难度较大。本发明专利技术对样品脱脂、沉淀蛋白后，通过酶切酪蛋白糖巨肽得到不含糖基化修饰位点的标准特征多肽序列，以精准的质量数避免了糖基化对于酪蛋白糖巨肽定量的影响。本发明专利技术筛选得到三条用于定量检测酪蛋白糖巨肽的多肽，氨基酸序列分别如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3所示，其中，目标肽段3表现出更高的特异性，更适合用于定量分析待测样本中酪蛋白糖巨肽的含量。本发明专利技术实现了酪蛋白糖巨肽的精准定量分析，可用于确定产品中酪蛋白糖巨肽的含量是否达标。产品中酪蛋白糖巨肽的含量是否达标。产品中酪蛋白糖巨肽的含量是否达标。

【技术实现步骤摘要】
质谱定量检测多肽产品中酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列


[0001]本专利技术涉及质谱定量检测多肽产品中酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列，具体涉及酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列，利用此多肽序列结合质谱可定量检测样品中的酪蛋白糖巨肽，属于检验检测


技术介绍

[0002]酪蛋白糖巨肽是由κ
‑
酪蛋白酶解得到的一种糖基化多肽，不含苯丙氨酸，其糖基含有丰富的唾液酸，具有抗菌消炎、抑菌解毒、促进婴幼儿大脑发育的功效，因此是一种理想的苯丙酮尿症人群的特殊医学用途配方食品和婴幼儿配方奶粉的食品成分。对该类产品中酪蛋白糖巨肽的定性鉴定和定量分析可以确定商家是否存在以次充好的行为及酪蛋白糖巨肽食品质量是否达标。
[0003]酪蛋白糖巨肽的氨基酸序列是从κ
‑
酪蛋白106位的甲硫氨酸到169位的缬氨酸组成的64个氨基酸，氨基酸序列有11种变异型。自然界中A型酪蛋白糖巨肽占据主导地位，其中121、131、133、136、142位的Thr是可能的糖基化位点，均为乙酰氨基半乳糖类氧糖苷键，糖基后端主要有半乳糖、唾液酸两种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测酪蛋白糖巨肽的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ IDNo.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3任一所示。2.一种检测酪蛋白糖巨肽的方法，其特征在于，所述方法为利用质谱技术检测权利要求1所述多肽。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法为以权利要求1所述多肽的671.0/455.1(5
‰
)离子对应的MRM质谱峰用于检测酪蛋白糖巨肽。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述质谱的流动相条件为：初始流动相A所占比例100％，40～45 min流动相A所占比例70％，流动相B所占比例30％；45～50 min流动相A所占比例20％，流动相B所占比例80％；50～55 min流动相B所占比例100％，55 min流动相A所占比例100％；流动相A为100％0.1甲酸，流动相B为乙腈。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述流动相流速设置为0.1～0.5 mLmin
‑1，所述质谱的检测条件为：正离子模式，扫描模式：MRM，去簇电压：30～40 V，入口电压：8～15 V，离子源电压：4000～5000 V，离子源温度：55...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯永巍，张毅，鲁晨辉，魏皓东，王文龙，严秀平，崔静，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：