促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基及方法技术

技术编号:36833187 阅读:33 留言:0更新日期:2023-03-12 01:57
本发明专利技术提供了一种促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基及方法,该方法通过电转的导入形式将含有重编程因子的质粒导入体细胞后,接着在培养基中分阶段添加化学小分子TTNPB、2

【技术实现步骤摘要】
促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基及方法


[0001]本专利技术涉及诱导多能性干细胞
,尤其是涉及一种促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基及方法。

技术介绍

[0002]随着近20年来干细胞生物学的快速发展,各种类型的体细胞均可通过重编程技术实现细胞命运重塑,从而形成具备无限增殖能力、多向分化潜力的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)。不同体细胞类型中,尿液细胞与外周血细胞兼具了易获取、无年龄限制、低伦理约束的特点,尤其适合作为重编程的种子细胞,服务于未来精准医疗的广泛需求。
[0003]根据文献报道,尿细胞重编程体系的诱导方法来源于裴端卿课题组和Miguel A. Esteban课题组建立的重编程方案(Zhou T, Benda C, Duzinger S, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from urine[J]. Journal of the American Society of Nephr本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:1)通过电转方法将含有重编程因子的质粒导入体细胞中;2)使用含有添加剂TTNPB、2

PCPA、RepSox的培养基中培养7

8天;3)使用含有添加剂TTNPB、2

PCPA、UNC0379的培养基中继续培养6

7天。2.根据权利要求1所述的促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的方法,其特征在于:TTNPB的浓度为0.5

5μM,2

PCPA的浓度为10

20μM,RepSox的浓度为0.5

5μM,UNC0379的浓度为1

5μM。3.根据权利要求1所述的促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的方法,其特征在于:步骤2)的培养基包括基础培养基和添加剂,基础培养基为含有1%GlutaMax、1%NEAA、10%FBS的DMEM

F12,添加剂还包括1

5μM的CHIR99021、0.5

3μM的PFT

α、5

15μM的Y

27632、100

500μM的NaB。4.根据权利要求1所述的促进体细胞重编程为诱导多能干细胞的方法,其特征在于:步骤3)的培养基包括基础培养基和添加剂,基础培养基为mTeSR1,添加剂还包括1...

【专利技术属性】
技术研发人员:葛啸虎杨一行吴迪
申请(专利权)人:淇嘉科技天津有限公司
类型:发明
国别省市:

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