一种鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌剂及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌剂及其用途，该根瘤菌菌剂由菌株YX

【技术实现步骤摘要】
一种鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌剂及其用途


[0001]本专利技术属于微生物领域，本专利技术涉及一种鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌剂及其用途。该菌剂由根瘤菌YX
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2 26和WS
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1 13混合制备而成，具有与云南玉溪本地蚕豆品种“云早15号”和引进品种“陵西一寸”共生匹配性高和固氮能力强的特性。

技术介绍

[0002]云南省玉溪市素有“云烟之乡”美誉，是中国十分重要的烤烟产区。为了追求更高的经济收益，烤烟
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蔬菜连作是当地常见种植模式。然而，蔬菜茬化学氮肥过量使用，将严重威胁后茬烤烟产量和品质以及生态环境。以冬季露地高附加值鲜食蚕豆替代蔬菜，是破解上述瓶颈问题的必然选择。一方面，可满足江浙沪冬季市场对鲜食蚕豆的高需求，提高农民经济收益；另一方面，利用蚕豆生物固氮潜力，减少化学氮肥施用量，可促进烤烟生产和保护生态环境。
[0003]鲜食蚕豆具有很高的营养价值，富含蛋白质、胡萝卜素、氨基酸和酚类化合物等，广受市场青睐。云南省得天独厚的气候条件，非常适合冬季露地鲜食蚕豆生长。作为豆科作物，蚕豆能与根瘤菌建立共生关系，同化空气中作物不能利用的分子态氮，进而减少化学氮肥的使用量。然而，蚕豆与根瘤菌的共生，具有高度的专一性。不同菌株接种同一蚕豆品种，或同一菌株接种不同蚕豆品种，其固氮促生效果存在很大的差异。云南玉溪本土主栽蚕豆品种为“云早15号”，该品种豆粒小、产量较低，市场欢迎程度低。最新引进的日本蚕豆品种“陵西一寸”，豆粒大、皮薄、肉质鲜美、产量高，具有很高的市场价值，倍受江浙沪冬季市场的青睐。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的是提供一种适合云南玉溪使用的鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌菌剂，菌剂由二株蚕豆高效固氮根瘤菌混合制备而成，具有共生匹配性高和固氮能力强的特性。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术开展了以下三项渐进式研发工作。(1)实施例1，针对云南省玉溪市当地主栽的二个鲜食蚕豆品种“云早15号”和新引进品种“陵西一寸”，采用低氮纯蛭石基质栽培方法，从中国农业大学菌种保藏中心所保存的采自云南种植蚕豆的根瘤菌菌库中，选取了10株供试根瘤菌，进行了初步筛选。其目的在于筛选出双高(高共生匹配性和高效固氮)和促生效果好的根瘤菌。与接种其它根瘤菌的鲜食蚕豆相比，“云早15号”接种菌株YX
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26和“陵西一寸”接种菌株WS
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13后，植株茎叶干重、叶片叶绿素含量、根干重、根瘤干重、根瘤数，均显著提高。根瘤菌YX
‑2‑
26，其分类学命名为Rhizobium Laguerreae，采集于云南玉溪；与“陵西一寸”相匹配的蚕豆高效固氮根瘤菌WS
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1 13，其分类学命名为Bradyrhizobium japonicum，采集于云南文山。上述菌株均保藏于中国农业大学菌种保藏中心，位于北京，中国农业大学。(2)实施例2，将实施例1初筛得到的上述二种菌株制成混合菌剂，在土壤(采自云南省玉溪市)和蛭石条件下接种到蚕豆，其目的在于比较上述筛选出的根瘤菌在纯土壤栽培和蛭石基质栽培条件的差异，为后续进行大田试验提供更加有效的
技术保障。结果表明，土壤栽培条件下，根瘤菌的固氮效果更好。(3)实施例3，在云南省玉溪市大田条件下，对本专利技术的根瘤菌剂促生效果进行检验。结果表明，接种鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌菌剂可显著改善蚕豆氮素营养状况，提高蚕豆产量和产值。
[0006]生物保藏说明
[0007]生物材料YX
‑2‑
26，分类命名：拉氏根瘤菌(Rhizobium laguerreae)于2022年10月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.25895；
[0008]生物材料WS
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13，分类命名：安徽根瘤菌(Rhizobium anhuiense)于2022年10月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.25909。
附图说明
[0009]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0010]图1示接种不同菌株处理对蚕豆云早15号和陵西一寸生长的影响；
[0011]图2示蚕豆茎叶干重、根干重和SPAD与根瘤数和瘤干重的相关性散点图；
[0012]图3示土壤与蛭石混配比例对蚕豆云早15号和陵西一寸茎叶干重、根干重、SPAD、根瘤数、瘤干重、瘤鲜重的影响；
[0013]图4示蚕豆茎叶干重、根干重和叶片SPAD与根瘤数和瘤干重相关性散点图；
[0014]图5示施氮量和接种根瘤菌对蚕豆产值和产量的影响；
[0015]图6示施氮量和根瘤菌对蚕豆氮肥偏生产力的影响。
具体实施方式
[0016]本专利技术公开了一种鲜食蚕豆高效固氮根瘤菌剂及其用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0017]下面结合实施例，进一步阐述本专利技术：
[0018]实施例1：纯蛭石栽培条件下鲜食蚕豆双高根瘤菌的筛选
[0019](1)供试蚕豆品种“云早15号”为云南本地品种，购自云南省玉溪市本地农户，“陵西一寸”由青海省农科院提供。供试菌株由中国农业大学菌种保藏中心提供，10种菌株的寄主植物为蚕豆；菌株名称、种类、BOX
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T、NodD基因型、采样点位置和点样点pH见表1。
[0020]表1供试菌株编号、名称、菌种、BOX
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T、NodDT地理来源和采样点pH信息表
[0021][0022](2)盆栽试验在中国农业大学生命科学院人工光照间(24℃，12/12h昼夜周期)内进行。使用95％乙醇和3％ NaClO对种子进行表面消毒后采用蛭石法进行催芽。以水土比(体积比)＝1:5.3拌匀加入稀释20倍的低氮营养液的无菌蛭石(湿热灭菌121℃，90min)作为基质，采用双层钵法培养。植物低氮营养液配方(1L)：Ca(NO3)2·
4H2O 0.6g、CaSO4·
2H2O 9.2g、KCl1.5g、MgSO
4 1.2g、K2HPO
4 2.72g、柠檬酸铁1.5g、微量元素液20mL；微量元素液配方(1L)：H3BO
3 2.86g、MnSO
4 1.81g、CuSO4·
5H2O 0.80g、ZnSO40.22g、H2MoO
4 0.02g。每盆1粒种子(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.根瘤菌株，其特征在于，包括根瘤菌菌株YX
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2 26和根瘤菌菌株WS
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1 13；其中，所述根瘤菌菌株YX
‑2‑
26的保藏编号为：CGMCC No.25895；所述根瘤菌菌株WS
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1 13的保藏编号为：CGMCC No.25909。2.根瘤菌剂，其特征在于，所述菌剂包括如权利要求1所述的根瘤菌株。3.根据权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：代快，蒲怡，林杉，焦健，李江舟，王妍，纪清林，张立猛，朱佳豪，
申请(专利权)人：云南省烟草公司玉溪市公司，
类型：发明
国别省市：