一种识别信号放大的石墨烯芯片及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种识别信号放大的石墨烯芯片及其制备方法，该石墨烯芯片制备方法包括以下步骤：S1.制备纳米金颗粒AuNPs溶液；S2.制备纳米探针主体AuNPs

【技术实现步骤摘要】
一种识别信号放大的石墨烯芯片及其制备方法


[0001]本专利技术涉及基于石墨烯芯片的免疫传感器的
，尤其是涉及一种识别信号放大的石墨烯芯片及其制备方法。

技术介绍

[0002]肿瘤标志物检测是肿瘤疾病诊断过程中不可或缺的一项操作，可以提高肿瘤疾病诊断的准确性。癌胚抗原作为常见的肿瘤标志物之一，在癌症中过量表达，因此在恶性肿瘤的鉴别诊断、疗效评价以及病情监测等方面具有十分重要的临床价值。
[0003]电化学免疫传感技术具有便携、响应快、高灵敏和低成本等优点，因此其最常被应用于癌胚抗原的测定。在检测中，目前大多数化学免疫传感器的信号放大策略是依靠辣根过氧化物酶(HRP)催化过氧化氢(H2O2)的还原反应。在电化学免疫传感器中，连接酶位点的数量直接影响还原反应，以及检测的灵敏性和准确性。为了提升酶电化学免疫传感器的检测灵敏度和准确度，通常需要对基底物如芯片进行修饰，常用的酶修饰方法很单一，比如在基底物表面修饰时直接将酶与抗体一对一连接，但由于基底的尺寸有限，最终修饰后的有效结合位点较少，这样不容易检测到信号较小的抗原表达。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种识别信号放大的石墨烯芯片制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.制备纳米金颗粒AuNPs溶液；S2.制备纳米探针主体AuNPs
‑
HRP
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Ab2溶液；取等量的辣根过氧化物酶HRP溶液、纳米金颗粒AuNPs溶液和第二抗体Ab2溶液，混旋孵育1
‑
3h后，加入牛血清白蛋白BSA溶液，再次孵育后，得到制备纳米探针主体AuNPs
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HRP
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Ab2溶液，于3
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5℃保存备用；S3.处理石墨烯芯片电极；对石墨烯芯片电极进行酸洗后，依次浸入含有EDC和NHS的混合溶液、第一抗体Ab1溶液、HER2溶液以及牛血清白蛋白BSA溶液，孵育后清洗，制得Ab1
‑
HER2修饰的石墨烯芯片电极；将经过Ab1
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HER2修饰的石墨烯芯片电极，浸入S2的AuNPs
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HRP
‑
Ab2溶液，孵育后清洗，制备得到Ab1
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HER2
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Ab2
‑
HRP
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AuNPs修饰的石墨烯芯片电极。2.根据权利要求1所述的识别信号放大的石墨烯芯片制备方法，其特征在于，在所述S1制备纳米金颗粒AuNPs溶液中，采用柠檬酸钠还原法，制备得到纳米金颗粒溶液。3.根据权利要求2所述的识别信号放大的石墨烯芯片制备方法，其特征在于，在所述纳米金颗粒溶液中，所述纳米金颗粒为粒径为10nm
‑
2μm的单分散球形纳米金颗粒。4.根据权利要求1所述的识别信号放大的石墨烯芯片制备方法，其特征在于，在所述S2制备纳米探针主体AuNPs
‑
HRP
‑
Ab2溶液中，具体包括以下步骤：S21.配制浓度为2
×
10
‑3～9
×
10
‑2mmol/L的辣根过氧化物酶HRP溶液；S22.用磷酸盐缓冲溶液PBS，对所述S1的纳米金颗粒AuNPs溶液进行稀释，配制得到浓度为5
×
10
‑4～7
×
10
‑3mmol/L的纳米金颗粒AuNPs溶液；S23.配制第二抗体Ab2溶液，且取等量的辣根过氧化物酶HRP溶液、纳米金颗粒AuNPs溶液和第二抗体Ab2溶液，混旋孵育2h，得混旋溶液；S24.配制质量浓度为1
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2％的牛血清白蛋白BSA溶液，并加入至S23的混旋溶液中，再次混旋孵育后，于3
‑
5℃保存备用，制得纳米探针主体AuNPs
‑
HRP
‑
Ab2溶液。5.根据权利要求4所述的识别信号放大的石墨烯芯片制备方法，其特征在于，在所述S24中，取0.1
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0.2g牛血清白蛋白BSA和10mL磷酸盐缓冲溶液PBS，混合后制得质...

【专利技术属性】
技术研发人员：李娜娜，王世杰，唐佳仪，王宁，谢旺根，张顺，刘清侠，
申请(专利权)人：深圳技术大学，
类型：发明
国别省市：