一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法，包括三文鱼皮预处理、制备三文鱼皮胶原蛋白液、静电纺丝制备致密层、致密层的交联、制备疏松层、干燥灭菌等步骤。该复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜机械强度好，质地柔软，能与伤口紧密贴合，能够促进血管新生和肉芽组织生长，加速胶原沉积，可明显提高伤口愈合率，并且减少伤口色素沉积和疤痕的产生。的产生。的产生。

【技术实现步骤摘要】
一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法


[0001]本专利技术属于生物材料领域，具体是一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法。

技术介绍

[0002]胶原蛋白(collagen)是一种在动物体中含量最高、分布最为广泛的具有纤维状结构的蛋白质，在动物体中，约占体内所有蛋白质的25％至40％，每个胶原分子是由三条α－肽链以平行、右手螺旋形式缠绕成草绳状的三股螺旋结构，分子质量约为300ku。在胶原蛋白中甘氨酸、赖氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等氨基酸的含量非常丰富，其中羟脯氨酸是胶原蛋白的特有氨基酸。对于鱼类而言，胶原蛋白主要存在于鱼皮、鱼鳞、鱼骨等部位，其中鱼皮中的胶原含量丰富，最高可占其蛋白质总量的80％多。在我省沿海地区每年加工出口的三文鱼片已形成一定的规模，将三文鱼加工成生鱼片时，必须去除鱼皮，由此可产生大量的鱼皮、鳍、头等下脚料，目前这些下脚料主要用作饲料，未进行深度的开发利用，产生的经济效益有限。所以，从三文鱼皮中提取胶原蛋白，能变废为宝，增加附加值。胶原蛋白具有很强的生物活性及生物功能，能参与细胞的迁移、分化和增殖，使骨、腱、软骨和皮肤具有一定的机械强度。因其弱的抗原性和良好的生物相容性可作为生物医药材料的基础材料。
[0003]本专利技术以三文鱼皮为基础材料提取三文鱼皮胶原蛋白液，制备一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜，提高伤口愈合率，减少伤口色素沉积和疤痕的产生。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法，该方法制备的静电纺丝膜具有优异的生物相容性和机械性能，具体技术方案如下描述。
[0005]一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法，具体包括以下步骤：
[0006]1.三文鱼皮预处理：脱黑皮、脱脂、脱色；
[0007]2.制备三文鱼皮胶原蛋白液：超声、酶法处理、过滤、冷冻干燥；
[0008]3.制备致密层：将步骤2中胶原蛋白沉淀配置成溶液液移至静电纺丝注射泵中，静电纺丝形成致密层；
[0009]4.致密层的交联：将致密层用戊二醛溶液交联；
[0010]5.制备疏松层：步骤2中胶原蛋白沉淀配置胶原蛋白溶液均匀的涂覆在交联后的致密层上，冷冻干燥、灭菌；
[0011]进一步地，步骤1所述去黑皮是用0.1％
‑
5％乙酸溶液浸泡鱼皮2
‑
8min，再将黑色鱼皮刮去。
[0012]进一步地，步骤1所述脱脂是鱼皮与异丙醇按照料液比1：20的比例搅拌处理。
[0013]进一步地，步骤1所述脱色是用2％
‑
10％的双氧水溶液搅拌处理。
[0014]进一步地，步骤2所述超声是按照1：20的液料比，将鱼皮置于醋酸溶液中超声，超声功率为200
‑
600W，超声时间为10
‑
30min；
[0015]进一步地，步骤2所述酶法处理是用质量为鱼皮干重的2％
‑
6％的胃蛋白酶搅拌处理。
[0016]进一步地，步骤2所述过滤是用滤袋
‑
筒式过滤系统。
[0017]进一步地，步骤3中推进器的推进速度为5
‑
15mL/h；
[0018]进一步地，步骤3所述纺丝电压为10
‑
30kV；
[0019]进一步地，步骤3所述纺织采用的不锈钢滚轴的接收距离为6
‑
30cm；
[0020]进一步地，步骤3所述纺织采用的不锈钢滚轴的转动速度为500
‑
1000rmp；
[0021]进一步地，步骤3所述纺丝时间为2
‑
10h。
[0022]进一步地，步骤4所述戊二醛的浓度为2％
‑
20％。
[0023]进一步地，步骤5所述冷冻干燥是在真空冷冻干燥机内进行真空冷冻干燥。
[0024]进一步地，步骤5所述灭菌是通过Co
‑
60γ射线辐照灭菌，辐照剂量为10
‑
25KGy。
[0025]与现有技术相比，本专利技术的有益技术效果如下：
[0026]该复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜包括两部分，致密层是通过将胶原蛋白液通过静电纺丝形成的膜，疏松层是将从鱼皮中提取的胶原蛋白液涂覆在致密层上，通过其自组装形成一层胶原海绵，机械强度好，质地柔软，能与伤口紧密贴合，能够促进血管新生和肉芽组织生长，加速胶原沉积，可明显提高伤口愈合率，并且减少伤口色素沉积和疤痕的产生。
附图说明
[0027]图1复合静电纺丝膜的扫描电镜观察(左为冻干膜，右为静电纺丝膜)
[0028]图2复合静电纺丝膜的体外降解曲线
[0029]图3受试品对小鼠体重的影响
具体实施方式
[0030]以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述：
[0031]实施例1复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜的制备
[0032]1、三文鱼皮预处理
[0033]取冷冻储存的三文鱼皮,化冻后刮去鱼鳞，用5℃的纯化水冲洗3遍至表面无明显杂质，用0.3％的乙酸溶液浸泡鱼皮4min，用5℃纯化水冲洗掉残留乙酸，用刀将黑色鱼皮刮去，将鱼皮依次置于4L 10％异丙醇溶液和5％的双氧水溶液搅拌处理后切成5mm
×
5mm的形状、洗净，40目纱布沥干，称重为200.21g。
[0034]2、制备胶原蛋白液
[0035]将预处理后的鱼皮置于在4L 0.5mol/L的醋酸溶液中超声，超声功率为200W，超声时间为10min，超声结束后将液体倒出，称取4g胃蛋白酶加入到溶液中搅拌，搅拌结束后，将胶液分别通过5微米的滤袋过滤、0.45微米的筒式过滤系统进行精过滤获得胶原蛋白液，用200目滤袋8000r离心10min得到胶原蛋白沉淀，然后在真空冷冻干燥机内真空冷冻24h得到胶原蛋白沉淀(干基)。
[0036]3、制备致密层
[0037]配置1.5％浓度的胶原蛋白溶液，静置、脱泡，然后分次装入10mL静电纺丝注射器，
注射泵控制溶液流速为5mL/h左右，电压设定在25kV，针头与收集板的距离为20cm，纺织采用的不锈钢滚轴的接收距离为6
‑
30cm，不锈钢滚轴的转动速度为1000rmp，纺丝2h，形成致密层。
[0038]4、致密层的交联
[0039]将致密层置于5mL 8％的戊二醛溶液中交联2h，用5℃纯化水洗涤5遍。
[0040]5、制备疏松层
[0041]配置1％浓度的胶原蛋白溶液，静置、脱泡、加碱中和pH至7，将制备的胶原蛋白液均匀的涂覆在交联后的致密层上静置30min，通过胶原自组装形成疏松层结构，获得三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜，置于真空冷冻干燥机内进行真空冷冻干燥，通过Co
‑
60γ射线辐照灭菌，灭菌剂量为15KGy，封装保存。
[0042]实施例2复合静电纺丝膜的扫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合三文鱼皮胶原蛋白静电纺丝膜及其制备方法，其特征在于，方法包括以下步骤：步骤1.三文鱼皮预处理：脱黑皮、脱脂、脱色；步骤2.制备三文鱼皮胶原蛋白：超声、酶法处理、过滤、冷冻干燥；步骤3.制备致密层：将步骤2中胶原蛋白配置成溶液移至静电纺丝注射泵中，静电纺丝形成致密层；步骤4.致密层的交联：将致密层用戊二醛溶液交联；步骤5.制备疏松层：步骤2中胶原蛋白配置成胶原蛋白溶液均匀的涂覆在交联后的致密层上，冷冻干燥、灭菌。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1所述去黑皮是用0.1％
‑
5％乙酸溶液浸泡鱼皮2
‑
8min，再将黑色鱼皮刮去；所述脱脂是鱼皮与异丙醇按照料液比1：20的比例搅拌处理。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1所述脱色是用2％
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10％的双氧水溶液搅拌处理。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2所述超声是按照1：20的液料比，将鱼皮置于醋酸溶液中超声，超声功率为200
‑
600W，超声时间为10
‑
30min；所述酶法处理是用质量...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓付敏，
申请(专利权)人：烟台海昊生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：