DNA四面体框架核酸与CCR2抑制剂的复合物及其用途制造技术

本发明专利技术提供了DNA四面体框架核酸与CCR2抑制剂以摩尔比1:(2～4)的复合而成的复合物，以及该复合物在制备防治肝纤维化、肝硬化的药物中的用途。本发明专利技术复合物可以明显降低肝纤维化区域面积，减缓、降低CCl4诱导的Collagen I和α

【技术实现步骤摘要】
DNA四面体框架核酸与CCR2抑制剂的复合物及其用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及DNA四面体框架核酸与CCR2抑制剂的复合物及其用途。

技术介绍

[0002]肝纤维化是肝脏慢性损伤下的持续、动态的组织修复结果，以细胞外基质的过度沉积为主要表现。多种病因包括慢性病毒感染、酒精损伤、代谢障碍、化学物质损伤等长期作用于肝脏的损伤因素可导致慢性肝炎，并随着时间推移在无干预措施的情况下进展为肝纤维化，出现肝脏功能一定程度的损伤。虽然早期的肝纤维化可以在损伤因素消失后表现为好转，但是上述慢性损伤的彻底控制是很难的。控制不良的慢性损伤因素将导致肝纤维化继续进展为肝硬化，出现明显的肝脏形态和功能的异常，并导致严重的全身并发症，严重威胁患者健康。
[0003]C
‑
C趋化因子受体2(CCR2)介导各种炎症性疾病，并在招募炎症/免疫细胞方面发挥关键作用。之前的研究表明，CCR2与心肌炎、肌萎缩侧索硬化症、糖尿病心肌病、骨关节炎和缺血性中风有关。因此，沉默CCR2表达可能对心肌炎、急性心肌梗塞、和脊髓损伤具有治疗作用。
[0004]DNA四面体框架核酸(tFNAs)是一种由DNA单链通过自组装合成的具有三维结构的DNA纳米材料，具有良好的生物相容性、可编辑性和生物安全性。一方面，其具有作为药物载体的潜能，另一方面，也有报道显示DNA四面体本身具有一定的药理活性；例如中国专利CN112587544B，即公开了DNA四面体框架核酸对肺纤维化有一定的治疗效果。
[0005]目前，有研究报道了tFNAs和CCR2抑制剂(CCR2的siRNA：siCCR2)以摩尔比1:1复合的复合物治疗脑出血的效果([Fu W,Ma L,Ju Y,et al.Therapeutic siCCR2 Loaded by Tetrahedral Framework DNA Nanorobotics in Therapy for Intracranial Hemorrhage(Adv.Funct.Mater.33/2021)[J].Advanced Functional Materials,2021,31)，但tFNAs和siCCR2复合物对肝纤维化、肝硬化的作用，尚未见报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种DNA四面体框架核酸与CCR2抑制剂的复合物。
[0007]本专利技术提供了一种复合物，它由DNA四面体框架核酸和CCR2抑制剂复合而成，所述DNA四面体和CCR2抑制剂的摩尔比为1:(2～4)。
[0008]进一步地，上述DNA四面体和CCR2抑制剂的摩尔比为1:4。
[0009]更进一步地，上述CCR2抑制剂是CCR2的小干扰RNA。
[0010]更进一步地，上述复合物是由DNA四面体和CCR2的小干扰RNA通过粘性末端互补配对连接而成。
[0011]更进一步地，上述DNA四面体由4条单链DNA经碱基互补配对形成，其中2条、3条或4条单链DNA带有粘性末端。
[0012]更进一步地，上述DNA四面体由4条带有粘性末端的单链DNA经碱基互补配对形成。
[0013]更进一步地，上述DNA四面体的4条带有粘性末端的单链DNA的序列分别如SEQ ID NO.1～4所示。
[0014]进一步地，上述CCR2的小干扰RNA的正义链或反义链带有粘性末端，所述粘性末端与DNA四面体的粘性末端互补配对。
[0015]更进一步地，上述CCR2的小干扰RNA的正义链序列如SEQ ID NO.5所示，反义链序列如SEQ ID NO.6所示。
[0016]本专利技术还提供了上述的复合物在制备防治肝硬化的药物中的用途。
[0017]进一步地，上述防治肝硬化的药物是防治肝纤维化的药物。
[0018]更进一步地，上述防治肝纤维化的药物是减缓或降低Collagen I、α
‑
SMA蛋白表达的药物。
[0019]本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一种DNA四面体框架核酸与CCR2抑制剂的复合物，可以明显降低肝纤维化区域面积，减缓、降低CCl4诱导的Collagen I和α
‑
SMA的高表达，从而改善肝脏纤维化，延缓病程的发生发展，保护肝脏，防治肝硬化的发生发展。
[0020]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0021]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0022]图1为本专利技术复合物对CCR2的抑制效果。
[0023]图2为本专利技术复合物治疗肝纤维化的结果。
具体实施方式
[0024]本专利技术所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
[0025]实施例1、本专利技术复合物的制备
[0026]将四种DNA单链(S1、S2、S3、S4)和一种RNA(siCCR2)按照1：1:1:1:4的比例溶解于TM Buffer(10mM Tris
‑
HCl,50mM MgCl2,pH＝8.0)中，DNA与RNA的终浓度为1000nM，充分混合，迅速加热至95℃保持10分钟，之后迅速降温至4℃并维持20分钟以上，即可得到本专利技术复合物tFNA
‑
siCCR2。
[0027]序列(5
’→3’
)如下：
[0028]S1(SEQ ID NO.1)：
[0029]ATTTATCACCCGCCATAGTAGACGTATCACCAGGCAGTTGAGACGAACATTCCTAAGTCTGAA TTTTTATTGATCTATGATCGTACGAT
[0030]S2(SEQ ID NO.2)：
[0031]ACATGCGAGGGTCCAATACCGACGATTACAGCTTGCTACACGATTCAGACTTAGGAATGTTCG TTTTTATTGATCTATGATCGTACGAT
[0032]S3(SEQ ID NO.3)：
[0033]ACTACTATGGCGGGTGATAAAACGTGTAGCAAGCTGTAATCGACGGGAAGAGCATGCCCATCC TTTTTATTGATCTATGATCGTACGAT
[0034]S4(SEQ ID NO.4)：
[0035]ACGGTATTGGACCCTCGCATGACTCAACTGCCTGGTGATACGAGGATGGGCATGCTCTTCCCG TTTTTATTGATCTATGATCGTACGAT
[0036]siCCR2正义链(SEQ ID NO.5)：
[0037]ugcuaaacgucucuccaaaTT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合物，其特征在于，它由DNA四面体框架核酸和CCR2抑制剂复合而成，所述DNA四面体和CCR2抑制剂的摩尔比为1:(2～4)。2.如权利要求1所述的复合物，其特征在于，所述DNA四面体和CCR2抑制剂的摩尔比为1:4。3.如权利要求1或2所述的复合物，其特征在于，所述CCR2抑制剂是CCR2的小干扰RNA。4.如权利要求3所述的复合物，其特征在于，所述复合物是由DNA四面体和CCR2的小干扰RNA通过粘性末端互补配对连接而成。5.如权利要求4所述的复合物，其特征在于，所述DNA四面体由4条单链DNA经碱基互补配对形成，其中2条、3条或4条单链DNA带有粘性末端。6.如权利要求5所述的复合物，其特征在于，所述DNA四面体由4条带有粘性末端的单链DNA经碱基互补配对形成，...

【专利技术属性】
技术研发人员：林云锋，李松航，高锦航，赵翀，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：