【技术实现步骤摘要】
一种以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法及装置
[0001]本专利技术涉及聚合物敏感膜离子选择性电极，具体的说是一种以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法及装置。
技术介绍
[0002]细菌细胞悬浮液中活细菌和凋亡细菌的鉴定在细菌细胞增殖测定，药物敏感性试验，药物筛选等方面应用频繁。因此，建立准确有效的检测方法判断样本中细菌的凋亡与否尤为重要。正常情况下磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine，PS)位于细菌细胞膜的内部，当细菌发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸可从细胞膜内侧反转到细胞膜表面。膜联蛋白作为一种磷脂结合蛋白，能够特异性识别结合磷脂酰丝氨酸。目前最常用的检测细菌凋亡的方法是基于荧光的染色技术，将膜联蛋白进行荧光素标记制得荧光探针，从而检测凋亡。早期基于荧光的显微镜观测技术易于操作，因此被广泛用于信号分析。但由于计数室的定量比较麻烦，显微镜通常只提供定性结果。为解决这个限制，研究者使用基于荧光的酶标仪、荧光计和流式细胞仪，开发用于定量检测凋亡细菌的方法。然而膜联蛋白与磷脂酰丝氨酸的结合具有Ca
2+
依赖...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法，其特征在于：以多肽或其衍生物作为识别分子和信号传导分子捕获待检测样品中的凋亡细菌，使多肽在离子交换剂掺杂的聚合物膜电极电位改变，实现对凋亡细菌的定性/定量检测。2.按权利要求1所述的以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法，其特征在于：所述识别凋亡细菌的多肽能够特异性识别结合磷脂酰丝氨酸，序列为NFRLKAGAKIRFG。3.按权利要求1所述的以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法，其特征在于：所述作为识别分子和信号传导分子的多肽或其衍生物修饰于磁珠表面，形成多肽功能化磁珠，通过其特异性识别结合凋亡细菌细胞膜上外翻的磷脂酰丝氨酸，实现对凋亡细菌的捕获。4.按权利要求1所述的以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法，其特征在于：所述多肽功能化磁珠捕获待检测样品中的凋亡细菌，导致多肽功能化磁珠中多肽电荷以及电荷密度发生变化，在外加磁场的作用下多肽功能化磁珠上多肽有效萃取到聚合物敏感膜量改变，引起电极电位变化，实现对待检测液中凋亡细菌的定量检测。5.按权利要求1
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4任意一项所述的以多肽为识别分子检测凋亡细菌的方法，其特征在于：所述离子交换剂掺杂的聚合物膜电极为电极底部粘附掺杂离子交换剂的聚合物膜，所述膜成分按重量份数计，20％
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80％膜基体、20％
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【专利技术属性】
技术研发人员：丁家旺，张晗，秦伟，
申请(专利权)人：中国科学院烟台海岸带研究所，
类型：发明
国别省市：
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