一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，包括鳕鱼皮预处理、制备胶原蛋白液、制备鱼皮膜、化学交联、静电纺丝、干燥和灭菌六个步骤，具有提高我国水产品加工利用的综合效益和经济附加值、规避陆生哺乳动物源性疾病、避免造成环境污染等优点。该修复膜同时具备胶原蛋白优良的生物学性能和静电纺丝纳米纤维高比表面积、高孔隙率、孔道连通性、三维结构和仿生天然细胞外基质的优点，有望成为高端生物医学组织工程材料。有望成为高端生物医学组织工程材料。有望成为高端生物医学组织工程材料。

【技术实现步骤摘要】
一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法


[0001]本专利技术属于生物材料领域，具体是一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法。

技术介绍

[0002]我国水产资源丰富，但是在水产资源加工过程中产生大量的鱼下脚料，例如鱼皮、鱼鳞、内脏、鱼头等，不仅造成了资源极大的浪费，而且还会造成环境污染。鱼皮中的胶原蛋白含量占总蛋白量80％以上，较鱼体其他部位高出许多。另外，水生动物源胶原避免了陆生哺乳动物源性疾病传播的风险。因此使用鱼皮作为原料提取胶原蛋白、生产组织修复膜，具有提高我国水产品加工利用的综合效益和经济附加值、规避陆生哺乳动物源性疾病、避免造成环境污染等优点。
[0003]胶原蛋白具有优良的物理机械性能、良好的生物相容性、安全性和低免疫原性，能促进细胞粘附和增殖，促使血管形成、肉芽生长和上皮化，加快伤口愈合的进度，是一种优良的生物医学材料。静电纺丝技术可以用来制备纳米纤维，具有简单、经济、快速的优点。静电纺丝制备的纳米纤维具有高比表面积、高孔隙率、吸水性、三维结构和与天然细胞外基质相似的结构。通过静电纺丝技术制备胶原蛋白静电纺丝膜，同时具备胶原蛋白优良的生物学性能和静电纺丝纳米纤维高比表面积、高孔隙率、孔道连通性、三维结构和仿生天然细胞外基质的优点，有望成为高端生物医学组织工程材料。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，该方法制备的天然医用胶原蛋白组织修复膜具有优异的生物相容性和机械性能，具体技术方案如下：
>[0005]1、一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，包括以下步骤：
[0006](1)鳕鱼皮预处理。
[0007](2)制备胶原蛋白液。
[0008](3)制备鱼皮膜。
[0009](4)将鱼皮膜进行化学交联。
[0010](5)在交联后的鱼皮膜上用胶原蛋白液进行静电纺丝，得到组织修复膜。
[0011](6)将组织修复膜进行干燥和灭菌。
[0012]上述鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，所述鳕鱼鱼皮预处理包括化冻、去鱼鳞、低温纯化水冲洗、盐洗、去黑皮、脱脂、碱处理、脱色。
[0013]进一步地，所述低温纯化水的温度是5
‑
8℃。
[0014]进一步地，所述盐洗用1％
‑
10％的氯化钠溶液在5
‑
10℃下震荡12
‑
24h。
[0015]进一步地，所述去黑皮是用0.1％
‑
5％乙酸溶液浸泡鱼皮2
‑
8min，再将黑色鱼皮刮去；然后将鱼皮3000
‑
5000r/min离心3
‑
5min，放入1
×
PBS缓冲液中暂存。
[0016]进一步地，所述脱脂是用0.1％
‑
2％的TritonX
‑
100溶液振荡摇晃12
‑
24h。
[0017]进一步地，所述碱处理是用0.1％
‑
10％的氢氧化钠溶液中振荡摇晃4
‑
12h。
[0018]进一步地，所述脱色是用2％
‑
10％的双氧水溶液振荡摇晃1
‑
5h。
[0019]上述一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，所述胶原蛋白液的制备包括酸洗、蛋白酶浸提、过滤。
[0020]进一步地，所述酸洗是将步骤(1)的鱼皮用1％
‑
8％的乙酸溶液5
‑
10℃搅拌12
‑
24h。
[0021]进一步地，所述蛋白酶浸提是用胃蛋白酶5
‑
10℃搅拌12
‑
24h。
[0022]进一步地，所述过滤是用滤袋
‑
筒式过滤系统。
[0023]上述一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，所述鱼皮膜的制备包括分切和软化。
[0024]进一步地，所述分切是将步骤(1)的鱼皮分切成20mm
×
20mm、25mm
×
25mm、30mm
×
30mm等所需要的规格。
[0025]进一步地，所述软化是用0.1％
‑
2％的软化剂溶液振荡摇晃1
‑
5h。
[0026]上述一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，所述交联是将步骤(3)中的鱼皮膜用京尼平或戊二醛溶液振荡摇晃3
‑
5h。
[0027]上述一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，所述静电纺丝包括推进器进样和纺丝。
[0028]进一步地，所述推进器的推进速度为0.1
‑
15mL/h；
[0029]进一步地，所述纺丝电压为7
‑
30kV；
[0030]进一步地，所述纺织采用的不锈钢滚轴的接收距离为8
‑
20cm；
[0031]进一步地，所述纺织采用的不锈钢滚轴的转动速度为100
‑
2000rmp；
[0032]进一步地，所述纺丝时间为2
‑
20h。
[0033]上述一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法，所述灭菌是通过Co
‑
60γ射线辐照灭菌，辐照剂量为10
‑
25KGy。
[0034]与现有技术相比，本专利技术的有益技术效果如下：
[0035](1)使用鱼皮等水产品加工副产物，解决鱼加工副产物浪费的问题。另外，水生动物源胶原避免了陆生哺乳动物源性疾病和病原体传播的风险更加安全可靠。
[0036](2)该组织修复膜是双层膜，既保存了鱼皮本身的真皮层结构，具有良好的机械屏障作用，又通过静电纺丝技术制备胶原蛋白静电纺丝膜，同时具备胶原蛋白优良的生物学性能和静电纺丝纳米纤维高比表面积、高孔隙率、孔道连通性、三维结构和仿生天然细胞外基质的优点，有望成为高端生物医学组织工程材料。
附图说明
[0037]图1组织修复膜的扫描电子显微镜照片(左为静电纺丝膜，右为脱细胞鱼皮膜)
[0038]图2组织修复膜拉伸强度
[0039]图3组织修复膜差示扫描量热结果
[0040]图4伤口愈合结果图
具体实施方式
[0041]以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述：
[0042]实施例1鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜的制备
[0043]1、取鳕鱼鱼皮化冻、去鱼鳞，5℃低温纯化水冲洗后，用5％氯化钠溶液在5℃下震荡24h，用蒸馏水反复冲洗；将鱼皮置于5％乙酸溶液浸泡5min，用刀刮去黑色鱼皮，将鱼皮3000r/min离心5min，放入1
×
PBS缓冲液中暂存，将鱼皮按照1:20的比例先后在1％的Trito本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鳕鱼皮天然医用胶原蛋白组织修复膜及其制备方法。其特征在于，包括以下步骤：步骤1：鳕鱼皮预处理；步骤2：制备胶原蛋白液；步骤3：制备鱼皮膜；步骤4：将鱼皮膜进行化学交联；步骤5：在交联后的鱼皮膜上用胶原蛋白液进行静电纺丝，得到组织修复膜；步骤6：将组织修复膜进行干燥和灭菌。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1中的鳕鱼鱼皮预处理包括化冻、去鱼鳞、低温纯化水冲洗、盐洗、去黑皮、脱脂、碱处理、脱色；其进一步包括所述低温纯化水的温度是5
‑
8℃；所述盐洗是用1％
‑
10％的氯化钠溶液在5
‑
10℃下震荡12
‑
24h；所述去黑皮是用0.1％
‑
5％乙酸溶液浸泡鱼皮2
‑
8min，再将黑色鱼皮刮去；然后将鱼皮3000
‑
5000r/min离心3
‑
5min，放入1
×
PBS缓冲液中暂存；所述脱脂是用0.1％
‑
2％的TritonX
‑
100溶液振荡摇晃12
‑
24h；所述碱处理是用0.1％
‑
10％的氢氧化钠溶液中振荡摇晃4
‑
12h；所述脱色是用2％
‑
10％的双氧水溶液振荡摇晃1
‑
5h。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2中胶原蛋白液的制备包括酸洗、蛋白酶浸提、过滤；其进一步包括所述酸洗是将步骤1的鱼皮用...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓付敏，
申请(专利权)人：烟台海昊生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：