一种检测NSCLC标志物CYFRA21-1上转换荧光测试试剂盒、制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种检测NSCLC标志物CYFRA 21

【技术实现步骤摘要】
一种检测NSCLC标志物CYFRA 21
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1上转换荧光测试试剂盒、制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种基于ATRP信号放大策略构建的检测NSCLC标志物CYFRA21
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1上转换荧光测试试剂盒、制备方法和应用，属于生物分析


技术介绍

[0002]肺癌是一种常见的呼吸系统恶性肿瘤，也是全球癌症相关死亡的最主要原因。研究表明，到2025年我国每年因肺癌死亡人数预计可达100万。肺癌病理分为小细胞肺癌(small cell lung cancer)和非小细胞肺癌(non
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small cell lung cancer)，其中非小细胞肺癌约占肺癌的85％。肺癌的早期诊断是提高肺癌患者生存率、改善预后的关键。血清标志物在肺癌的早期诊断中具有重要意义。用于小细胞肺癌(SCLC)筛查、诊疗效果评估的标志物主要有神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌症胚胎抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCC)等，而CYFRA21
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1(细胞角蛋白19可溶性片段)是非小细胞肺癌最有价值的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于ATRP信号放大策略构建的检测NSCLC标志物CYFRA 21
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1上转换荧光测试试剂盒，其特征在于，包括以下原料：羧基磁珠、UCNPs、Ab1、Ab2、BIBA、HEMA、CuBr2、ME6TREN、AA。2.根据权利要求1所述的基于ATRP信号放大策略构建的检测NSCLC标志物CYFRA21
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1上转换荧光测试试剂盒，其特征在于，还包括BSA、NHS、EDC、PBS缓冲液。3.根据权利要求1或2所述的基于ATRP信号放大策略构建的检测NSCLC标志物CYFRA21
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1上转换荧光测试试剂盒，其特征在于，部分原料使用时需配制成溶液，其中，UCNPs溶液浓度为5mg/mL，Ab1溶液浓度为1μg/mL，Ab2溶液浓度为4μg/mL，BIBA溶液浓度为30mM，HEMA溶液浓度为60mM，CuBr2/ME6TREN溶液中CuBr2和ME6TREN浓度均为10mM，AA溶液的浓度为2mM，BSA溶液浓度为10mg/mL，NHS溶液浓度为50mM，EDC溶液浓度为200mM。4.根据权利要求1所述的基于ATRP信号放大策略构建的检测NSCLC标志物CYFRA21
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1上转换荧光测试试剂盒，其特征在于，所述UCNPs为NaYF4:Er,Yb。5.一种检测NSCLC标志物CYFRA21
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1的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将BIBA活化之后，连接Ab2，制得Ab2‑
BIBA；(2)将UCNPs活化之后，连接HEMA，制得UCNPs/HEMA；(3)活化羧基磁珠，之后连接Ab1，孵育；(4)封闭步骤(3)之后磁珠上未反应活化位点；(5)添加待检测样品，孵育；(6)加入步骤(1)连接好的Ab2‑
BIBA，孵育；(7)加入步骤(2)连接好的UCNPs/HEMA、CuBr2/ME6TREN溶液、AA溶液，孵育；(8)将步骤(7)清洗之后的磁珠，分散在PBS缓冲液中，测试发射光谱。6.根据权利要求5所述的检测NSCLC标志物CYFRA21
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1的方法，其特征在于，具体方法为：(1)连接ATRP反应的引发剂BIBA和Ab2①
量取250μL的BIBA溶液，加入NHS溶液和EDC溶液各250μL，放入摇床中振摇反应过夜；
②
在上述步骤
①
溶液中加入250μL的Ab2溶液，放入摇床中振摇反应2h，制得Ab2‑

【专利技术属性】
技术研发人员：杨怀霞，马乐乐，刘艳菊，侯梦园，高海洋，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：