一种小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：它是以鱼皮胶原蛋白肽、酪蛋白水解肽为主要原料，加入交联剂、多糖原材料、生物催化剂制成的；其中，所述的鱼皮胶原蛋白肽为以鱼皮为原料，经脱脂、脱色、除杂蛋白、酶提取、调等电点沉淀胶原蛋白、双水相萃取法纯化蛋白、透析、酶解、葡聚糖凝胶G

【技术实现步骤摘要】
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂及其制备方法


[0001]本专利技术属于鱼类副产品加工提高附加值
，涉及一种小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]水凝胶(Hydrogel)是以水为分散介质的凝胶，它是在具有网状交联结构的水溶性高分子中引入一部分疏水基团和亲水残基，亲水残基与水分子结合，将水分子连接在网状内部，而疏水残基遇水膨胀的交联聚合物。水凝胶是一种高分子网络体系，性质柔软，能保持一定的形状，能吸收大量的水，具有优良的保水性。
[0003]现代社会环境变差，人们经常熬夜、生活不规律，导致皮肤状态变差，变得粗糙、水分散失，引发皱纹增多。长期的紫外线暴露会使紫外线透过真皮层导致皮肤光老化，使胶原蛋白分解，皮肤失去胶原纤维会缺少弹性和光泽，所以要及时地补充一些易吸收的胶原蛋白肽。胶原蛋白肽和水凝胶交联结合了两者的功效，既可以补充胶原蛋白肽也可以给肌肤补充水分。但目前复合水凝胶中部分添加剂常常会导致一些使用者发生过敏反应，而且在复合水凝胶制作工艺中往往缺少检测pH这一步骤，没有将pH调节到皮肤可以耐受的值，导致使用者在使用过程中可能感受到刺激皮肤的不良反应。
[0004]胶原蛋白肽在温度40℃以上时就不具有热稳定性。根据胶原蛋白肽的类型、来源和提取条件的不同，变性温度可低至10℃，因此胶原蛋白肽的热稳定性差限制了其作为生物材料的应用。

技术实现思路

[0005]为了解决上述现有技术方法中存在的不足，本专利技术的目的是提供一种胶原蛋白肽复合水凝胶，由鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白肽互相融合制成外用复合水凝胶，鱼皮胶原蛋白肽无色无味，且分子量小，易于经皮肤吸收。复合水凝胶在水中迅速溶胀并在溶胀状态保持大量体积的水而不溶解，保水量大大提升，亲水性强，适用于各种美容、抗衰老产品；在复合水凝胶中加入防过敏添加剂，减少使用者在使用过程中发生过敏反应。
[0006]本专利技术的目的是通过下述技术方案来实现的：
[0007]一种小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，它是以鱼皮胶原蛋白肽、酪蛋白水解肽为主要原料，加入交联剂、多糖原材料、生物催化剂制成的；其中，所述的鱼皮胶原蛋白肽、酪蛋白水解肽的重量比为0.8:1～2:1；所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与多糖原材料的重量比为1:0.1～1:0.2；所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与生物催化剂的重量比为1:0.02～1:0.06；所述的交联剂为质量数为1.5％的EDC(1
‑
乙基
‑3‑
(3
‑
二甲氨丙基)碳二亚胺)水溶液和质量分数为0.5％的NHS(N
‑
羟基琥珀酰亚胺)水溶液的组合，所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与EDC水溶液的重量体积比为1:0.02～1:0.06g/mL或kg/L，所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与NHS水溶液的重量体积比为1:0.02～1:0.06g/mL或kg/L。
[0008]所述的多糖原材料为天然多糖，选自壳聚糖、魔芋葡甘露聚糖和透明质酸中的一种或两种以上。
[0009]透明质酸具有生物相容性、非免疫原性和高度亲水性，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子。它可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂，能充分补充肌体皮肤水分。因此，所述的多糖原材料优选为透明质酸。但考虑到透明质酸的细胞亲和性较低，为了克服与透明质酸和胶原蛋白相关的障碍，本专利技术加入交联剂EDC、NHS交联，不但加快了胶原蛋白肽与水凝胶的交联速度，而且解决了透明质酸亲和力低以及胶原蛋白肽热不稳定性的问题。
[0010]所述的生物催化剂为转谷氨酰胺酶。采用生物催化剂使得更快地交联形成凝胶，酶催化剂温和、具有专一性。与化学催化剂相比，酶催化剂不会产生有害的副产物，且该酶的来源为微生物提取纯化，相比起从动物或者从人组织中提取，微生物提取来源广泛，资金投入少，纯化工序简单。
[0011]作为本专利技术所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂的优选技术方案，原料还包括防过敏添加剂；所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与防过敏添加剂的重量比为1:0.02～1:0.05，优选为1:0.02～1:0.03。
[0012]所述的防过敏添加剂为白芷、薄荷、金银花和甘草按照重量比1:1:1:1的组合。白芷有治皮肤燥痒的功效，薄荷有止痒的功效，金银花能清热解毒、抗病毒，甘草也有清热解毒的作用，在处方中有调和诸药的作用。熟化处理时提取出防过敏添加剂的有效成分，能有效地预防涂抹后机体出现过敏反应。
[0013]优选的，所述的防过敏添加剂白芷粉末、薄荷粉末、金银花粉末和甘草粉末按照重量比1:1:1:1混合。所述的白芷粉末、薄荷粉末、金银花粉末和甘草粉末是分别将对应的原材料粉碎、过250目筛得到的。
[0014]所述的鱼皮胶原蛋白肽为以鱼皮为原料，经脱脂、脱色、除杂蛋白、酶提取、调等电点沉淀胶原蛋白、双水相萃取法纯化蛋白、透析、酶解、葡聚糖凝胶G
‑
10分离、干燥得到的<700Da的蛋白肽。
[0015]具体的，所述的鱼皮胶原蛋白肽的是由以下方法制得的：
[0016]步骤(a)、鱼皮处理：用清水将鱼皮清洗干净，剪成小块，沥干；
[0017]步骤(b)、脱脂、脱色、除杂蛋白：将沥干的鱼皮和浓度为0.1M氢氧化钠溶液按照料液比1:10～1:20(g/mL或kg/L)混合，加入质量分数为30％的双氧水，进行脱脂、脱色，每6小时更换一次溶液，更换3～6次，水洗至鱼皮中性；将鱼皮和质量分数为2％的氯化钠溶液按照料液比1:10～1:20(g/mL或kg/L)混合以除杂蛋白，每6小时更换一次溶液，更换3～6次；再将鱼皮和无水乙醇按照料液比1:10～1:20(g/mL或kg/L)混合搅拌6小时以除去残留的脂肪，水洗至鱼皮无醇味，沥干；
[0018]步骤(c)、酶提取：按照料液比1:10～1:20(g/mL或kg/L)将鱼皮加入浓度为1.0M的柠檬酸溶液，冰浴超声振荡，再加入鱼皮原料重量2％～4％的胃蛋白酶，在4～10℃下搅拌提取24～72小时，过滤除去鱼皮残渣，离心，得到上清液；
[0019]步骤(d)、调等电点沉淀胶原蛋白：用8M的氢氧化钠溶液调节上清液的pH为7，静置，待出现沉淀，离心，弃去上清液，得到蛋白沉淀；
[0020]步骤(e)、双水相萃取法纯化蛋白：按照固液比(指原料鱼皮和双水相萃取体系的质量体积比)1:10～1:20(g/mL或kg/L)将蛋白沉淀加入(NH4)2SO4和聚乙二醇6000的双水相萃取体系中，搅拌均匀，在常温下振荡反应1h～3h，静置，分相，弃去沉淀，取上相萃取液；
[0021]步骤(f)、透析、冷冻干燥：将萃取液透析3～4天，每隔6小时换一次透析液，冷冻干燥，得到无色鱼皮胶原蛋白粉末；
[0022]步骤(g)、酶解：用超纯水将鱼皮胶原蛋白粉末配成溶液，调本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：它是以鱼皮胶原蛋白肽、酪蛋白水解肽为主要原料，加入交联剂、多糖原材料、生物催化剂制成的；其中，所述的鱼皮胶原蛋白肽、酪蛋白水解肽的重量比为0.8:1～2:1；所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与多糖原材料的重量比为1:0.1～1:0.2；所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与生物催化剂的重量比为1:0.02～1:0.06；所述的交联剂为质量数为1.5％的EDC水溶液和质量分数为0.5％的NHS水溶液的组合，所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与EDC水溶液的重量体积比为1:0.02～1:0.06g/mL或kg/L，所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与NHS水溶液的重量体积比为1:0.02～1:0.06g/mL或kg/L。2.根据权利要求1所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：所述的多糖原材料为天然多糖，选自壳聚糖、魔芋葡甘露聚糖和透明质酸中的一种或两种以上，优选为透明质酸。3.根据权利要求1所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：所述的生物催化剂为转谷氨酰胺酶。4.根据权利要求1所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：还包括防过敏添加剂；所述的鱼皮胶原蛋白肽和酪蛋白水解肽的总量与防过敏添加剂的重量比为1:0.02～1:0.05，优选为1:0.02～1:0.03。5.根据权利要求4所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：所述的防过敏添加剂为白芷、薄荷、金银花和甘草按照重量比1:1:1:1的组合。6.根据权利要求1所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：所述的鱼皮胶原蛋白肽为以鱼皮为原料，经脱脂、脱色、除杂蛋白、酶提取、调等电点沉淀胶原蛋白、双水相萃取法纯化蛋白、透析、酶解、葡聚糖凝胶G
‑
10分离、干燥得到的<700Da的蛋白肽。7.根据权利要求6所述的小分子鱼皮胶原蛋白肽复合凝胶剂，其特征在于：所述的鱼皮胶原蛋白肽的是由以下方法制得的：步骤(a)、鱼皮处理：用清水将鱼皮清洗干净，剪成小块，沥干；步骤(b)、脱脂、脱色、除杂蛋白：将沥干的鱼皮和浓度为0.1M氢氧化钠溶液按照料液比1:10～1:20混合，加入质量分数为30％的双氧水，进行脱脂、脱色，每6小时更换一次溶液，更换3～6次，水洗至鱼皮中性；将鱼皮和质量分数为2％的氯化钠溶液按照料液比1:10～1:20混合，每6小时更换一次溶液，更换3～6次；再将鱼皮和无水乙醇按照料液比1:10～1:20混合搅拌6小时，水洗至鱼皮无醇味，沥干；步骤(c)、酶提取：按照料液比1:10～1:20将鱼皮加入浓度为1.0M的柠檬酸溶液，冰浴超声振荡，再加入鱼皮原料重量2％～4％的胃蛋白酶，在4～10℃下搅拌提取24～72小时，过滤除去鱼皮残渣，离心，得到上清液；步骤(d)、调等电点沉淀胶原蛋白：用8M的氢氧化钠溶液调节上清液的pH为7，静置，待出现沉淀，离心，弃去上清液，得到蛋白沉淀；步骤(e)、双水相萃取法纯化蛋白：按照固液比1:10～1:20将蛋白沉淀加...

【专利技术属性】
技术研发人员：段小群，卢曦，王宇晖，徐笑天，李信慧，赵庆霞，
申请(专利权)人：桂林医学院，
类型：发明
国别省市：