一种基于声波促进药物进入细胞核的方法技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，提供了一种基于声波促进药物进入细胞核的方法，本发明专利技术先施用药物，然后利用超声波，促进药物更多地进入细胞核，使得药物进入细胞核的量明显增加，从而使药物在核内的滞留时间延长，可以充分地发挥药物的作用效果，避免药物被排出胞外，造成药物的利用率下降和浪费；相对于靶向配体来说，声波作为一种物理手段，具有成本低、时间可控、非侵入性、创伤性小、安全可靠、操作简便、可对体内深部肿瘤细胞核起作用的优势；利用多柔比星作为药物，结合超声波，不仅可促进多柔比星更多地进入细胞核，而且经过声波的激发后还可以产生活性氧簇，两种效果同时作用，获得了比游离多柔比星更强的效果。比游离多柔比星更强的效果。

【技术实现步骤摘要】
一种基于声波促进药物进入细胞核的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，更具体地，涉及一种基于声波促进药物进入细胞核的方法。

技术介绍

[0002]化疗是当前治疗癌症的重要手段之一，而多柔比星(DOX)便是一种临床常用的抗肿瘤药物，对乳腺癌、肉瘤、肺癌等多种肿瘤细胞都有杀伤作用，其主要抗癌机制是多柔比星可以抑制细胞的拓扑异构酶Ⅱ，破坏DNA的三级结构，从而杀灭肿瘤。但是，耐药性肿瘤细胞具有多种保护机制来抵抗药物的杀伤，如脑胶质瘤(U87)，在细胞质中的多柔比星还没来得及进入细胞核破坏DNA，大部分多柔比星便被排出胞外，使得其疗效难以充分发挥。
[0003]为了更好地使药物靶向到达细胞核内，研究人员发现了一些靶向细胞核的配体，如核定位信号(Nuclear Localization Signal，NLS)等，能够增强药物进入细胞核的能力，其优势在于核定位信号是细胞内源性的物质，其生物相容性比较高，不容易引起机体免疫反应。但是目前这种通过核定位信号等方式促进药物进入细胞核的方法尽管具有促进药物进入细胞核的效果，但核定位序列与药物载体的连接方式、核定位序列的最适含量等都需要经过长时间的探索，这意味着制备工艺的复杂性和成本也随之相应提高。
[0004]因此，亟需开发一种成本低、能够简便地促进药物进入细胞核的方法，避免药物被排出胞外。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种基于声波促进药物进入细胞核的方法，药物在超声波的作用下，可提高其进入细胞核的量，实现细胞核靶向，避免药物被排出胞外，操作简便。
[0006]本专利技术的第一方面提供一种基于声波促进药物进入细胞核的方法。
[0007]具体地，一种基于声波促进药物进入细胞核的方法，先施用所述药物，再施加声波作用，所述声波为超声波。
[0008]本专利技术先施用药物，然后在超声波的作用下，能够促进药物进入细胞核，使得药物进入细胞核的量明显增加，本专利技术提供的方法的直接目的并非获得疾病诊断结果或直接治疗患者，让患者康复，而是使药物在核内的滞留时间延长，可以充分地发挥药物的作用效果，避免药物被排出胞外，造成药物的利用率下降。
[0009]优选地，所述药物为多柔比星。
[0010]优选地，所述超声波的频率为0.1
‑
3MHz。
[0011]更优选地，所述超声波的频率为1
‑
3MHz。
[0012]优选地，所述超声波的功率1
‑
5W/cm2。
[0013]更优选地，所述超声波的功率1.5
‑
5W/cm2。
[0014]优选地，所述超声波的占空比为40
‑
60％。
[0015]更优选地，所述超声波的占空比为50％。
[0016]优选地，所述声波作用的时间为1
‑
5分钟。
[0017]更优选地，所述声波作用的时间为3分钟。
[0018]优选地，所述细胞核为肿瘤细胞核。
[0019]更优选地，所述肿瘤细胞核为体表肿瘤细胞核和/或体内深部肿瘤细胞核。
[0020]优选地，所述超声波采用超声波仪产生。
[0021]本专利技术的第一方面提供多柔比星的应用。
[0022]多柔比星在制备声动力联合化疗治疗肿瘤药物中的应用。
[0023]相对于现有技术，本专利技术的有益效果如下：
[0024](1)本专利技术先施用药物，然后利用超声波，促进药物更多地进入细胞核，使得药物进入细胞核的量明显增加，从而使药物在核内的滞留时间延长，可以充分地发挥药物的作用效果，避免药物被排出胞外，造成药物的利用率下降和浪费；而且相对于靶向配体来说，声波作为一种物理手段，具有成本低、时间可控、非侵入性、创伤性小、安全可靠、操作简便、可对体内深部肿瘤细胞核尤其是耐药性肿瘤细胞核起作用的优势；
[0025](2)本专利技术利用多柔比星作为药物，结合超声波，不仅可促进多柔比星更多地进入细胞核，而且多柔比星是一种声敏剂，经过声波的激发后还可以产生活性氧簇(ROS)，两种效果同时作用，获得了比游离多柔比星更强的效果，对产生耐药性的细胞核的损伤性增强；
[0026](3)本专利技术通过控制超声波的频率可以满足不同环境以及不同处理部位的需求，无需侵入人体内，在人体外即可实现，可操作性强；
[0027](4)本专利技术利用多柔比星在超声波作用下可促进药物更多地进入细胞核，以及经过声波的激发后还可以产生活性氧簇的特点，将多柔比星用于声动力联合化疗治疗中，可用于制备备声动力联合化疗治疗肿瘤药物。
附图说明
[0028]图1为本专利技术实施例1、对比例1和对比例2利用多柔比星联合超声波作用下进入细胞核的效果检测图；
[0029]图2为利用共聚焦显微镜检测多柔比星联合超声波作用的体外产生活性氧簇的效果图；
[0030]图3为利用流式细胞仪检测多柔比星联合超声波作用的体外产生活性氧簇的效果图；
[0031]图4为利用不同浓度的DOX联合超声波作用对脑胶质瘤细胞的体外杀伤效果检测图。
具体实施方式
[0032]为了让本领域技术人员更加清楚明白本专利技术所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本专利技术要求的保护范围不构成限制作用。
[0033]以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
[0034]实施例1
[0035]一种基于声波促进药物进入细胞核的方法，先对脑胶质瘤细胞(U87)施用药物多柔比星，并共孵育1h，再施加超声波作用，即使用超声波仪贴着培养容器进行超声波处理，超声波的频率3MHz，功率1.5W/cm2，占空比为50％，时间为3分钟，细胞核为肿瘤细胞核。
[0036]对比例1
[0037]与实施例1的区别在于不施加超声波作用，仅仅将多柔比星与共孵育1h。
[0038]对比例2
[0039]与实施例1的区别在于不施加超声波作用，仅仅将多柔比星与共孵育0.5h。
[0040]效果检测
[0041]1、联合超声波作用下多柔比星进入细胞核的效果检测
[0042]将脑胶质瘤细胞(U87)接种在96孔板中(104个/孔)，然后与多柔比星(DOX)共孵育0.5h、1h、1h+3min超声波(US)(分别对应上述对比例2、对比例1、实施例1)，然后用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察多柔比星进入细胞核的情况，其结果如图1所示。
[0043]图1a
‑
c分别表示U87与多柔比星共孵育0.5h、1h、1h+3min超声波(US)后细胞核的情况，由结果可看出，在未加超声的情况下，随着时间的推移，DOX进入细胞的量越来越多，但大部分仍然停留在细胞质中。联合超声之后，实施例1的DOX逐渐进入细胞核，并在细胞核中聚集，证明超声波处理有助本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于声波促进药物进入细胞核的方法，其特征在于，先施用所述药物，再施加声波作用，所述声波为超声波。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述药物为多柔比星。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超声波的频率为0.1
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3MHz。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超声波的频率为1
‑
3MHz。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超声波的功率为1
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡林涛，梁锐晶，孙达，任健，方全，郑明彬，
申请(专利权)人：珠海中科先进技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：